產(chǎn)品簡(jiǎn)介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50次 |
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) | 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
英文名稱 | TannerellaforsythiaPCR |
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上海研生實(shí)業(yè)有限公司 |
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參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間:2023-03-16 22:13:29瀏覽次數(shù):229
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50次 |
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) | 主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
英文名稱 | TannerellaforsythiaPCR |
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制,。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),,分別配制成200 U/L,,100 U/L,50 U/L,,25 U/L,,12.5 U/L,6.25 U/L,,3.12 U/L,,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,,混勻即可,,其余濃度以此類推。
3,、 樣品稀釋液:1×20ml,。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml,。
產(chǎn)品名稱 | 福賽斯坦納菌PCR檢測(cè)試劑盒 |
英文名稱 | Tannerella forsythiaPCR |
規(guī)格 | 50次 |
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注意事項(xiàng):
1.整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū),、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服,、儀器,、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用,;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭,;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作,;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置,。
2.為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè),;樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰,、陽(yáng)性對(duì)照,。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),,并單獨(dú)存放,。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記,。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用,。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄,。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,,室溫放置5分鐘使其溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,,蓋緊管蓋,。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘,。4℃下12000rpm離心15分鐘,。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層,。RNA全部被分配于水相中,。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中,。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘,。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),,清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘,。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,,使其溶解,,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度,。
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片,、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè),、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片,、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC,、iTRAQ,、TMT、Label-free,、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取,、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot,、Co-ip EMSA,、CHIP、免疫熒光,、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色,、特殊染色、組織切片,、免疫組化,、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS,、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞,、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
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