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脆弱擬桿菌PCR檢測試劑盒

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更新時間:2023-03-05 21:53:23瀏覽次數:153

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,,謝謝!

產品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50次
應用領域 生物產業(yè) 主要用途 僅供科研實驗
英文名稱 BacteroidesfragilisPCR    
脆弱擬桿菌PCR檢測試劑盒的相關產品:傳染性胸膜肺炎放線桿菌(APP)核suan檢測試劑盒傳染性胰臟壞死病病毒PCR檢測試劑盒Infectious Pancreatic Necrosis Virus(IPNV)RTPCR傳染性造血器官壞死病病毒PCR檢測試劑盒Infectious Hematopoietic Necrosis Virus(IHNV)RTPCR傳染性造血器官壞死病毒(IHNV)核su

詳細介紹

服務流程:

公司產品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務,。

產品名稱

英文名稱

規(guī)格

脆弱擬桿菌PCR檢測試劑盒

Bacteroides fragilisPCR

50次

產品特點:

◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,,無非特異性擴增,;

◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝,;

◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測,;

◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒,。

16.jpg

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer

5 μl     dNTP mix (2mM)

4 μl     引物1(10pM)

2 μl     引物2(10pM)

2 μl     Taq酶 (2U/μl)

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)

1 μl      加ddH2O至 50 μl

PCR儀有無熱蓋,,不加或添加石蠟油,。

2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min,。

3:結束反應,,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,,需用100μl進行抽提反應混合液,,以除去石蠟油;否則,,直接取5-10μl電泳檢測,。

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實驗過程:

一、試劑準備

1. DNA模板

2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,,憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計,。因此,,擴增不同的基因需要設計不同的引物)

3.10×PCR Buffer

4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP,、dGTP,、dTTP各2mM

5.Taq酶

二、操作步驟

1.在冰浴中,,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中,。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物1(10pM)               2μl

引物2(10PM)              2μl

Taq酶(2U/μl)            1μl

DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl

ddH2O至               50 μl

PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油,。

2.調整好反應程序,。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增,。一般:在93℃預變性3-5min,,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,,zui后在72℃ 保溫7min,。

3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。

4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油,;否則,,直接取5-10μl電泳檢測。

三,、注意事項

1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行,。設立一個專用的PCR實驗室。

2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響,。一般而言,,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好,。

3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染,。操作過程中均應戴手套。

4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌,。

5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。

6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌,。

7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻,。

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