詳細介紹
ELISA 試驗時,,注意事項如下:
1. 正式試驗時,,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,,以保證實驗結(jié)果的準確性,。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),,可采用羊血清,、兔血清或BSA等封閉,。
2. 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,,如聚氯乙烯、聚苯乙烯,、聚丙酰胺和纖維素等,。其形式可以是凹孔平板、試管,、珠粒等,。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,,在同一實驗條件下進行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,,據(jù)此判明其吸附性能是否良好,。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間,。吸附溫度,,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1,、1.0和10μg/ml等)進行包被后,,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值,。選擇OD值而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml,。
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份),。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度,。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉,、安全、有明顯地顯色反應(yīng),,而本身無色,。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護,。有條件者應(yīng)使用不致癌,、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體,。底物作用一段時間后,,應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng),。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜,。底物使用液必須新鮮配制,,尤其是H2O2在臨用前加入 。
詳細參考數(shù)值:
產(chǎn)品名稱:銅藍蛋白ELISA檢測試劑盒
英文名稱:Ceruloplasmin
檢測范圍:37.5μg/mL~1200μg/mL
貨號:YS-E97384
性狀:盒狀液體,。
實驗方法:競爭法,、一步法、夾心法,、高敏法等,。
作用范圍:科學(xué)研究。
樣品形式:血清血漿細胞培養(yǎng)上清其它生物液體
保質(zhì)期:6個月,,本公司試劑盒系列產(chǎn)品均為**批次,,請放心購買!
庫存信息: *√質(zhì)量保證√庫存充足√
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標本因素,;
②試劑因素,;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,,必能得出準確的實驗結(jié)果,,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!?
注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,,可分批次操作,,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,,用吸水紙吸干孔外試劑,;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,,并經(jīng)常校正其準確性,,此外,要做到一份樣本一個移液頭,,防止交叉污染,。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度,、較長反應(yīng)時間的條件,;
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,,因此盡量采用水?。?/span>
3.洗板:
①手工洗板時,,拍板時要垂直,,避免交叉污染,,用力不能過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離,;
②洗板機洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,,實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法,,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當增加洗板的次數(shù),;
4.顯色:
ELISA試劑盒中,,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液,;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min,。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,,但A,、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,,定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時,,反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標儀讀取結(jié)果,,酶標儀不應(yīng)置于陽光或強光照射下,,需先預(yù)熱15-30 min再進行測試。
優(yōu)點:
1,、*抗體----高效,、靈敏、特異
2,、規(guī)范包被操作----吸附均勻,吸附性好,,空白值低,,孔底透明度高
3、良好的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,,可靠性強
4,、購買本公司的ELISA試劑盒,免費代測
5,、技術(shù)服務(wù)要求:專業(yè),,規(guī)范,,高效
6、適用于體液,、組織勻漿液,、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本
7,、可檢測動物類型豐富:人,、猴、大鼠,、小鼠,、豚鼠、黃金地鼠,、兔,、豬、犬,、牛,、綿羊、山羊,、鵝,、雞、蝦,、河蟹,、鱸魚、斑馬魚等
8,、可檢測指標齊全:炎癥因子,、血管生成素、動脈粥樣硬化因子,、趨化因子,、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶、脂肪因子等等
9,、經(jīng)濟,、實惠、可靠,,完善,、穩(wěn)定的實驗體系,科研隊伍,,良好的實驗設(shè)備,、準確可靠的實驗結(jié)果,是您可靠的合作伙伴。
1mL Protein A磁珠
1瓶 G422細胞株 G422 低溫運輸和保存
2 ug pOJ260 pOJ260 低溫運輸,,-20℃保存
100mL Ammonium Sulfate Solution, Saturated(飽和硫酸銨溶液) Ammonium Sulfate Solution, Saturated 常溫保存
250mL Acetate Buffer(乙酸緩沖液),,1M,pH3.0 Acetate Buffer,1M,pH3.0 常溫保存
2 ug pGEX-6P-2 pGEX-6P-2 低溫運輸,,-20℃保存
1瓶 NB-4細胞株 NB-4 低溫運輸和保存
2 ug pmCherry-LC3 pmCherry-LC3 低溫運輸,,-20℃保存
10次 一站式RNA電泳套裝 One-Stop RNA Electrophoresis Kit 4℃保存
200 mL 人中性粒細胞分離液1.085 Cell Separation Solution -20℃保存
2 ug pBLADE-SX pBLADE-SX 低溫運輸,-20℃保存
1瓶 MA-891細胞株 MA-891 低溫運輸和保存
1張 硝酸纖維素膜,,13×20 cm(Tiandz) Nitrocellulose Membrane 常溫
銅藍蛋白ELISA檢測試劑盒溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基 用于壓力蒸汽滅菌效果評價(GB15981-1995和GB15979-2002),。 250g
溴甲酚紫葡萄糖肉湯 用于低酸性罐頭食品商業(yè)無菌檢驗 250g
溴甲酚紫葡萄糖肉湯 用于培養(yǎng)細菌和鑒別細菌發(fā)酵葡萄糖試驗,還用于低酸性罐頭食品商業(yè)無菌檢驗(GB/T4789.26-2003),。 250g
需氧,、厭氧菌瓊脂培養(yǎng)基(FT) 用于一般細菌培養(yǎng)、復(fù)壯,、增菌等,,也可用于消毒劑定性消毒效果測定。(WS) 250g
選擇性胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基配套試劑 每支多粘菌素1mg和萘啶酮酸1mg,,添加于225mL胰蛋白胨大豆肉湯(024051)中配成選擇性胰蛋白胨大豆肉... 10支/盒
血平板 用于營養(yǎng)要求較高的細菌的培養(yǎng)及溶血試驗(GB 4789.10-2010,,GB/T4789.37-2008 ,GB 4789.30-2... 90mm×20個
血平板 用于營養(yǎng)要求較高的細菌的培養(yǎng)及溶血試驗,。(GB,、ISO) 90mmX20個
血平板 (成品培養(yǎng)基) 用于營養(yǎng)要求較高的細菌的培養(yǎng)及溶血試驗 20個/盒
血瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 加入脫纖維羊血或兔血,制成血瓊脂培養(yǎng)基,,用于營養(yǎng)要求較高的細菌的培養(yǎng)及溶血試驗 250g
血瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 加入脫纖維羊血或兔血,,制成血瓊脂培養(yǎng)基,用于營養(yǎng)要求較高的細菌的培養(yǎng)及溶血試驗(GB 4789.10-... 250g
蕈糖 細菌生化鑒定 20支/盒
芽孢染色液 用于細菌芽孢染色,。 10mL×2瓶