詳細介紹
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝,;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒,。
服務流程:
公司產(chǎn)品僅用于科研接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結果交付——售后服務,。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
泰國利什曼原蟲PCR檢測試劑盒 | Leishmania siamensisPCR | 50次 |
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,,而不能從無到有,憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設計的引物,。可以是DNA也可以是RNA,,一般20多bp,,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP,、dCTP、dGTP,、dTTP各2mM
5.Taq酶
二,、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應程序,。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增,。一般:在93℃預變性3-5min,,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min,。
3.結束反應,,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,,以除去石蠟油;否則,,直接取5-10μl電泳檢測,。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行,。設立一個專用的PCR實驗室,。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,,只要能夠得到可靠的結果,,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染,。操作過程中均應戴手套,。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌,。
5.試劑都應該以大體積配制,,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性,。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌,。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,,并且要充分混勻。
公司正在出售的產(chǎn)品:
半胱氨suan亞磺suan脫羧mei(CSAD)重組蛋白英文名稱:Recombina Cysteine Sulfinic Acid Decarboxylase (CSAD)物種:Homo sapiens (Human,,人)
反轉錄轉座子樣蛋白1(RTL1)重組蛋白英文名稱:Recombina Retrotransposon Like Protein 1 (RTL1)物種:Mus musculus (Mouse,,小鼠)
DNA指導聚合meiδ1(POLd)重組蛋白英文名稱:Recombina Polymerase DNA Directed Delta 1 (POLd)物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
半胱氨suan共軛β裂解mei2(CCbL2)重組蛋白英文名稱:Recombina Cysteine Conjugate Beta Lyase 2 (CCbL2)物種:Homo sapiens (Human,,人)
ADP核糖轉移mei5(ART5)重組蛋白英文名稱:Recombina ADP Ribosyltransferase 5 (ART5)物種:Mus musculus (Mouse,,小鼠)
絲氨suan羧肽mei1(SCPEP1)重組蛋白英文名稱:Recombina Serine Carboxypeptidase 1 (SCPEP1)物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
脯氨酰tRNA合成mei2(PARS2)重組蛋白英文名稱:Recombina Prolyl tRNA Syhetase 2, Mitochondrial (PARS2)物種:Mus musculus (Mouse,,小鼠)
半胱氨酰tRNA合成mei2(CARS2)重組蛋白英文名稱:Recombina Cysteinyl tRNA Syhetase 2, Mitochondrial (CARS2)物種:Homo sapiens (Human,,人)
谷氨酰tRNA合成mei2(EARS2)重組蛋白英文名稱:Recombina Glutamyl tRNA Syhetase 2, Mitochondrial (EARS2)物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
溶血?;D移mei2(LPCAT2)重組蛋白英文名稱:Recombina Lysophosphatidylcholine Acyltransferase 2 (LPCAT2)物種:Rattus norvegicus (Rat,,大鼠)
泰國利什曼原蟲PCR檢測試劑盒結合珠蛋白(Hpt)ELISA試劑盒Rabbit Haptoglobin(Hpt)ELISA Kit
結締組織生長因子(CTGF)ELISA試劑盒Rabbit Connective Tissue Growth Factor(CTGF)ELISA Kit
窖蛋白(CAV1)ELISA試劑盒Rabbit Caveolin 1(CAV1)ELISA Kit
堿性磷suanmei(ALP)ELISA試劑盒Rabbit Alkaline Phosphatase(ALP)ELISA Kit
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,,不加或添加石蠟油,。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增,。一般:在93℃預變性3-5min,,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,,在72℃ 保7min,。
3:結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存,。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油,;否則,,直接取5-10μl電泳檢測。