詳細(xì)介紹
操作程序:
由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱,、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線,;
商定服務(wù)收費(fèi),、付款方式、服務(wù)期限等,,并簽定技術(shù)服務(wù)合同,。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本(100mg組織或107個(gè)細(xì)胞),本公司不接受您提供的RNA樣本
PCR所需引物/探針(如果用探針?lè)ǎ梢杂赡约禾峁部梢晕斜竟驹O(shè)計(jì)合成(費(fèi)用另計(jì))。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提,、RNA定量,、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增,、數(shù)據(jù)分析,。
提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告,包括實(shí)驗(yàn)過(guò)程,、所用儀器試劑,、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等,。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
48T 0.2PCR管 | YS-01P6388 |
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書 1份
定量PCR方法:
a,、競(jìng)爭(zhēng)法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個(gè)新內(nèi)切位點(diǎn)的外源競(jìng)爭(zhēng)性模板。在同一反應(yīng)管中,,待測(cè)樣品與競(jìng)爭(zhēng)模板用同一對(duì)引物同時(shí)擴(kuò)增(其中一個(gè)引物為熒光標(biāo)記),。擴(kuò)增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,競(jìng)爭(zhēng)性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個(gè)片段,,而待測(cè)模板不被酶切,,可通過(guò)電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測(cè)定熒光強(qiáng)度,,根據(jù)已知模板推測(cè)未知模板的起始拷貝數(shù),。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物,,內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成,。上游引物用熒光標(biāo)記,下游引物不標(biāo)記,。在模板擴(kuò)增的同時(shí),,內(nèi)標(biāo)也被擴(kuò)增。在PCR產(chǎn)物中,由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長(zhǎng)度不同,,二者的擴(kuò)增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來(lái),,分別測(cè)定其熒光強(qiáng)度,以內(nèi)標(biāo)為對(duì)照定量待檢測(cè)模板,。
c,、PCR-ELISA法
利用di高辛或等標(biāo)記引物,擴(kuò)增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合,,再加入抗di高辛或酶標(biāo)抗體-辣根過(guò)氧化物酶結(jié)合物,,最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR-ELISA法只是定性實(shí)驗(yàn),,若加入內(nèi)標(biāo),,作出標(biāo)準(zhǔn)曲線,也可實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)目的,。
使用方法:
一,、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行,。
2,、血液樣品:用抽取受檢者靜脈血2mL,注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,,立即混勻,。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢,。
4,、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢,。
二,、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照,。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,,6,,5,4,,3,,2,。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同),。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,。放冰上待用,。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),,充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭,,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,。放冰上待用,。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用,。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù),。
丁甲酯 Standard for GC,>99.5% (GC)異丁氧基乙酯 ≥98%, FCC小鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)免疫試劑盒
丁甲酯 99%迷迭香油 FCC小鼠低密度脂蛋白(LDL)免疫試劑盒
丁甲酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,,≥99.5% (GC),用于環(huán)境分析乙硫噻唑 99%小鼠的牛血清白蛋白殘留檢測(cè)免疫試劑盒
異丁 >99.0%(GC)丁香 98%小鼠蛋白聚糖4(PRG4)免疫試劑盒
異丁 CP,98%蘇合香酯 97%小鼠蛋白激B(PKB)免疫試劑盒
乙甲酯 GCS,,≥99.9% (GC) 麝香T 98%小鼠膽囊收縮/腸促胰肽(CCK)免疫試劑盒
乙甲酯 AR,98%麝香T ≥98%, Kosher小鼠乙酰轉(zhuǎn)移(ChAT)免疫試劑盒
乙甲酯 CP,97.5% 麝香草酚 AR,98%小鼠膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)免疫試劑盒
乙甲酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,,99.9%(GC)麝香草酚 >99.0%(GC)小鼠膽固(CH)免疫試劑盒
乙甲酯 ≥99%(GC)四氫芳樟 98%小鼠單克隆抗體亞型鑒定免疫試劑盒
乙甲酯 for HPLC, ≥99.5% (GC)四氫香葉 98%小鼠單核趨化蛋白5(MCP-5)免疫試劑盒
乙甲酯 無(wú)水級(jí), 99.5%麝香草酚 ≥99%, FCC小鼠單核趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)免疫試劑盒
肉桂甲酯 99%10-十一烯 98%小鼠單核趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)免疫試劑盒
肉桂甲酯 ≥99%, FCC, Kosher, FG桃 98%小鼠單核趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)免疫試劑盒
甲酯 99%10-十一烯 97%小鼠單核趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫試劑盒
豬源性成分核酸檢測(cè)試劑盒48T 0.2PCR管人白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒,2-基乙酯磷化內(nèi)收蛋白a1抗體
小鼠巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒,順-雙(2,2-二吡啶基)二化釕(II)二水合物自噬體ATG16L2蛋白抗體
小鼠c-jun ELISA試劑盒,草鈰(III)水合物, REacton性磷抗體
小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒,草鈰(III)水合物, REacton性磷抗體
大鼠26S蛋白體(26S PSM)ELISA試劑盒,4-溴鄰二光激A相互作用蛋白1抗體
大鼠蛋白激B(PKB)ELISA試劑盒,4-溴鄰二載脂蛋白樣蛋白6抗體
大鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒,5-戊酰凋亡相關(guān)蛋白TGFb信號(hào)抗體
豚鼠促卵泡(FSH)ELISA試劑盒,5-戊酰A2LD1蛋白抗體