化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
操作程序：
由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料（如：基因名稱,、序列等信息）,，我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線；
商定服務(wù)收費(fèi),、付款方式、服務(wù)期限等,，并簽定技術(shù)服務(wù)合同,。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本（100mg組織或107個(gè)細(xì)胞），本公司不接受您提供的RNA樣本
PCR所需引物/探針（如果用探針?lè)ǎ?，可以由您自己提供,，也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成（費(fèi)用另計(jì)）。如果由您自己提供,，必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,，本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提,、RNA定量,、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增,、數(shù)據(jù)分析,。
提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括實(shí)驗(yàn)過(guò)程,、所用儀器試劑,、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等,。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
48T | YS-01P6379 |
自備物品：
15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃
準(zhǔn)備物品
清理液（A） 毫升
染色液（t B） 微升
稀釋液（C） 毫升
溶解液（tD） 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份
定量PCR方法：
a,、競(jìng)爭(zhēng)法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個(gè)新內(nèi)切位點(diǎn)的外源競(jìng)爭(zhēng)性模板。在同一反應(yīng)管中,，待測(cè)樣品與競(jìng)爭(zhēng)模板用同一對(duì)引物同時(shí)擴(kuò)增（其中一個(gè)引物為熒光標(biāo)記）,。擴(kuò)增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物，競(jìng)爭(zhēng)性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個(gè)片段,，而待測(cè)模板不被酶切,，可通過(guò)電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開(kāi)，分別測(cè)定熒光強(qiáng)度,，根據(jù)已知模板推測(cè)未知模板的起始拷貝數(shù),。
b,、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物，內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成,。上游引物用熒光標(biāo)記,，下游引物不標(biāo)記。在模板擴(kuò)增的同時(shí),，內(nèi)標(biāo)也被擴(kuò)增,。在PCR產(chǎn)物中，由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長(zhǎng)度不同,，二者的擴(kuò)增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開(kāi)來(lái),，分別測(cè)定其熒光強(qiáng)度，以內(nèi)標(biāo)為對(duì)照定量待檢測(cè)模板,。
c,、PCR－ELISA法
利用di高辛或等標(biāo)記引物，擴(kuò)增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合,，再加入抗di高辛或酶標(biāo)抗體－辣根過(guò)氧化物酶結(jié)合物,，最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR－ELISA法只是定性實(shí)驗(yàn),，若加入內(nèi)標(biāo),，作出標(biāo)準(zhǔn)曲線，也可實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)目的,。
使用方法：
一,、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行,。
2,、血液樣品：用抽取受檢者靜脈血2mL，注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,，立即混勻,。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢,。
4,、病灶部位樣品：取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢,。
二,、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）,。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照,。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,，分別為 7，6,，5,，4，3,，2,。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（最好用帶芯槍頭，下同）,。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,。放冰上待用,。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,。放冰上待用
6. 換槍頭,，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘,，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照,。放冰上待用,。
服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
正丁 ≥99.9%, FCC桉葉油 99%小鼠基質(zhì)衍生因子1α(SDF-1α/SDF1A)免疫試劑盒
水楊丁酯 99%桉葉油 萜GC標(biāo)準(zhǔn)品 ,>99.5% (GC)小鼠基質(zhì)金屬蛋白抑制因子4(TIMP-4)免疫試劑盒
乙丁酯 ≥99%, FCC桉葉油 ≥99%, FCC小鼠基質(zhì)金屬蛋白抑制因子3(TIMP-3)免疫試劑盒
甲縮 98%4-乙基愈創(chuàng)木酚 99%小鼠基質(zhì)金屬蛋白抑制因子2(TIMP-2)免疫試劑盒
甲縮 98%, Kosher4-乙基愈創(chuàng)木酚 ≥98%, FCC, FG小鼠基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1(TIMP-1)免疫試劑盒
香茅 98%乙基麥芽酚 99%小鼠基質(zhì)金屬蛋白9/明膠B(MMP-9/Gelatinase B)免疫試劑盒
香茅 分析標(biāo)準(zhǔn)品, ≥99.0% (GC)乙基麥芽酚 99%, FCC, FG小鼠基質(zhì)金屬蛋白8/中性粒膠原(MMP-8)免疫試劑盒
丁香油 CP乙酰乙酯 99%小鼠基質(zhì)金屬蛋白7(MMP-7)免疫試劑盒
丁香油 顯微鏡用2-甲基丁乙酯 98%小鼠基質(zhì)金屬蛋白5(MMP-5)免疫試劑盒
檸檬 97%乙酯 98%小鼠基質(zhì)金屬蛋白4(MMP-4)免疫試劑盒
檸檬 ≥96%,，F(xiàn)CC反-3-己烯乙酯 98%小鼠基質(zhì)金屬蛋白3(MMP-3)免疫試劑盒
肉桂 CP,，98%呋喃酮 98%小鼠基質(zhì)金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)免疫試劑盒
肉桂 standard for GC,>99.5% (GC) 呋喃酮 ≥98%, FCC, FG小鼠基質(zhì)金屬蛋白2/明膠A(MMP2/Gel A)抗體免疫試劑盒
肉桂 AR，99%呋喃酮 natural, ≥98%, FG小鼠基質(zhì)金屬蛋白13(MMP-13)免疫試劑盒
肉桂 分析標(biāo)準(zhǔn)品檸檬 97%小鼠基質(zhì)金屬蛋白10(MMP-10)免疫試劑盒
羊源性成分核酸檢測(cè)試劑盒48T大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白（LF/LTF）ELISA試劑盒,3-甲氧基硫酚膜粘連蛋白11抗體
大鼠糖原磷化同工MM（GP-MM）ELISA試劑盒,L-(-)-半乳糖膜粘連蛋白13抗體
大鼠骨膠原交聯(lián)（Cr）ELISA試劑盒,L-(-)-半乳糖磷化促腎上腺皮質(zhì)激ACTH抗體
大鼠去甲腎上腺（NA）ELISA試劑盒,硫釓(III)磷化蛋白激AKT1抗體
豬褪黑（MT）ELISA試劑盒,4,6-二甲基嘧啶磷化蛋白激B抗體
猴胰島（INS）ELISA試劑盒,(甲基)甲基二硅烷磷化鈉ATP蛋白a1抗體
鹿紅膜蛋白（EMP）ELISA試劑盒,(甲基)甲基二硅烷磷化內(nèi)收蛋白a1抗體
兔子脫氫表雄酮硫酯（DHEA-S）ELISA試劑盒,2-(2H-Tetrazol-5-yl)-Phenylboronic Acid磷化腺單磷活化蛋白激α1抗體
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