詳細(xì)介紹
ELISA 試驗(yàn)時(shí),注意事項(xiàng)如下:
1. 正式試驗(yàn)時(shí),,應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,。有時(shí)本底較高,,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清,、兔血清或BSA等封閉,。
2. 在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,,如聚氯乙烯、聚苯乙烯,、聚丙酰胺和纖維素等,。其形式可以是凹孔平板、試管,、珠粒等,。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板,。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),,觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好,。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),,要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時(shí),。蛋白質(zhì)包被適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),,觀察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值而蛋白量少的濃度,。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml,。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物,、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度,。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全,、有明顯地顯色反應(yīng),,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,,應(yīng)注意防護(hù),。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng),。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜,。底物使用液必須新鮮配制,,尤其是H2O2在臨用前加入 。
詳細(xì)參考數(shù)值:
產(chǎn)品名稱:17-酮皮質(zhì)類固醇ELISA檢測(cè)試劑盒
英文名稱:l7-ketosteroid
檢測(cè)范圍:2.5μmol/L~80μmol/L
貨號(hào):YS-E96330
性狀:盒狀液體,。
實(shí)驗(yàn)方法:競(jìng)爭(zhēng)法,、一步法、夾心法,、高敏法等,。
作用范圍:科學(xué)研究,。
樣品形式:血清血漿細(xì)胞培養(yǎng)上清其它生物液體
保質(zhì)期:6個(gè)月,本公司試劑盒系列產(chǎn)品均為**批次,,請(qǐng)放心購(gòu)買,!
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引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素,;
③操作因素,。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù),!?
注意事項(xiàng):
1加樣:
①實(shí)驗(yàn)樣本過多時(shí),可分批次操作,,以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長(zhǎng)造成的誤差,;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑,;
③作定量試驗(yàn)時(shí),,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,,此外,,要做到一份樣本一個(gè)移液頭,防止交叉污染,。
2.溫育:
①如有兩種溫度,,盡量使用較低的溫育溫度、較長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間的條件,;
②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測(cè)量觀察,;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會(huì)造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水??;
3.洗板:
①手工洗板時(shí),拍板時(shí)要垂直,,避免交叉污染,,用力不能過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離,;
②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,,若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,,實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法,,在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑,。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,,要臨用前30 min配制且必須避光,。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A,、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械,。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測(cè)定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí),,反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm,;定量測(cè)定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽(yáng)光或強(qiáng)光照射下,,需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測(cè)試,。
優(yōu)點(diǎn):
1、*抗體----高效,、靈敏,、特異
2、規(guī)范包被操作----吸附均勻,,吸附性好,,空白值低,孔底透明度高
3,、良好的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,,可靠性強(qiáng)
4、購(gòu)買本公司的ELISA試劑盒,,免費(fèi)代測(cè)
5,、技術(shù)服務(wù)要求:專業(yè),規(guī)范,,高效
6,、適用于體液、組織勻漿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本
7,、可檢測(cè)動(dòng)物類型豐富:人,、猴、大鼠、小鼠,、豚鼠,、黃金地鼠、兔,、豬,、犬、牛,、綿羊,、山羊、鵝,、雞,、蝦、河蟹,、鱸魚,、斑馬魚等
8、可檢測(cè)指標(biāo)齊全:炎癥因子,、血管生成素,、動(dòng)脈粥樣硬化因子、趨化因子,、生長(zhǎng)因子基質(zhì)金屬蛋白酶,、脂肪因子等等
9、經(jīng)濟(jì),、實(shí)惠,、可靠,完善,、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系,,科研隊(duì)伍,良好的實(shí)驗(yàn)設(shè)備,、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,,是您可靠的合作伙伴。
硫酸粘桿菌素(標(biāo)準(zhǔn)品) Colistin Sulphate 1264-72-8 質(zhì)量規(guī)格:效價(jià)測(cè)定
鹽酸依氟鳥氨酸 Eflornithine HCl 96020-91-6 質(zhì)量規(guī)格:>98%,水合物
色甘酸鈉 Cromolyn sodium 15826-37-6 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP32,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
色甘酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Cromolyn sodium 15826-37-6 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
環(huán)孢菌素,環(huán)孢素A,環(huán)孢霉素A Cyclosporine A 59865-13-3 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
環(huán)孢菌素,環(huán)孢素A,環(huán)孢霉素A(標(biāo)準(zhǔn)品) Cyclosporine A 59865-13-3 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
鹽酸噻氯匹定 Ticlopidine HCl 53885-35-1 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
鹽酸噻氯匹定(標(biāo)準(zhǔn)品) Ticlopidine HCl 53885-35-1 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
阿糖胞苷(進(jìn)分) Cytarabine 147-94-4 質(zhì)量規(guī)格:進(jìn)分,Sigma C1768
阿糖胞苷 Cytarabine 147-94-4 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)
阿糖胞苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Cytarabine 147-94-4 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
達(dá)卡巴嗪 Dacarbazine 891986 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,USP31,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
達(dá)卡巴嗪(標(biāo)準(zhǔn)品) Dacarbazine 891986 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
達(dá)沙替尼(無水) Dasatinib 302962-49-8 質(zhì)量規(guī)格:含量>99.0%,,無水
達(dá)沙替尼(無水)(標(biāo)準(zhǔn)品) Dasatinib 302962-49-8 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
17-酮皮質(zhì)類固醇ELISA檢測(cè)試劑盒Palatinose Hydrate 異麥芽酮糖-帕拉金糖 100g 瓶
抗酸染色液(試劑盒) 3×250ml 瓶
Menadione 維生素K3 10g 瓶
D-Glutamic acid D-谷氨酸 10g 瓶
*0感受態(tài)細(xì)胞 10×100ul 袋
酵母基因組DNA提取試劑盒 100T 盒
兔抗馬IgG-HRP 0.1ml 支
彩虹245plus廣譜蛋白Marker(5-245KD) 250ul 支
新生牛血清 200ml 瓶
Scopolamine hydrobromide-Hyoscine hydrobromide 東莨菪堿 114-49-8 20mg