詳細介紹
NRK-52E(大鼠腎細胞)來源于肺灌洗時的正常NRK-52E(大鼠腎細胞),,NR8383細胞在Gerbil肺細胞連續(xù)培養(yǎng)液存在下培養(yǎng)了8-9個月,。隨后,NR8383細胞不再需要外源生長因子,。通過有限稀釋法,,從單個細胞克隆并亞克隆NR8383細胞,并3次用軟瓊脂亞克隆,。NR8383細胞表現(xiàn)出巨噬細胞的特性:吞噬酵母多糖和銅綠,、非特異性脂酶活性、Fc受體,、氧化降解,;分泌IL-1、TNF-β和IL-6,,可重復(fù)地響應(yīng)外源生長因子,。NR8383細胞響應(yīng)博萊霉素,分泌TNF-β前體,。NR8383細胞在博萊霉素刺激下,,TNF-β mRNA表達也上升,。NR8383細胞對內(nèi)毒素敏感,1-10ng/ml的LPS水平抑制增生達50%,。即使達到0.001mg/ml的水平,,LPS抑制還是無毒且在后續(xù)過程中可逆的。NR8383細胞提供了高響應(yīng)的肺泡巨噬細胞的均一來源,,可以用于體外研究巨響細胞相關(guān)活性,,此細胞懸浮-貼壁混合生長。
細胞名稱:
種屬:人
年齡(性別):男,;16歲
組織來源:外周血,;B淋巴母細胞;Burkitt's淋巴瘤
生長特性:懸浮
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
生長培養(yǎng)基
RPMI-1640(貨號:PM150110)+10% FBS(貨號:164210-500)+1% P/S(貨號:PB180120)
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,,95%,;CO2,,5%
溫度:37℃
說明
規(guī)格:70%密度的25cm2培養(yǎng)瓶的細胞一瓶
特點:細胞代數(shù)為4代以內(nèi)包裝:內(nèi)層無菌自封袋,;防壓泡沫盒;外層防壓保溫氣泡袋,;
說明書細胞來源:ATCC,、sciencell、ICLC
貨期:1-2周
運輸方式:快遞運輸
售后:收到細胞后12天,,如發(fā)現(xiàn)細胞有質(zhì)量問題(如污染,,死亡,快遞運輸?shù)仍颍r,,應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報告并及時傳真或致銷售人員,,我們將盡快為您解決!上海雅吉生物與您攜手共進,!以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,,具體操作還需要根據(jù)到貨時細胞密度,細胞生長狀態(tài)等具體情況,,酌情處理,,如需要更詳細技術(shù)指導(dǎo),請及時或郵件,。需要特別指出的是:如細胞出現(xiàn)問題,,請于48h內(nèi)及時反饋,本公司將竭誠為您服務(wù),!
一.貼壁細胞 客戶接收到細胞,,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,,顯微鏡觀察細胞生長情況,,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。顯微鏡觀察細胞,,當(dāng)細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),,細胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。嚴(yán)格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶,。將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),,放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止,。 1000rpm,5min離心,,重懸細胞。換新的細胞培養(yǎng)瓶,,37℃,5%CO2 培養(yǎng),。 Hela人宮頸癌細胞
二.懸浮細胞
1. 接收到,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部,。
2. 肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張),。
3. 嚴(yán)格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶,。
4. 將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞,。 換新的細胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
三.一毫升小管操作方法 小管內(nèi)也是此細胞,。
1. 用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)
2. 嚴(yán)格無菌操作,,用吸管吸出管中細胞至9ml*培養(yǎng)基混勻。
3. 1000rpm,5min離心,,重懸細胞,。
4.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO7 培養(yǎng),。
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