注意事項(xiàng)

1. 首先,，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有，請(qǐng)拍照,，并
及時(shí)與  （所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。
2. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問題,，部分貼壁細(xì)胞
會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 2-4 小
時(shí),，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸浮）,、細(xì)胞形態(tài),、所用
基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。
4. 靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢,、拍照,，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)
依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5. 貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過 80%,，可正常傳代,；若未超過 80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培
養(yǎng)基,，預(yù)留 5ml 左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá) 80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微
擰松,。
6. 懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至 50ml 無菌離心管內(nèi),，1200rpm 離心 5min，
離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細(xì)胞沉淀加入 5ml 培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時(shí),，若
細(xì)胞密度超過 80%,，可將細(xì)胞懸液分至 2 個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至 5ml,；若
細(xì)胞密度未超過 80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá) 80%左右時(shí)再進(jìn)行
傳代操作,。