詳細(xì)介紹
豬食欲素/阿立新B(OX-B)Elisa試劑盒是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原,、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù),。由于抗原,、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,,可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實(shí)際應(yīng)用中,,通過不同的設(shè)計,,具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法(圖a),、用于檢測抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等,。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法
需要但未提供的材料及耗材
1、酶標(biāo)儀
2,、精密移液器及一次性吸頭
3、蒸餾水
4,、洗瓶或者自動洗板機(jī)
5,、37℃水浴鍋或恒溫箱
6、500ml量筒
7,、無粉一次性乳膠手套
【適用儀器】
半自動的酶標(biāo)儀,,如Thermo MK3,或者國產(chǎn)酶標(biāo)儀,。
【樣本要求】
樣本類型和采集
以下只是列出樣品采集的一般指南,。所有樣本采集過程中,不得使用疊氮鈉做為防腐劑,。
1,、血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,,4000rpm條件下離心20min,,小心地分離出血清,保存在- 20℃以下,,避免反復(fù)凍融,。
2、血漿:肝素,,EDTA,,或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在4000rpm條件下,,離心20分鐘取上清,,血漿保存在-20℃以下,避免反復(fù)凍融,。
樣本保存和穩(wěn)定性
樣本在2-8℃條件下,,可以儲存72h,,或者在- 20℃儲存6個月。樣本收集后,,不是一次檢測完,,請按一次用量分裝凍存,避免反復(fù)凍融,,使用時在室溫下解凍,,確保樣品均勻充分解凍。
豬食欲素/阿立新B(OX-B)Elisa試劑盒操作程序
1,、所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫(平衡1小時),,標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品,,建議做復(fù)孔,。
2、按前面試劑準(zhǔn)備中描述的方法,,配制好試劑盒各種組分的工作液,。
3、從鋁箔袋中取出所需板條,,剩余的板條用自封袋密封放回冰箱,。
4、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔,、樣本孔和空白孔,,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,樣本孔加待測樣本50μL,,空白孔不加,。
5、除空白孔外,,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,,加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的檢測抗體100μL。
6,、用封板膜蓋住反應(yīng)板,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
7,、揭開封板膜,,棄去液體,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液,,靜置20s,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,。
8,、如此重復(fù)4次(共洗板5次)。若使用自動洗板機(jī),,請按洗板機(jī)操作程序進(jìn)行洗板,,添加浸泡20s的程序,可以提高檢測的精度,。洗板結(jié)束,,加底物前,要在干凈不掉屑的紙上,,充分拍干反應(yīng)板,。
9、將底物A和B按1:1體積充分混合,,所有孔中加入底物混合液100μL,。用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育15min,。
10,、所有孔加入終止液50μL,在酶標(biāo)儀上讀取各孔吸光度(OD值),。
【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
檢測完成后,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度做為縱坐標(biāo),,對應(yīng)的吸光度(OD值)作為橫坐標(biāo),,利用計算機(jī)軟件,采用四參數(shù)Logistic曲線擬合(4-pl),,創(chuàng)建標(biāo)準(zhǔn)曲線方程,,通過樣本的吸光度(OD值),利用方程計算樣品的濃度值,。
如果樣品被稀釋,,通過上述方法測的的濃度值,要乘以稀釋倍數(shù),,才是樣品的zui終濃度,。
【檢驗(yàn)方法的局限性】
1、僅供科研使用,,不得用于臨床診斷,。
2、在試劑盒標(biāo)示的有效期內(nèi)使用,,過期產(chǎn)品不得使用,。
3、跟其他廠家的試劑盒或者組分不能混用,。
4,、使用試劑盒配套的樣品稀釋液,。
5、如果樣本值高于zui高標(biāo)準(zhǔn)品濃度值,,請將樣本適當(dāng)稀釋后,,再重新測定。
6,、待測樣本中存在的人抗鼠等異嗜抗體會干擾檢測結(jié)果,,檢測前,請排除該因素,。
7,、通過其他方法得到的檢測結(jié)果,與本試劑盒測定結(jié)果不具有直接的可比性,。
【產(chǎn)品性能指標(biāo)】
1,、物理性能
試劑盒的各液體組分應(yīng)澄清透明、無沉淀或者絮狀物,。微孔板鋁箔袋應(yīng)真空包裝,,無破損漏氣。
2,、劑量反應(yīng)曲線線性
校準(zhǔn)品劑量反應(yīng)曲線相關(guān)系數(shù)r值,,大于等于0.9900。
3,、精密度
批內(nèi)精密度:三組已知的高,、中、低濃度樣品,,進(jìn)行二十次在同一個板塊內(nèi)精度評估,。批內(nèi)變異系數(shù)CV%小于10%。
批間精密度:三組已知的高,、中,、低濃度樣品,進(jìn)行二十次在不同板塊內(nèi)精度評估,。批間變異系數(shù)CV%小于15%,。
4、靈敏度
zui低檢出劑量小于1.0mIU/L,。
5,、回收率
三組已知的高、中,、低濃度樣品,,進(jìn)行五次回收率評估,回收率在85%-115%之間。
6,、特異性
本試劑盒識別天然和重組豬胰島素(INS),,與結(jié)構(gòu)類似物無交叉。
7,、穩(wěn)定性
客戶須知:
1,、液體類標(biāo)本(細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿,、血清,、血漿、尿液,、胸水,、腹水、腦脊液等),。
2,、樣本保存:請盡早檢測,2-8℃保存一天,;需更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,。如需周期收集樣本,請將樣本及時分裝標(biāo)號后,,置-20℃或-70℃保存,;
3、請?zhí)崆案嬖V我們:您樣本的種屬,、樣本數(shù)量,、待測指標(biāo)及其他特殊要求。
購買豬食欲素/阿立新B(OX-B)Elisa試劑盒承諾:
1.有質(zhì)量問題免費(fèi)包換,,合同上注明了的.(質(zhì)量問題包括運(yùn)輸不當(dāng),客戶在使用過程中測不出結(jié)果,,等等?。?nbsp;
2.全程技術(shù)指導(dǎo)。(包括售前的標(biāo)本收集,,使用過程中不明白的地方,,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后的數(shù)據(jù)分析,有任何疑問,,我們技術(shù)都會即時給你去電)
3.提供免費(fèi)代測的服務(wù),。(你只需把標(biāo)本寄過來,我們?yōu)槟愎?jié)省時間,,幫你出結(jié)果,,原始數(shù)據(jù),分析數(shù)據(jù)均可提供,一般時間是5天左右)
4.客戶有任何問題,,我們都是在一個工作日之內(nèi)給出解決方案,。售后和技術(shù)這一塊都是竭誠為客戶服務(wù)。
【儲存條件及有效期】
1,、2-8℃保存,,切勿冷凍,有效期6個月,。
2,、開封使用后,包被微孔板放入帶有干燥劑的自封袋中,,密閉自封袋,,并將全部試劑放回2-8℃冰箱。
3,、開封后,,按照建議的條件保存,校準(zhǔn)品,、包被微孔板和HRP標(biāo)記抗體,,有效期為14天,其他成分在標(biāo)簽標(biāo)明的有效期內(nèi)是穩(wěn)定的,。
豬食欲素受體(OXR)Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品:
分型巰基(-SH)測試盒 100管/24樣 盒 分光光度法
24T 盒 微板法
過氧化氫(H2O2)測試盒 50管/48樣 盒 比色法
總脂酶[脂蛋白脂酶(LPL)/ 肝脂酶(HL)] 測試盒 50管/24樣 盒 比色法
100管/48樣 盒 比色法
鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(CaN)測試盒 50管/24樣 盒 比色法
氫-鉀ATP酶(H+K+-ATPase)測試盒 100管/48樣 盒 比色法
200管/96樣 盒 比色法
注:如果您的樣本量很少,,可選購A070超微量ATP酶試劑盒,因其靈敏度特別高
超微量總ATP酶測試盒(測組織,、普通細(xì)胞) 50管/25樣 盒 比色法
100管/50樣 盒 比色法
超微量總ATP酶測試盒(測紅細(xì)胞) 50管/25樣 盒 比色法
100管/50樣 盒 比色法
超微量ATP酶測試盒(測Na+K+—ATP酶)
(測組織,、普通細(xì)胞) 50管/25樣 盒 比色法
100管/50樣 盒 比色法
超微量ATP酶測試盒(測Na+K+—ATP酶)
(測紅細(xì)胞) 50管/25樣 盒 比色法
100管/50樣 盒 比色法
超微量ATP酶測試盒(測Ca2+Mg2+-ATP酶)
(測組織、普通細(xì)胞) 50管/25樣 盒 比色法
100管/50樣 盒 比色法
超微量ATP酶測試盒(測Ca2+Mg2+-ATP酶)
(測紅細(xì)胞) 50管/25樣 盒 比色法
100管/50樣 盒 比色法
超微量ATP酶測試盒(測Ca2+-ATP酶)
(測組織,、普通細(xì)胞) 50管/25樣 盒 比色法
100管/50樣 盒 比色法
超微量ATP酶測試盒(測Ca2+-ATP酶)
(測紅細(xì)胞) 50管/25樣 盒 比色法
100管/50樣 盒 比色法
超微量ATP酶測試盒(Na+K+,、Ca2+Mg2+-ATP酶)
(測組織、普通細(xì)胞) 75管/25樣 盒 比色法
150管/50樣 盒 比色法
超微量ATP酶測試盒(Na+K+,、Ca2+Mg2+-ATP酶)
(測紅細(xì)胞) 75管/25樣 盒 比色法
150管/50樣 盒 比色法
超微量ATP酶測試盒(Na+K+,、Ca2+Mg2+、T-ATP酶)
(測組織,、普通細(xì)胞)
100管/25樣 盒 比色法
200管/50樣 盒 比色法
超微量ATP酶測試盒(Na+K+,、Ca2+Mg2+、T-ATP酶)
(測紅細(xì)胞) 100管/25樣 盒 比色法
200管/50樣 盒 比色法
Mg2+-EGTA-ATP酶測試盒 50管/25樣 盒 比色法
100管/50樣 盒 比色法