豬Ⅱ型膠原（ColⅡ）Elisa試劑盒是以免疫學反應為基礎(chǔ),，將抗原,、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。由于抗原,、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,，每加入一種試劑孵育后,，可通過洗滌除去多余的游離反應物，從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性

豬Ⅱ型膠原(ColⅡ)Elisa試劑盒是以免疫學反應為基礎(chǔ),，將抗原,、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。由于抗原,、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育后,，可通過洗滌除去多余的游離反應物,，從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實際應用中,，通過不同的設(shè)計,，具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法(圖a),、用于檢測抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等,。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法

需要但未提供的材料及耗材
  1、酶標儀
2,、精密移液器及一次性吸頭
3,、蒸餾水
4、洗瓶或者自動洗板機
5,、37℃水浴鍋或恒溫箱
6,、500ml量筒
7、無粉一次性乳膠手套
 
【適用儀器】
  半自動的酶標儀,，如Thermo MK3,，或者國產(chǎn)酶標儀。
 
【樣本要求】
  樣本類型和采集
以下只是列出樣品采集的一般指南,。所有樣本采集過程中,，不得使用疊氮鈉做為防腐劑。
1,、血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,，操作過程中避免任何細胞刺激，4000rpm條件下離心20min,，小心地分離出血清,，保存在- 20℃以下，避免反復凍融,。
2,、血漿：肝素，EDTA,，或檸檬酸鈉作為抗凝劑,。在4000rpm條件下,，離心20分鐘取上清，血漿保存在-20℃以下,，避免反復凍融,。
 
樣本保存和穩(wěn)定性
樣本在2-8℃條件下，可以儲存72h,，或者在- 20℃儲存6個月,。樣本收集后，不是一次檢測完,，請按一次用量分裝凍存,，避免反復凍融，使用時在室溫下解凍,，確保樣品均勻充分解凍,。
豬Ⅱ型膠原(ColⅡ)Elisa試劑盒操作程序
1、所有試劑和組分都先恢復到室溫（平衡1小時）,，標準品,、質(zhì)控品和樣品，建議做復孔,。
2,、按前面試劑準備中描述的方法，配制好試劑盒各種組分的工作液,。
3,、從鋁箔袋中取出所需板條，剩余的板條用自封袋密封放回冰箱,。
4,、設(shè)置標準品孔、樣本孔和空白孔,，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,，樣本孔加待測樣本50μL，空白孔不加,。
5,、除空白孔外，標準品孔和樣本孔,，加入辣根過氧化物酶標記的檢測抗體100μL,。
6、用封板膜蓋住反應板,，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
7、揭開封板膜,，棄去液體,，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液，靜置20s,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干。
8,、如此重復4次（共洗板5次）,。若使用自動洗板機，請按洗板機操作程序進行洗板,，添加浸泡20s的程序,，可以提高檢測的精度。洗板結(jié)束,，加底物前,，要在干凈不掉屑的紙上,，充分拍干反應板,。
9、將底物A和B按1:1體積充分混合,，所有孔中加入底物混合液100μL,。用封板膜蓋住反應板，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育15min,。
10,、所有孔加入終止液50μL，在酶標儀上讀取各孔吸光度（OD值）,。
 
【檢驗結(jié)果的解釋】
檢測完成后,，以標準品濃度做為縱坐標，對應的吸光度（OD值）作為橫坐標,，利用計算機軟件,，采用四參數(shù)Logistic曲線擬合（4-pl），創(chuàng)建標準曲線方程,，通過樣本的吸光度（OD值）,，利用方程計算樣品的濃度值。
如果樣品被稀釋,，通過上述方法測的的濃度值,，要乘以稀釋倍數(shù)，才是樣品的zui終濃度,。
【檢驗方法的局限性】
1,、僅供科研使用，不得用于臨床診斷,。
2,、在試劑盒標示的有效期內(nèi)使用,，過期產(chǎn)品不得使用。
3,、跟其他廠家的試劑盒或者組分不能混用,。
4、使用試劑盒配套的樣品稀釋液,。
5,、如果樣本值高于zui高標準品濃度值，請將樣本適當稀釋后,，再重新測定,。
6、待測樣本中存在的人抗鼠等異嗜抗體會干擾檢測結(jié)果,，檢測前,，請排除該因素。
7,、通過其他方法得到的檢測結(jié)果,，與本試劑盒測定結(jié)果不具有直接的可比性。
【產(chǎn)品性能指標】
1,、物理性能
試劑盒的各液體組分應澄清透明,、無沉淀或者絮狀物。微孔板鋁箔袋應真空包裝,，無破損漏氣,。
2、劑量反應曲線線性
校準品劑量反應曲線相關(guān)系數(shù)r值,，大于等于0.9900,。
3、精密度
批內(nèi)精密度：三組已知的高,、中,、低濃度樣品，進行二十次在同一個板塊內(nèi)精度評估,。批內(nèi)變異系數(shù)CV%小于10%,。
批間精密度：三組已知的高、中,、低濃度樣品,，進行二十次在不同板塊內(nèi)精度評估。批間變異系數(shù)CV%小于15%,。
4,、靈敏度
zui低檢出劑量小于1.0mIU/L。
5,、回收率
三組已知的高,、中,、低濃度樣品，進行五次回收率評估,，回收率在85%-115%之間,。
6、特異性
本試劑盒識別天然和重組豬胰島素（INS）,，與結(jié)構(gòu)類似物無交叉,。
7、穩(wěn)定性

客戶須知:

1,、液體類標本（細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿、血清,、血漿,、尿液、胸水,、腹水,、腦脊液等）。
2,、樣本保存：請盡早檢測,，2-8℃保存一天,；需更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存,。如需周期收集樣本，請將樣本及時分裝標號后,，置-20℃或-70℃保存,；
3、請?zhí)崆案嬖V我們：您樣本的種屬,、樣本數(shù)量,、待測指標及其他特殊要求。

購買豬Ⅱ型膠原(ColⅡ)Elisa試劑盒承諾： 

1.有質(zhì)量問題免費包換,，合同上注明了的.（質(zhì)量問題包括運輸不當,，客戶在使用過程中測不出結(jié)果，等等?。?nbsp;
2.全程技術(shù)指導,。（包括售前的標本收集，使用過程中不明白的地方,，實驗結(jié)束后的數(shù)據(jù)分析,，有任何疑問，我們技術(shù)都會即時給你去電） 
3.提供免費代測的服務(wù),。（你只需把標本寄過來,，我們?yōu)槟愎?jié)省時間,，幫你出結(jié)果，原始數(shù)據(jù),，分析數(shù)據(jù)均可提供,，一般時間是5天左右） 
4.客戶有任何問題，我們都是在一個工作日之內(nèi)給出解決方案,。售后和技術(shù)這一塊都是竭誠為客戶服務(wù),。

【儲存條件及有效期】
  1、2-8℃保存,，切勿冷凍,，有效期6個月。
  2,、開封使用后,，包被微孔板放入帶有干燥劑的自封袋中，密閉自封袋,，并將全部試劑放回2-8℃冰箱,。
  3、開封后,，按照建議的條件保存,，校準品、包被微孔板和HRP標記抗體,，有效期為14天,，其他成分在標簽標明的有效期內(nèi)是穩(wěn)定的。
豬Ⅱ型膠原(ColⅡ)Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品：

總蛋白定量測試盒（帶標準,；BCA法）	48T	盒	微板法
	96T	盒	微板法
蛋白標準品（配雙縮脲,、考馬斯亮藍、BCA,、白蛋白試劑盒）		支
谷氨酰胺合成酶（GS）測試盒	50管/48樣	盒	比色法
腺苷脫氨酶（ADA）測試盒	100管/48樣	盒	比色法
腺苷脫氨酶（ADA）測試盒（酶比色法）	96T	盒	微板法
前列腺酸性磷酸酶（PACP）測試盒	50管/25樣	盒	比色法
溶菌酶（LZM）測試盒（帶標準）	30管/28樣	盒	比濁法
微球菌粉	30mg	支
溶菌酶標準品	2mg	支
肝素溶液	10ml	支
抑制與產(chǎn)生超氧陰離子自由基（O2—·）測試盒	50管/48樣	盒	比色法
β-葡萄糖醛酸苷酶（β-GD）測試盒（測內(nèi)源型）	50管/48樣	盒	比色法
β-葡萄糖醛酸苷酶（β-GD）測試盒（測外源型）	50管/48樣	盒	比色法
脂肪酶（LPS）測試盒	50管/48樣	盒	比色法
脂肪酶（LPS）測試盒	96T	盒	微板法
紅細胞NADH高鐵血紅蛋白還原酶測試盒	50管/48樣	盒	比色法
糖化血紅蛋白（GHb）測試盒	15管/14樣	盒	比色法
糖化血紅蛋白（HbA1c）測試盒（酶法,，雙試劑）	96T	盒	微板法
銅－ATP酶（Cu2+－ATPase）測試盒	100管/50樣	盒	比色法
抗酒石酸酸性磷酸酶（StrACP）測試盒	50管/24樣	盒	比色法
堿性磷酸酶（AKP/ALP）測試盒（可見光比色法）	50管/48樣	盒	可見光比色法
堿性磷酸酶（AKP/ALP）測試盒 （微板法）	48T	盒	微板法
	96T	盒	微板法
堿性磷酸酶（AKP/ALP）測試盒 （單試劑，IFCC推薦方法）	150ml	盒	紫外比色法
酸性磷酸酶（ACP）測試盒	50管/48樣	盒	分光光度法
酸性磷酸酶（ACP）測試盒	48T	盒	微板法
	96T	盒	微板法
總谷胱甘肽/ 氧化型谷胱甘肽（T-GSH/ GSSG）測試盒	48T	盒	微板法
	96T	盒	微板法
總谷胱甘肽/ 氧化型谷胱甘肽（T-GSH/ GSSG）測試盒	50管	盒	分光光度法
谷胱甘肽－還原酶（GR）測試盒	50管	盒	紫外比色法
總巰基（-SH）測試盒	100管/48樣	盒	分光光度法
	48T	盒	微板法