詳細(xì)介紹
豬干擾素-γ(IFN-γ)Elisa試劑盒是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),,將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原,、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性,。在實(shí)際應(yīng)用中,通過不同的設(shè)計(jì),,具體的方法步驟可有多種,。即:用于檢測(cè)抗體的間接法(圖a)、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等,。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法
需要但未提供的材料及耗材
1,、酶標(biāo)儀
2、精密移液器及一次性吸頭
3,、蒸餾水
4,、洗瓶或者自動(dòng)洗板機(jī)
5、37℃水浴鍋或恒溫箱
6,、500ml量筒
7,、無粉一次性乳膠手套
【適用儀器】
半自動(dòng)的酶標(biāo)儀,如Thermo MK3,,或者國(guó)產(chǎn)酶標(biāo)儀,。
【樣本要求】
樣本類型和采集
以下只是列出樣品采集的一般指南。所有樣本采集過程中,,不得使用疊氮鈉做為防腐劑,。
1、血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,,4000rpm條件下離心20min,小心地分離出血清,,保存在- 20℃以下,,避免反復(fù)凍融。
2,、血漿:肝素,,EDTA,或檸檬酸鈉作為抗凝劑,。在4000rpm條件下,,離心20分鐘取上清,血漿保存在-20℃以下,,避免反復(fù)凍融,。
樣本保存和穩(wěn)定性
樣本在2-8℃條件下,可以儲(chǔ)存72h,或者在- 20℃儲(chǔ)存6個(gè)月,。樣本收集后,,不是一次檢測(cè)完,請(qǐng)按一次用量分裝凍存,,避免反復(fù)凍融,,使用時(shí)在室溫下解凍,確保樣品均勻充分解凍,。
豬干擾素-γ(IFN-γ)Elisa試劑盒操作程序
1,、所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫(平衡1小時(shí)),標(biāo)準(zhǔn)品,、質(zhì)控品和樣品,,建議做復(fù)孔。
2,、按前面試劑準(zhǔn)備中描述的方法,,配制好試劑盒各種組分的工作液。
3,、從鋁箔袋中取出所需板條,,剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。
4,、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔,、樣本孔和空白孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,,樣本孔加待測(cè)樣本50μL,,空白孔不加。
5,、除空白孔外,,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,。
6,、用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
7,、揭開封板膜,棄去液體,,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液,靜置20s,,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,。
8、如此重復(fù)4次(共洗板5次),。若使用自動(dòng)洗板機(jī),,請(qǐng)按洗板機(jī)操作程序進(jìn)行洗板,添加浸泡20s的程序,,可以提高檢測(cè)的精度。洗板結(jié)束,,加底物前,,要在干凈不掉屑的紙上,充分拍干反應(yīng)板,。
9,、將底物A和B按1:1體積充分混合,所有孔中加入底物混合液100μL,。用封板膜蓋住反應(yīng)板,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育15min。
10,、所有孔加入終止液50μL,,在酶標(biāo)儀上讀取各孔吸光度(OD值)。
【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
檢測(cè)完成后,,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度做為縱坐標(biāo),,對(duì)應(yīng)的吸光度(OD值)作為橫坐標(biāo),利用計(jì)算機(jī)軟件,,采用四參數(shù)Logistic曲線擬合(4-pl),,創(chuàng)建標(biāo)準(zhǔn)曲線方程,通過樣本的吸光度(OD值),,利用方程計(jì)算樣品的濃度值,。
如果樣品被稀釋,通過上述方法測(cè)的的濃度值,,要乘以稀釋倍數(shù),,才是樣品的zui終濃度。
【檢驗(yàn)方法的局限性】
1,、僅供科研使用,,不得用于臨床診斷。
2,、在試劑盒標(biāo)示的有效期內(nèi)使用,,過期產(chǎn)品不得使用。
3,、跟其他廠家的試劑盒或者組分不能混用,。
4,、使用試劑盒配套的樣品稀釋液。
5,、如果樣本值高于zui高標(biāo)準(zhǔn)品濃度值,,請(qǐng)將樣本適當(dāng)稀釋后,再重新測(cè)定,。
6,、待測(cè)樣本中存在的人抗鼠等異嗜抗體會(huì)干擾檢測(cè)結(jié)果,檢測(cè)前,,請(qǐng)排除該因素,。
7、通過其他方法得到的檢測(cè)結(jié)果,,與本試劑盒測(cè)定結(jié)果不具有直接的可比性,。
【產(chǎn)品性能指標(biāo)】
1、物理性能
試劑盒的各液體組分應(yīng)澄清透明,、無沉淀或者絮狀物,。微孔板鋁箔袋應(yīng)真空包裝,無破損漏氣,。
2,、劑量反應(yīng)曲線線性
校準(zhǔn)品劑量反應(yīng)曲線相關(guān)系數(shù)r值,大于等于0.9900,。
3,、精密度
批內(nèi)精密度:三組已知的高、中,、低濃度樣品,,進(jìn)行二十次在同一個(gè)板塊內(nèi)精度評(píng)估。批內(nèi)變異系數(shù)CV%小于10%,。
批間精密度:三組已知的高,、中、低濃度樣品,,進(jìn)行二十次在不同板塊內(nèi)精度評(píng)估,。批間變異系數(shù)CV%小于15%。
4,、靈敏度
zui低檢出劑量小于1.0mIU/L,。
5、回收率
三組已知的高,、中,、低濃度樣品,進(jìn)行五次回收率評(píng)估,,回收率在85%-115%之間,。
6,、特異性
本試劑盒識(shí)別天然和重組豬胰島素(INS),與結(jié)構(gòu)類似物無交叉,。
7,、穩(wěn)定性
客戶須知:
1、液體類標(biāo)本(細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿,、血清、血漿,、尿液,、胸水、腹水,、腦脊液等)。
2,、樣本保存:請(qǐng)盡早檢測(cè),,2-8℃保存一天;需更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,。如需周期收集樣本,,請(qǐng)將樣本及時(shí)分裝標(biāo)號(hào)后,置-20℃或-70℃保存,;
3,、請(qǐng)?zhí)崆案嬖V我們:您樣本的種屬、樣本數(shù)量,、待測(cè)指標(biāo)及其他特殊要求,。
購(gòu)買豬干擾素-γ(IFN-γ)Elisa試劑盒承諾:
1.有質(zhì)量問題免費(fèi)包換,合同上注明了的.(質(zhì)量問題包括運(yùn)輸不當(dāng),,客戶在使用過程中測(cè)不出結(jié)果,,等等!)
2.全程技術(shù)指導(dǎo),。(包括售前的標(biāo)本收集,,使用過程中不明白的地方,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后的數(shù)據(jù)分析,,有任何疑問,,我們技術(shù)都會(huì)即時(shí)給你去電)
3.提供免費(fèi)代測(cè)的服務(wù)。(你只需把標(biāo)本寄過來,,我們?yōu)槟愎?jié)省時(shí)間,,幫你出結(jié)果,原始數(shù)據(jù),,分析數(shù)據(jù)均可提供,,一般時(shí)間是5天左右)
4.客戶有任何問題,,我們都是在一個(gè)工作日之內(nèi)給出解決方案。售后和技術(shù)這一塊都是竭誠(chéng)為客戶服務(wù),。
【儲(chǔ)存條件及有效期】
1,、2-8℃保存,切勿冷凍,,有效期6個(gè)月,。
2、開封使用后,,包被微孔板放入帶有干燥劑的自封袋中,,密閉自封袋,并將全部試劑放回2-8℃冰箱,。
3,、開封后,按照建議的條件保存,,校準(zhǔn)品,、包被微孔板和HRP標(biāo)記抗體,有效期為14天,,其他成分在標(biāo)簽標(biāo)明的有效期內(nèi)是穩(wěn)定的,。
豬干擾素-γ(IFN-γ)Elisa試劑盒相關(guān)產(chǎn)品:
葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G-6-PD)測(cè)試盒(測(cè)紅細(xì)胞) 100管/30樣 盒 比色法
葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G-6-PD)測(cè)試盒(連續(xù)監(jiān)測(cè)法) R1:40ml×1
R2:10ml×1 盒 紫外比色法
白蛋白測(cè)試盒(帶標(biāo)準(zhǔn);溴甲酚綠法) 100管/96樣 盒 比色法
96T 盒 微板法
銅藍(lán)蛋白(CP)測(cè)試盒(測(cè)血清,,除雞血清) 50管/48樣 盒 比色法
羥脯氨酸(Hyp)測(cè)試盒(消化法) 測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞,、
培養(yǎng)液 50管/48樣 盒 比色法
羥脯氨酸(Hyp)測(cè)試盒(堿水解法) 測(cè)動(dòng)物血清、
組織,、尿液 50管/48樣 盒 比色法
羥脯氨酸(Hyp)測(cè)試盒(酸水解法) 經(jīng)典法 50管/48樣 盒 比色法
-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)測(cè)試盒 50管/24樣 盒 比色法
肌酸激酶(CK)測(cè)試盒 50管/24樣 盒 比色法
脂褐質(zhì)(LF)測(cè)試盒 50管/48樣 盒 熒光光度法
單胺氧化酶(MAO)測(cè)試盒 50管/48樣 盒 紫外比色法
D-木糖測(cè)試盒 50管/48樣 盒 比色法
唾液酸(SA)測(cè)試盒(帶SA標(biāo)準(zhǔn)) 50管/48樣 盒 比色法
唾液酸(SA)測(cè)試盒(酶法,,雙試劑) 96T 盒 微板法
糖化血清蛋白(GSP)測(cè)試盒(果糖胺法)(帶標(biāo)準(zhǔn)) 25管/24樣 盒 比色法
50管/48樣 盒 比色法
糖化血清蛋白(GSP)試劑盒(NBT法) 96T 盒 微板法
亞硝酸鹽測(cè)試盒 100管/96樣 盒 比色法
血清鐵測(cè)試盒 50管/48樣 盒 比色法
組織鐵測(cè)試盒 50管/48樣 盒 比色法
總鐵結(jié)合力(TIBC)測(cè)試盒 50管/48樣 盒 比色法
5’-核苷酸酶(5’-NT)測(cè)試盒 100管/48樣 盒 比色法
5’-核苷酸酶(5’-NT)測(cè)試盒(酶比色法) 96T 盒 微板法
游離脂肪酸(NEFA)測(cè)試盒 50管/48樣 盒 比色法
游離脂肪酸(NEFA)測(cè)試盒(酶法,雙試劑) 96T 盒 微板法
肝/肌糖原測(cè)試盒 50管/48樣 盒 比色法
髓過氧化物酶(MPO)測(cè)試盒 100管/48樣 盒 比色法
總蛋白定量測(cè)試盒(帶標(biāo)準(zhǔn),;雙縮脲法) 100管/96樣 盒 比色法
總蛋白定量測(cè)試盒(帶標(biāo)準(zhǔn),;考馬斯亮藍(lán)法) 50管/48樣 盒 比色法
100管/96樣 盒 比色法
總蛋白定量測(cè)試盒(帶標(biāo)準(zhǔn);BCA法) 50管/48樣 盒 比色法
100管/96樣 盒 比色法