詳細介紹
豬白介素2(IL-2)Elisa試劑盒是以免疫學反應為基礎,,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術,。由于抗原,、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,每加入一種試劑孵育后,,可通過洗滌除去多余的游離反應物,,從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實際應用中,通過不同的設計,,具體的方法步驟可有多種,。即:用于檢測抗體的間接法(圖a)、用于檢測抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等,。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法
需要但未提供的材料及耗材
1,、酶標儀
2、精密移液器及一次性吸頭
3,、蒸餾水
4,、洗瓶或者自動洗板機
5、37℃水浴鍋或恒溫箱
6,、500ml量筒
7,、無粉一次性乳膠手套
【適用儀器】
半自動的酶標儀,如Thermo MK3,,或者國產(chǎn)酶標儀,。
【樣本要求】
樣本類型和采集
以下只是列出樣品采集的一般指南。所有樣本采集過程中,,不得使用疊氮鈉做為防腐劑,。
1、血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,,操作過程中避免任何細胞刺激,,4000rpm條件下離心20min,小心地分離出血清,,保存在- 20℃以下,,避免反復凍融。
2,、血漿:肝素,,EDTA,或檸檬酸鈉作為抗凝劑,。在4000rpm條件下,,離心20分鐘取上清,血漿保存在-20℃以下,,避免反復凍融,。
樣本保存和穩(wěn)定性
樣本在2-8℃條件下,可以儲存72h,,或者在- 20℃儲存6個月,。樣本收集后,不是一次檢測完,,請按一次用量分裝凍存,,避免反復凍融,使用時在室溫下解凍,確保樣品均勻充分解凍,。
豬白介素2(IL-2)Elisa試劑盒操作程序
1,、所有試劑和組分都先恢復到室溫(平衡1小時),標準品,、質(zhì)控品和樣品,,建議做復孔。
2,、按前面試劑準備中描述的方法,,配制好試劑盒各種組分的工作液。
3,、從鋁箔袋中取出所需板條,,剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。
4,、設置標準品孔,、樣本孔和空白孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,,樣本孔加待測樣本50μL,空白孔不加,。
5,、除空白孔外,標準品孔和樣本孔,,加入辣根過氧化物酶標記的檢測抗體100μL,。
6、用封板膜蓋住反應板,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
7、揭開封板膜,,棄去液體,,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,,靜置20s,,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,。
8,、如此重復4次(共洗板5次)。若使用自動洗板機,,請按洗板機操作程序進行洗板,,添加浸泡20s的程序,可以提高檢測的精度。洗板結(jié)束,,加底物前,,要在干凈不掉屑的紙上,充分拍干反應板,。
9,、將底物A和B按1:1體積充分混合,所有孔中加入底物混合液100μL,。用封板膜蓋住反應板,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育15min。
10,、所有孔加入終止液50μL,,在酶標儀上讀取各孔吸光度(OD值)。
【檢驗結(jié)果的解釋】
檢測完成后,,以標準品濃度做為縱坐標,,對應的吸光度(OD值)作為橫坐標,利用計算機軟件,,采用四參數(shù)Logistic曲線擬合(4-pl),,創(chuàng)建標準曲線方程,通過樣本的吸光度(OD值),,利用方程計算樣品的濃度值,。
如果樣品被稀釋,通過上述方法測的的濃度值,,要乘以稀釋倍數(shù),,才是樣品的zui終濃度。
【檢驗方法的局限性】
1,、僅供科研使用,,不得用于臨床診斷。
2,、在試劑盒標示的有效期內(nèi)使用,,過期產(chǎn)品不得使用。
3,、跟其他廠家的試劑盒或者組分不能混用,。
4、使用試劑盒配套的樣品稀釋液,。
5,、如果樣本值高于zui高標準品濃度值,請將樣本適當稀釋后,,再重新測定,。
6,、待測樣本中存在的人抗鼠等異嗜抗體會干擾檢測結(jié)果,檢測前,,請排除該因素,。
7、通過其他方法得到的檢測結(jié)果,,與本試劑盒測定結(jié)果不具有直接的可比性,。
【產(chǎn)品性能指標】
1、物理性能
試劑盒的各液體組分應澄清透明,、無沉淀或者絮狀物,。微孔板鋁箔袋應真空包裝,無破損漏氣,。
2,、劑量反應曲線線性
校準品劑量反應曲線相關系數(shù)r值,大于等于0.9900,。
3,、精密度
批內(nèi)精密度:三組已知的高、中,、低濃度樣品,,進行二十次在同一個板塊內(nèi)精度評估。批內(nèi)變異系數(shù)CV%小于10%,。
批間精密度:三組已知的高,、中、低濃度樣品,,進行二十次在不同板塊內(nèi)精度評估,。批間變異系數(shù)CV%小于15%,。
4,、靈敏度
zui低檢出劑量小于1.0mIU/L。
5,、回收率
三組已知的高,、中、低濃度樣品,,進行五次回收率評估,,回收率在85%-115%之間。
6,、特異性
本試劑盒識別天然和重組豬胰島素(INS),,與結(jié)構(gòu)類似物無交叉。
7,、穩(wěn)定性
客戶須知:
1,、液體類標本(細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿、血清,、血漿,、尿液、胸水,、腹水,、腦脊液等)。
2,、樣本保存:請盡早檢測,,2-8℃保存一天;需更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,。如需周期收集樣本,,請將樣本及時分裝標號后,置-20℃或-70℃保存,;
3,、請?zhí)崆案嬖V我們:您樣本的種屬、樣本數(shù)量,、待測指標及其他特殊要求,。
購買豬白介素2(IL-2)Elisa試劑盒承諾:
1.有質(zhì)量問題免費包換,合同上注明了的.(質(zhì)量問題包括運輸不當,,客戶在使用過程中測不出結(jié)果,,等等!)
2.全程技術指導,。(包括售前的標本收集,,使用過程中不明白的地方,實驗結(jié)束后的數(shù)據(jù)分析,,有任何疑問,,我們技術都會即時給你去電)
3.提供免費代測的服務。(你只需把標本寄過來,,我們?yōu)槟愎?jié)省時間,,幫你出結(jié)果,原始數(shù)據(jù),,分析數(shù)據(jù)均可提供,,一般時間是5天左右)
4.客戶有任何問題,我們都是在一個工作日之內(nèi)給出解決方案,。售后和技術這一塊都是竭誠為客戶服務,。
【儲存條件及有效期】
1、2-8℃保存,,切勿冷凍,,有效期6個月,。
2、開封使用后,,包被微孔板放入帶有干燥劑的自封袋中,,密閉自封袋,并將全部試劑放回2-8℃冰箱,。
3,、開封后,按照建議的條件保存,,校準品,、包被微孔板和HRP標記抗體,有效期為14天,,其他成分在標簽標明的有效期內(nèi)是穩(wěn)定的,。
豬白介素2(IL-2)Elisa試劑盒相關產(chǎn)品:
葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G-6-PD)測試盒(測紅細胞) 100管/30樣 盒 比色法
葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G-6-PD)測試盒(連續(xù)監(jiān)測法) R1:40ml×1
R2:10ml×1 盒 紫外比色法
白蛋白測試盒(帶標準;溴甲酚綠法) 100管/96樣 盒 比色法
96T 盒 微板法
銅藍蛋白(CP)測試盒(測血清,,除雞血清) 50管/48樣 盒 比色法
羥脯氨酸(Hyp)測試盒(消化法) 測培養(yǎng)細胞,、
培養(yǎng)液 50管/48樣 盒 比色法
羥脯氨酸(Hyp)測試盒(堿水解法) 測動物血清、
組織,、尿液 50管/48樣 盒 比色法
羥脯氨酸(Hyp)測試盒(酸水解法) 經(jīng)典法 50管/48樣 盒 比色法
-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)測試盒 50管/24樣 盒 比色法
肌酸激酶(CK)測試盒 50管/24樣 盒 比色法
脂褐質(zhì)(LF)測試盒 50管/48樣 盒 熒光光度法
單胺氧化酶(MAO)測試盒 50管/48樣 盒 紫外比色法
D-木糖測試盒 50管/48樣 盒 比色法
唾液酸(SA)測試盒(帶SA標準) 50管/48樣 盒 比色法
唾液酸(SA)測試盒(酶法,,雙試劑) 96T 盒 微板法
糖化血清蛋白(GSP)測試盒(果糖胺法)(帶標準) 25管/24樣 盒 比色法
50管/48樣 盒 比色法
糖化血清蛋白(GSP)試劑盒(NBT法) 96T 盒 微板法
亞硝酸鹽測試盒 100管/96樣 盒 比色法
血清鐵測試盒 50管/48樣 盒 比色法
組織鐵測試盒 50管/48樣 盒 比色法
總鐵結(jié)合力(TIBC)測試盒 50管/48樣 盒 比色法
5’-核苷酸酶(5’-NT)測試盒 100管/48樣 盒 比色法
5’-核苷酸酶(5’-NT)測試盒(酶比色法) 96T 盒 微板法
游離脂肪酸(NEFA)測試盒 50管/48樣 盒 比色法
游離脂肪酸(NEFA)測試盒(酶法,雙試劑) 96T 盒 微板法
肝/肌糖原測試盒 50管/48樣 盒 比色法
髓過氧化物酶(MPO)測試盒 100管/48樣 盒 比色法
總蛋白定量測試盒(帶標準,;雙縮脲法) 100管/96樣 盒 比色法
總蛋白定量測試盒(帶標準,;考馬斯亮藍法) 50管/48樣 盒 比色法
100管/96樣 盒 比色法
總蛋白定量測試盒(帶標準;BCA法) 50管/48樣 盒 比色法
100管/96樣 盒 比色法