詳細介紹
細胞名稱:小鼠巨噬細胞Ana-1
生長特性:貼壁 懸浮 半懸浮半貼壁(詳情可咨詢我們)
生長條件:詳情索取該產(chǎn)品說明書
培養(yǎng)條件:90%DMEM/F12+10%FBS+1%P/S
培養(yǎng)溫度:37℃
空氣條件:5% CO2,95% AIR
傳代方法:1:2傳代,,2~3天換液
凍存條件:0%FBS+10%DMSO
噬細胞是從循環(huán)的骨髓來源的單核細胞中分化出來的。在骨髓和之后的血液和組織中,,巨噬細胞經(jīng)歷了一個成熟級聯(lián)的過程,,zui終轉變?yōu)樾螒B(tài)和功能成熟的組織巨噬細胞。巨噬細胞的功能是清楚細胞碎片和入侵的病原體,。他們吞噬入侵的微生物,,清除尸體、損傷的細胞和細胞碎片,。通過流式細胞術或免疫組化染色可鑒定出幾種細胞表面蛋白的特殊表達,,如CD14、CD11b,、F4/80(小鼠)/EMR1(人),、MAC-1/MAC-3和CD68,而這些蛋白的表達可以表征巨噬細胞,。
小鼠巨噬細胞Ana-1,,使用方法
1、您收到細胞后,,請按照以下方法進行操作:
取出25cm2培養(yǎng)瓶,,75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,拆下封口膜,,放入37℃,,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細胞狀態(tài),然后換用新鮮*培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進行傳代,。
2,、細胞傳代:
1)細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,,用PBS清洗細胞一次,;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,,待細胞回縮變圓后加入*培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,,然后將懸液轉移至15ml離心管中,,1000rpm離心5min,;
3)棄上清,沉淀細胞用12ml*培養(yǎng)基重懸,,然后按1:2比例進行分瓶傳代,,zui后放入37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
4)待細胞*貼壁后,,觀察培養(yǎng)結果,之后進行換液培養(yǎng)或傳代,。
3,、細胞凍存:
1)細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,,用PBS清洗細胞一次,;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,,待細胞回縮變圓后加入*培養(yǎng)液終止消化,,輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至15ml離心管中,,1000rpm離心5min,;
3)用適量的凍存液(FBS:DMSO=9 :1)重懸細胞,并放置于凍存管中,;
4)先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉入液氮中進行長期保存,。使用程序降溫盒可直接放入-80℃,。
4、細胞復蘇:
1)從液氮中取出細胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具),,快速將其置入37℃水浴中解凍,,直至凍存管中無結晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁,;
2)將凍存管中的細胞移至含5ml*培養(yǎng)基的15ml離心管中,, 1000rpm離心5min;
3)棄上清,,沉淀用5ml*培養(yǎng)基重懸,,接種25cm2培養(yǎng)瓶,于37℃,,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
4)第二天,換用新鮮*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。
,,原代細胞與細胞系有什么區(qū)別,?細胞培養(yǎng)物來源于原代外植體或分散的細胞懸液。通常在這樣的培養(yǎng)物中細胞增殖形成匯合地單層細胞或密集地細胞懸液,。根據(jù)傳統(tǒng)定義,,*次收獲和接種的細胞被稱為原代細胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 這類細胞生命周期有限,在有限的生命周期內(nèi)需掌握好細胞zui大的生長空間,,以保持細胞群中基因型和表型的*性,。細胞系是不斷生長,分化的細胞群,,因其經(jīng)過遺傳改造,,致使其具有無限增長的潛能。體外生長的細胞系用于醫(yī)療或科研,。實際上,,連續(xù)細胞系可以用大量次培養(yǎng)基培養(yǎng),隨著代數(shù)的增加細胞的基因型和表型都有可能發(fā)生改變,。需要指出的是,,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造,。
1,、倍增和代數(shù)有什么區(qū)別?倍增是培養(yǎng)物中細胞總數(shù)加倍,,通常是指細胞指數(shù)或對數(shù)生長期,。代數(shù)是指細胞群從培養(yǎng)瓶中移出,傳代培養(yǎng)過程的次數(shù),,傳代培養(yǎng)的目的是使細胞處于低密度以刺激其進一步生長,。
2、接收到的凍存細胞該如何處理,?收到包裝箱后,,立即將凍存細胞從干冰移入液氮中凍存。此過程盡量快以避免升溫,。不要將細胞儲存在-80℃,,這樣會對細胞造成不可挽回的傷害。
3,、有多少經(jīng)驗才能開始正常人類細胞培養(yǎng),?推薦有經(jīng)驗者在無菌環(huán)境下用層流凈化罩工作,如果有經(jīng)驗的話對其它細胞類型也是很有利的,。如果你是細胞培養(yǎng)的初學者或打算建立細胞培養(yǎng)實驗室,,我們會為你提供幫助。請的細胞培養(yǎng)專家。
,,部分相關產(chǎn)品如下:人糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)Elisa試劑盒人毒蕈堿型乙酰膽堿受體(M-AChR)Elisa試劑盒
人糖蛋白49A(Gp49a)Elisa試劑盒
人抑制素β-B(Inhbb)Elisa試劑盒
人食欲素受體(OXR)Elisa試劑盒
人重酒石酸去甲腎上腺素(NE-B)Elisa試劑盒
人6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)Elisa試劑盒
人戊糖素(Pentosidine)Elisa試劑盒
人多巴胺D1受體(D1R)Elisa試劑盒
人腎上腺素能a1A受體(ADRA1A)Elisa試劑盒
人免疫反應性生長激素(irGH)Elisa試劑盒
人硫酸褪黑色素(MS)Elisa試劑盒
人抗利尿激素/血管加壓素/精氨酸加壓素(ADH/VP/AVP)Elisa試劑盒
人甘丙肽/甘丙素(GAL)Elisa試劑盒
人促胰液素/分泌素受體(SR)Elisa試劑盒
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