細(xì)胞名稱：人胚腎細(xì)胞AAV-293
生長(zhǎng)特性：貼壁  懸浮 半懸浮半貼壁（詳情可咨詢我們）
生長(zhǎng)條件：詳情索取該產(chǎn)品說明書
培養(yǎng)條件：90%DMEM/F12+10%FBS+1%P/S
培養(yǎng)溫度：37℃
空氣條件：5% CO2,95% AIR
傳代方法：1:2傳代,，2~3天換液
凍存條件：0%FBS+10%DMSO

AAV-293人胚腎細(xì)胞描述：

      我們推薦使用AAV-293細(xì)胞株繁殖腺病毒相關(guān)重組病毒。 AAV-293源自普遍使用的 HEK293細(xì)胞株,，但產(chǎn)生的病毒滴度更高,。 HEK293細(xì)胞是剪切過的腺病毒5型DNA轉(zhuǎn)染的人胚腎細(xì)胞。 跟HEK293細(xì)胞一樣,，AAV-293細(xì)胞反式表達(dá)腺病毒E1基因,，當(dāng)共轉(zhuǎn)染三個(gè)AAV助質(zhì)粒(一個(gè)含ITR的質(zhì)粒，pAAV-RC, 和E1缺失助質(zhì)粒)時(shí),，可以產(chǎn)生有感染力的腺病毒-相關(guān)病毒顆粒,。
 
動(dòng)物種別：人
性別：***
組織來源：腎；以腺病毒5 DNA 進(jìn)行轉(zhuǎn)化,。
形態(tài)：上皮細(xì)胞

人胚腎細(xì)胞AAV-293,，使用方法
1、您收到細(xì)胞后,，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作：
取出25cm2培養(yǎng)瓶,，75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶，拆下封口膜,，放入37℃,，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)，然后換用新鮮*培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代,。
2,、細(xì)胞傳代：
1）細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,，倒置顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后加入*培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,，1000rpm離心5min；
3）棄上清,，沉淀細(xì)胞用12ml*培養(yǎng)基重懸,，然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代，zui后放入37℃,，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
4）待細(xì)胞*貼壁后，觀察培養(yǎng)結(jié)果,，之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代,。
3,、細(xì)胞凍存：
1）細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,，用PBS清洗細(xì)胞一次,；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后加入*培養(yǎng)液終止消化,，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,，1000rpm離心5min,；
3）用適量的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中,；
4）先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,，然后將其移入-80℃過夜，24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長(zhǎng)期保存,。使用程序降溫盒可直接放入-80℃,。 
4、細(xì)胞復(fù)蘇：
1）從液氮中取出細(xì)胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具）,，快速將其置入37℃水浴中解凍,，直至凍存管中無結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁,；
2）將凍存管中的細(xì)胞移至含5ml*培養(yǎng)基的15ml離心管中,， 1000rpm離心5min；
3）棄上清,，沉淀用5ml*培養(yǎng)基重懸,，接種25cm2培養(yǎng)瓶，于37℃,，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
4）第二天，換用新鮮*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。
,，原代細(xì)胞與細(xì)胞系有什么區(qū)別？細(xì)胞培養(yǎng)物來源于原代外植體或分散的細(xì)胞懸液,。通常在這樣的培養(yǎng)物中細(xì)胞增殖形成匯合地單層細(xì)胞或密集地細(xì)胞懸液,。根據(jù)傳統(tǒng)定義，*次收獲和接種的細(xì)胞被稱為原代細(xì)胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 這類細(xì)胞生命周期有限,，在有限的生命周期內(nèi)需掌握好細(xì)胞zui大的生長(zhǎng)空間,，以保持細(xì)胞群中基因型和表型的*性。細(xì)胞系是不斷生長(zhǎng)，分化的細(xì)胞群,，因其經(jīng)過遺傳改造,，致使其具有無限增長(zhǎng)的潛能。體外生長(zhǎng)的細(xì)胞系用于醫(yī)療或科研,。實(shí)際上,，連續(xù)細(xì)胞系可以用大量次培養(yǎng)基培養(yǎng)，隨著代數(shù)的增加細(xì)胞的基因型和表型都有可能發(fā)生改變,。需要指出的是,，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造,。
1,、倍增和代數(shù)有什么區(qū)別？倍增是培養(yǎng)物中細(xì)胞總數(shù)加倍,，通常是指細(xì)胞指數(shù)或?qū)?shù)生長(zhǎng)期,。代數(shù)是指細(xì)胞群從培養(yǎng)瓶中移出，傳代培養(yǎng)過程的次數(shù),，傳代培養(yǎng)的目的是使細(xì)胞處于低密度以刺激其進(jìn)一步生長(zhǎng),。
2、接收到的凍存細(xì)胞該如何處理,？收到包裝箱后,，立即將凍存細(xì)胞從干冰移入液氮中凍存。此過程盡量快以避免升溫,。不要將細(xì)胞儲(chǔ)存在-80℃,，這樣會(huì)對(duì)細(xì)胞造成不可挽回的傷害。
3,、有多少經(jīng)驗(yàn)才能開始正常人類細(xì)胞培養(yǎng),？推薦有經(jīng)驗(yàn)者在無菌環(huán)境下用層流凈化罩工作，如果有經(jīng)驗(yàn)的話對(duì)其它細(xì)胞類型也是很有利的,。如果你是細(xì)胞培養(yǎng)的初學(xué)者或打算建立細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室,，我們會(huì)為你提供幫助。請(qǐng)的細(xì)胞培養(yǎng)專家,。
，部分相關(guān)產(chǎn)品如下：人糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)Elisa試劑盒人6酮前列腺素(6-K-PG)Elisa試劑盒
人血栓素B2(TXB2)Elisa試劑盒
人皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)Elisa試劑盒
人前列腺素E2(PGE2)Elisa試劑盒
人雙氫睪酮(DHT)Elisa試劑盒
人促生長(zhǎng)激素釋放激素(GHRH)Elisa試劑盒
人孕激素/孕酮(PROG)Elisa試劑盒
人超敏游離雌三醇(uE3)Elisa試劑盒
人前列腺素F(PGF)Elisa試劑盒
人前列腺素E1(PGE1)Elisa試劑盒
人內(nèi)皮素1(ET-1)Elisa試劑盒
人促卵泡素(FSH)Elisa試劑盒
人游離β絨毛膜促性腺激素(f-βhCG)Elisa試劑盒
人全段甲狀旁腺素(i-PTH)Elisa試劑盒
人降鈣素(CT)Elisa試劑盒
人促甲狀腺素(TSH)Elisa試劑盒
人皮質(zhì)醇(Cortisol)Elisa試劑盒

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