按質量計算,，鎂是人體中含量第十一豐富的元素。Mg+2是對所有活細胞都至關重要,，因為它在促進蛋白質的加工方面起著重要作用生物多磷酸鹽,，如ATP、DNA,、RNA和酶的功能,。Mg+2是金屬離子葉綠素中心的離子，一種常見的肥料添加劑,。Mg+2化合物是用作瀉藥,、抗酸劑，用于穩(wěn)定異常的神經興奮和血液循環(huán)血管痙攣,，即子癇,。

艾美捷 BioVision鎂比色檢測試劑盒提供了一種簡單靈敏的方法定量檢測多種生物樣品中的鎂.本試劑盒基于甘油激酶對Mg2+需求的特異性.酶聯(lián)反應的一種產物能顯出顏色（λmax = 450nm），該物質的產量與Mg2+濃度成正比.檢測范圍為2-15 nmoles,，檢測J限為40 M.

鎂比色檢測試劑盒分析方案：

1.標準曲線準備：

通過添加10µl 150 nmol/µl鎂標準溶液,，將標準溶液稀釋至1.5 nmol/µl至990µl蒸餾水，充分混合。將0,2,4,6,8,10µl添加到一系列孔中,。調整體積為50µl/孔,，用蒸餾水生成0,3,6,9,12,15 nmol/孔的鎂標準。

2.樣品制備：組織或細胞可通過4體積的鎂分析提取緩沖液,，旋轉16000g 10分鐘,，以獲得清晰的提取物。向96孔中添加1-50µl液體樣品平板,，用水使總體積達到50µl,。正常血清含有Mg2+0.7-1.05 mM（1.65-2.55 mg/dL），使用5µl血清進行檢測,。尿液應稀釋10倍,。對于未知樣品，我們建議測試不同數(shù)量的取樣以確保OD在線性范圍內,。

3.鎂反應混合物：根據(jù)樣品數(shù)量和標準混合足夠的試劑待執(zhí)行：對于每個孔,，制備總含量為50µl的反應混合物，其中包含：35µl鎂分析緩沖液10µl顯影劑5µl鎂酶混合物

4.將50µl反應混合物添加到每個含有鎂標準和測試的孔中樣品,。為了獲得zui佳結果,，使用多通道移液器在所有樣品中同時啟動反應同時。拌勻,。

5.在37℃下培養(yǎng)10分鐘,。讀取銘牌OD450nm，以獲得每個標準或標準的A0樣品,。

注意：

1） 由于酶動力學對溫度變化很敏感,，因此反應速率將隨著溫度的升高而增加。反應大約需要10分鐘才能達到線性反應速率,。

2） 樣品中的NAD（P）H等可能會產生背景,，10分鐘的等待時間可以糾正這些非特異性背景。

3） Mn2+,、Zn2+,、Ni2+、Fe2+,、Cu2+,、Co2+、Ca2+不干擾測定,。

6.將反應再培養(yǎng)10-30分鐘,，再次讀取OD以獲得讀數(shù)A。建議監(jiān)測反應動力學,，以確保在以下情況下讀數(shù)在線性范圍內：再多讀10-30分鐘,。所有讀數(shù)不得超過1.5 OD。

7.計算：從標準和樣品讀數(shù)中減去A0得到?OD=A-A0。情節(jié)鎂標準曲線,。應用樣本?OD到標準曲線,，以獲得Mg2+量B（nmol）在反應井中。Mg2+濃度：C=B/V（nmol/ml或µM）式中：B為反應井中的Mg2+量（單位：nmol）,。V是添加到反應井中的樣品體積（ml）,。鎂分子量：24.3 g/mol，1 mM=2.43 mg/dL,。也可以通過監(jiān)測標準溶液和標準溶液中的反應斜率來計算析樣品反應,。

鎂標準曲線：根據(jù)試劑盒方案進行測定。垂直點線表示正常血清Mg2+濃度的下限和上限,。