鈣對于所有生物來說都是 不可少的，因為鈣離子在生物體內(nèi)被吸收并釋放到生物體內(nèi)細胞質(zhì)外信號是許多細胞過程的信號,。99%的鈣是鈣在骨骼和牙齒中發(fā)現(xiàn),，其余1%在血液和軟組織中發(fā)現(xiàn)。血清鈣水平受到嚴格控制（8.4-11.4 mg/dL）,，超出此范圍的任何變化都可能導(dǎo)致死亡有嚴重影響,。鈣在調(diào)節(jié)血管收縮和舒張中起作用血管、神經(jīng)沖動傳遞,、肌肉收縮和激素分泌,。

鈣離子通道控制鈣離子在細胞膜上的遷移,，允許激活和抑制多種酶。低鈣的原因這些水平包括慢性腎功能衰竭,、維生素D缺乏和低血鎂水平這可能發(fā)生在嚴重的酒精中毒,。BioVision的比色鈣測定試劑盒利用鈣離子與0-甲酚酞形成的顯色絡(luò)合物（λ=575nm），以在生理上重要的鈣濃度0.4范圍內(nèi)提供一種簡單的測定方法-100毫克/分升（0.1-25毫米）,。

艾美捷 BioVision 鈣比色法檢測試劑盒利用鈣離子和O-苯酞酚形成的顯色復(fù)合物（λ = 575 nm）的原理,，使用O-苯酞酚與樣本中的鈣離子反應(yīng)后通過比色計或分光光度計實現(xiàn)定量.

鈣含量比色檢測試劑盒測定方案：

1.標準曲線制備：通過添加10%的鈣，將鈣標準稀釋至5 mM（20 mg/dL）將500 mM標準溶液的µl與990µl dH2O充分混合,。將0,2,4,6,8,10µl添加到一系列溶液中每孔提供0,0.4,0.8,1.2,1.6,2.0µg鈣,。將體積增加到50µl，并使用二氧化二氫,。

2.樣品制備：血清或尿液樣品可直接用于本試驗,。放置10微升在96孔板中的孔中取樣。對于其他液體樣品,，將2–50µl樣品添加到溶液中個人井,。用dH2O使總體積達到50µl。樣品可以化驗沒有任何事先治療,。一些MRI造影劑會在這種情況下引起短暫的干擾化驗

3.補充：

A） 將90µl顯色試劑添加到每個含有標準品,、樣品或試劑的孔中控制并輕輕混合。

B） 向每個孔中添加60µl鈣分析緩沖液并輕輕混合,。

4.在室溫下培養(yǎng)反應(yīng)5-10分鐘,。避光。

5.在575 nm處測量外徑,。發(fā)色團是不穩(wěn)定的，隨著時間的推移會稍微褪色,，所以在30分鐘內(nèi)閱讀標準品和樣品,。

6.計算：通過減去從0計算得出的值來校正背景所有樣品和標準讀數(shù)的控制（注：背景讀數(shù)可能為重要，必須從樣本讀數(shù)中減去）,。繪制標準曲線µg/井vs,。外徑575納米讀數(shù)。然后將樣本讀數(shù)應(yīng)用于標準曲線,，以獲得井中的鈣樣本量（Sa）,。試樣中的鈣濃度：C=Sa/Sv（微克/微升或毫克/毫升）式中：Sa是標準曲線中的鈣樣品量（單位：µg）。Sv是添加到樣品孔中的樣品體積（µl）,。鈣分子量：40,。樣品中的鈣濃度可以表示為mg/ml、mg/dL或mM（mmol/升）,。1毫克/毫升=100毫克/分升,；1毫米=4毫克/分升

圖：（a） 標準曲線,。（b） 從匯集的人血清（10μl，1:1稀釋）和混合人類尿液（10μl,，1:1稀釋）,。試驗在試驗結(jié)束后進行工具包協(xié)議。