鈣對于所有生物來說都是 不可少的，因為鈣離子在生物體內被吸收并釋放到生物體內細胞質外信號是許多細胞過程的信號,。99%的鈣是鈣在骨骼和牙齒中發(fā)現(xiàn),，其余1%在血液和軟組織中發(fā)現(xiàn)。血清鈣水平受到嚴格控制（8.4-11.4 mg/dL）,，超出此范圍的任何變化都可能導致死亡有嚴重影響,。鈣在調節(jié)血管收縮和舒張中起作用血管、神經(jīng)沖動傳遞,、肌肉收縮和激素分泌。

鈣離子通道控制鈣離子在細胞膜上的遷移,，允許激活和抑制多種酶,。低鈣的原因這些水平包括慢性腎功能衰竭、維生素D缺乏和低血鎂水平這可能發(fā)生在嚴重的酒精中毒,。BioVision的比色鈣測定試劑盒利用鈣離子與0-甲酚酞形成的顯色絡合物（λ=575nm）,，以在生理上重要的鈣濃度0.4范圍內提供一種簡單的測定方法-100毫克/分升（0.1-25毫米）。

艾美捷 BioVision 鈣比色法檢測試劑盒利用鈣離子和O-苯酞酚形成的顯色復合物（λ = 575 nm）的原理,，使用O-苯酞酚與樣本中的鈣離子反應后通過比色計或分光光度計實現(xiàn)定量.

鈣含量比色檢測試劑盒測定方案：

1.標準曲線制備：通過添加10%的鈣,，將鈣標準稀釋至5 mM（20 mg/dL）將500 mM標準溶液的µl與990µl dH2O充分混合。將0,2,4,6,8,10µl添加到一系列溶液中每孔提供0,0.4,0.8,1.2,1.6,2.0µg鈣。將體積增加到50µl,，并使用二氧化二氫,。

2.樣品制備：血清或尿液樣品可直接用于本試驗。放置10微升在96孔板中的孔中取樣,。對于其他液體樣品,，將2–50µl樣品添加到溶液中個人井。用dH2O使總體積達到50µl,。樣品可以化驗沒有任何事先治療,。一些MRI造影劑會在這種情況下引起短暫的干擾化驗

3.補充：

A） 將90µl顯色試劑添加到每個含有標準品、樣品或試劑的孔中控制并輕輕混合,。

B） 向每個孔中添加60µl鈣分析緩沖液并輕輕混合,。

4.在室溫下培養(yǎng)反應5-10分鐘。避光,。

5.在575 nm處測量外徑,。發(fā)色團是不穩(wěn)定的，隨著時間的推移會稍微褪色,，所以在30分鐘內閱讀標準品和樣品。

6.計算：通過減去從0計算得出的值來校正背景所有樣品和標準讀數(shù)的控制（注：背景讀數(shù)可能為重要,，必須從樣本讀數(shù)中減去）,。繪制標準曲線µg/井vs。外徑575納米讀數(shù),。然后將樣本讀數(shù)應用于標準曲線,，以獲得井中的鈣樣本量（Sa）。試樣中的鈣濃度：C=Sa/Sv（微克/微升或毫克/毫升）式中：Sa是標準曲線中的鈣樣品量（單位：µg）,。Sv是添加到樣品孔中的樣品體積（µl）,。鈣分子量：40。樣品中的鈣濃度可以表示為mg/ml,、mg/dL或mM（mmol/升）,。1毫克/毫升=100毫克/分升；1毫米=4毫克/分升

圖：（a） 標準曲線,。（b） 從匯集的人血清（10μl,，1:1稀釋）和混合人類尿液（10μl，1:1稀釋）,。試驗在試驗結束后進行工具包協(xié)議,。