sjsa-1人原發(fā)性骨肉瘤細胞

(SJSA-1)

細胞介紹

SJSA-1細胞（原來稱為OsA-CL)建系于1982年,，源于一個診斷為原發(fā)性股骨骨 肉瘤疾病病人體內(nèi)的腫瘤,。該細胞含有編碼p53相關(guān)蛋白的基因。

細胞特性

1)來源：原發(fā)性股骨骨肉瘤

2)形態(tài)：成纖維細胞,，貼壁生長

3)含量：>lxl06 個/mL

4)污染：支原體,、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5)規(guī)格：T25瓶或者lmL凍存管包裝

運輸和保存：使用含有優(yōu)質(zhì)胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細胞,。收到細胞后,， 可在1000RPM，常溫條件下,，離心5min后,，于潔凈操作臺棄去上清，加入推薦 使用的培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移至l〇cm培養(yǎng)皿或者T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),，傳代達到細胞生長 狀態(tài)良好時,，再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟,。

細胞用途：僅供科研使用,。

sjsa-1人原發(fā)性骨肉瘤細胞

細胞培養(yǎng)步驟

1)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1. 準備DMEM培養(yǎng)基(GIBC0),，90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%; PS,，1%,。

2.培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%;二氧化碳,，5%,。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱 濕度為70%-80%,。

3. 凍存液：90%*培養(yǎng)基,，10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存,。

2)細胞處理：

復(fù)蘇細胞：將含有l(wèi)mL細胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍,，加 入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補 加l-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入l〇cm皿中,，加入約8ml培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢 查細胞密度,。

細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞,，傳代可參考以下方法：

棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。

力口 2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中,，置于37°C培

養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部 分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止

消化,。

按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分 鐘,，棄去上清液,，補加l-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

 將細胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者 瓶中,。

細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。貼壁細胞凍存時，棄 去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,，細胞變圓脫落后,，加入約lml含血清的培養(yǎng)基后 加入凍存管中，再添加1〇%DMSO后進行凍存,。

注意事項：

收到細胞后,，若發(fā)現(xiàn)干冰己揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細胞有污染,，請立 即與我們聯(lián)系。

所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,，并請注 意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄,。