WM-266-4人黑色素瘤細胞

對于每種細胞因子應(yīng)仔細閱讀說明書，注意每批的細節(jié),。在使用細胞因子前,，瞬時離心試劑瓶，盡可能多地收回其中的細胞因子,。

來源可靠(源于ATCC,、ECACC、DSMZ,、JCRB等),，活力>95%，貼壁性好,。我們從試劑,、包被器皿、凍存原代細胞,、新鮮原代細胞,、原代細胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù),。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù),。
服務(wù)流程:
預(yù)約登記→辦理相關(guān)手續(xù)→復(fù)蘇細胞→細胞質(zhì)量檢查→發(fā)送細胞(或自己來取細胞)→細胞售后技術(shù)咨詢答疑,。
培養(yǎng)方法如下:
1、從手術(shù)室無菌取腦髓灰質(zhì)或白質(zhì)后,，仔細剝除腦膜,、血管和纖維成分，置Hanks液中漂洗一,、二次,。
2、置于30—50倍體積的Hanks液中,，此時腦組織比較柔軟,，反復(fù)吹打即制成細胞懸液。
3,、把懸液注入離心管室溫中直立5—10分鐘后,，細胞或細胞團快自然下沉，脂肪等雜物易漂浮,，可吸除上層,、反復(fù)二、三次,，即可排除脂肪成分和其它碎塊并獲較多細胞成分,。
4、在沉降物中加入適量培養(yǎng)液,，通過紗網(wǎng)成紗布過濾,，計數(shù)并調(diào)整細胞密度。
5,、接入培養(yǎng)瓶或皿中,，置5%CO2溫箱中培養(yǎng)。適應(yīng)環(huán)境過程較長,，接種后貼壁較慢,。貼壁后短期內(nèi)也可能不見細胞分裂現(xiàn)象，然而一旦生長后即能迅速進入旺盛的增殖狀態(tài),。細胞傳代可以0.25%胰酶消化處理,。

WM-266-4人黑色素瘤細胞

注意事項:

1.收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2.先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置數(shù)小時(4h左右),，穩(wěn)定細胞狀態(tài),，切忌在溫箱內(nèi)靜置過夜。

3.靜置后鏡檢,，拍照,，記錄細胞狀態(tài)。建議傳代后也拍照記錄細胞生長情況,。

4.  懸浮細胞:將細胞瓶內(nèi)液體都轉(zhuǎn)移至無菌離心管內(nèi)，1000 轉(zhuǎn)/分鐘離心5min,，培養(yǎng)基上清可備用,，管底細胞沉淀用培養(yǎng)基重懸。鏡檢時若細胞密度超過80%,，可將細胞懸液分至2個細胞瓶內(nèi)培養(yǎng);若密度未超過80%,，細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，待達到80%時再正常傳代,。備注:聚團生長慢,，有密度依賴，必須使用T25培養(yǎng)瓶豎立培養(yǎng),，3天一次半量換液一次,，1-2周傳代一次。

貼壁細胞:若細胞密度超過80%,，可正常傳代;若未超過80%,，收集細胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基，留8ml繼續(xù)培養(yǎng)至80%左右再傳代,，瓶蓋可稍微擰松,。備注:細胞貼壁慢，傳代后細胞放2天不動,。

5.細胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基含血清和雙抗,，可收集后4℃保存?zhèn)溆茫裳a加2%血清,。剛開始傳代時建議一半用細胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基,，一半用客戶自備的培養(yǎng)基，使細胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件,，以免因不適應(yīng)而造成生長狀態(tài)不佳,。

6.因為培養(yǎng)過程外因太多，所以我們的售后保障期為一周,，超過一周的細胞我們會酌情處理,，但不提供免費更換服務(wù)。

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