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細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理與技術(shù) 現(xiàn)代生物技術(shù)一般認(rèn)為包括基因工程技術(shù),、細(xì)胞工程技術(shù),、酶工程技術(shù)和發(fā)酵工程技術(shù),,而這些技術(shù)的發(fā)展幾乎都與細(xì)胞培養(yǎng)有密切關(guān)系,,特別是在醫(yī)藥領(lǐng)域的發(fā)展,,細(xì)胞培養(yǎng)更具有特殊的作用和價(jià)值。
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參考價(jià) | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn) |
更新時(shí)間:2024/07/31 08:16:15瀏覽次數(shù):1183
聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!
對于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀說明書,,注意每批的細(xì)節(jié),。在使用細(xì)胞因子前,瞬時(shí)離心試劑瓶,,盡可能多地收回其中的細(xì)胞因子,。
來源可靠(源于ATCC、ECACC,、DSMZ,、JCRB等),活力>95%,,貼壁性好,。我們從試劑、包被器皿,、凍存原代細(xì)胞,、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室,,可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù),。
服務(wù)流程:
預(yù)約登記→辦理相關(guān)手續(xù)→復(fù)蘇細(xì)胞→細(xì)胞質(zhì)量檢查→發(fā)送細(xì)胞(或自己來取細(xì)胞)→細(xì)胞售后技術(shù)咨詢答疑。
培養(yǎng)方法如下:
1,、從手術(shù)室無菌取腦髓灰質(zhì)或白質(zhì)后,,仔細(xì)剝除腦膜、血管和纖維成分,,置Hanks液中漂洗一,、二次。
2,、置于30—50倍體積的Hanks液中,,此時(shí)腦組織比較柔軟,反復(fù)吹打即制成細(xì)胞懸液,。
3,、把懸液注入離心管室溫中直立5—10分鐘后,細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)快自然下沉,,脂肪等雜物易漂浮,,可吸除上層、反復(fù)二,、三次,,即可排除脂肪成分和其它碎塊并獲較多細(xì)胞成分,。
4,、在沉降物中加入適量培養(yǎng)液,通過紗網(wǎng)成紗布過濾,,計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞密度,。
5、接入培養(yǎng)瓶或皿中,,置5%CO2溫箱中培養(yǎng),。適應(yīng)環(huán)境過程較長,接種后貼壁較慢,。貼壁后短期內(nèi)也可能不見細(xì)胞分裂現(xiàn)象,,然而一旦生長后即能迅速進(jìn)入旺盛的增殖狀態(tài)。細(xì)胞傳代可以0.25%胰酶消化處理,。
注意事項(xiàng):
1.收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系,。
2.先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置數(shù)小時(shí)(4h左右),,穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),,切忌在溫箱內(nèi)靜置過夜,。
3.靜置后鏡檢,拍照,,記錄細(xì)胞狀態(tài),。建議傳代后也拍照記錄細(xì)胞生長情況。
4. 懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞瓶內(nèi)液體都轉(zhuǎn)移至無菌離心管內(nèi),,1000 轉(zhuǎn)/分鐘離心5min,,培養(yǎng)基上清可備用,管底細(xì)胞沉淀用培養(yǎng)基重懸,。鏡檢時(shí)若細(xì)胞密度超過80%,,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)培養(yǎng);若密度未超過80%,細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,待達(dá)到80%時(shí)再正常傳代,。備注:聚團(tuán)生長慢,有密度依賴,,必須使用T25培養(yǎng)瓶豎立培養(yǎng),,3天一次半量換液一次,1-2周傳代一次,。
貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞密度超過80%,,可正常傳代;若未超過80%,收集細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基,,留8ml繼續(xù)培養(yǎng)至80%左右再傳代,,瓶蓋可稍微擰松。備注:細(xì)胞貼壁慢,,傳代后細(xì)胞放2天不動,。
5.細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基含血清和雙抗,可收集后4℃保存?zhèn)溆?,可補(bǔ)加2%血清,。剛開始傳代時(shí)建議一半用細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基,一半用客戶自備的培養(yǎng)基,,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件,,以免因不適應(yīng)而造成生長狀態(tài)不佳。
6.因?yàn)榕囵B(yǎng)過程外因太多,,所以我們的售后保障期為一周,,超過一周的細(xì)胞我們會酌情處理,但不提供免費(fèi)更換服務(wù),。
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