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細胞培養(yǎng)的基本原理與技術(shù) 現(xiàn)代生物技術(shù)一般認為包括基因工程技術(shù),、
細胞工程技術(shù),、酶工程技術(shù)和發(fā)酵工程技術(shù),,而這些技術(shù)的發(fā)展幾乎都與細胞培養(yǎng)有密切關(guān)系,特別是在醫(yī)藥領(lǐng)域的發(fā)展,,細胞培養(yǎng)更具有特殊的作用和價值,。
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更新時間:2024/07/30 20:48:15瀏覽次數(shù):723
聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!
注意事項如下:
1 收到細胞后首先觀察T-25瓶是否有損壞、漏液,、渾濁等現(xiàn)象,,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2 對于貼壁細胞,,若細胞漂浮:培養(yǎng)瓶不開封,,用75%酒精擦拭后平躺置于培養(yǎng)箱內(nèi)。次日觀察,,如細胞大部分又貼回瓶底,,表明細胞活力正常,剩余漂浮的細胞可以去掉;如細胞還不貼壁,,將細胞離心收集移到新的培養(yǎng)瓶中,,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,,我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導(dǎo),,直到問題解決。
3 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,,記錄細胞狀態(tài),,便于和本公司技術(shù)部溝通交流。
我們?nèi)娜鉃槟?wù),,提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品,,保障售后服務(wù),真心把客戶奉為上帝,,及時處理客戶訂單,,全程跟蹤貨源,采用誠信快遞運輸,,認真解答客戶疑問,,對客戶售后問題,不拖沓,,不推卸責(zé)任,,認真負責(zé)的態(tài)度。
停滯期(Stagnate Phase):細胞數(shù)量達飽和密度后,,細胞遂停止增殖,,進入停滯期。此時細胞數(shù)量不再增加,,故也稱平頂期(Plateau),。停滯期細胞雖不增殖,但仍有代謝活動,,繼而培養(yǎng)液中營養(yǎng)漸趨耗盡,,代謝產(chǎn)物積累、pH降低,。此時需做分離培養(yǎng)即傳代,,否則細胞會中毒,發(fā)生形態(tài)改變,,重則從底物脫落死亡,,故傳代應(yīng)越早越好。傳代過晚(已有中毒跡象)能影響下一代細胞的機能狀態(tài),。在這種情況下,,雖進行了傳代,因細胞已受損,需要恢復(fù),,至少還要再傳1~2兩代,,通過換液淘汰掉死細胞和使受損輕微的細胞得以恢復(fù)后,才能再用,。結(jié)果反而耽誤了時間,,這是在實驗中應(yīng)特別注意的。
四,、原代培養(yǎng):即*次培養(yǎng),,是指將培養(yǎng)物放置在體外生長環(huán)境中持續(xù)培養(yǎng),中途不分割培養(yǎng)物的培養(yǎng)過程,。有幾方面含義:
培養(yǎng)物一經(jīng)接種到培養(yǎng)器皿(瓶)中就不在分割,,任其生長繁殖;
原代培養(yǎng)中的“代”并非細胞的“代”數(shù),因為培養(yǎng)過程中細胞經(jīng)多次分裂已經(jīng)產(chǎn)生多代子細胞;
原代培養(yǎng)過程中不分割培養(yǎng)物不等于不更換培養(yǎng)液,,也不等于不更換培養(yǎng)器皿,。
正常細胞培養(yǎng)的世代數(shù)有限,只有癌細胞和發(fā)生轉(zhuǎn)化的細胞才能無限生長下去,。所謂轉(zhuǎn)化即是指正常細胞在某種因子的作用下發(fā)生突變而具有癌性的細胞,。目前世界上許多實驗室所廣泛傳用的HeLa細胞系就是1951年從一位名叫Henrietta Lacks的婦女身上取下的宮頸癌細胞培養(yǎng)而成。此細胞系一直延用至今,。
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