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細胞培養(yǎng)的基本原理與技術 現代生物技術一般認為包括基因工程技術,、細胞工程技術、酶工程技術和發(fā)酵工程技術,,而這些技術的發(fā)展幾乎都與細胞培養(yǎng)有密切關系,,特別是在醫(yī)藥領域的發(fā)展,細胞培養(yǎng)更具有特殊的作用和價值,。
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更新時間:2024/07/30 20:31:49瀏覽次數:791
聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,,謝謝!
注意事項如下:
1 收到細胞后首先觀察T-25瓶是否有損壞,、漏液、渾濁等現象,,若有上述現象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系,。
2 對于貼壁細胞,,若細胞漂浮:培養(yǎng)瓶不開封,,用75%酒精擦拭后平躺置于培養(yǎng)箱內。次日觀察,,如細胞大部分又貼回瓶底,,表明細胞活力正常,剩余漂浮的細胞可以去掉;如細胞還不貼壁,,將細胞離心收集移到新的培養(yǎng)瓶中,,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,,我們的技術人員會一直跟蹤指導,,直到問題解決。
3 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,,記錄細胞狀態(tài),,便于和本公司技術部溝通交流。
我們全心全意為您服務,,提供優(yōu)質產品,,保障售后服務,真心把客戶奉為上帝,,及時處理客戶訂單,,全程跟蹤貨源,,采用誠信快遞運輸,認真解答客戶疑問,,對客戶售后問題,,不拖沓,不推卸責任,,認真負責的態(tài)度,。
停滯期(Stagnate Phase):細胞數量達飽和密度后,細胞遂停止增殖,,進入停滯期,。此時細胞數量不再增加,故也稱平頂期(Plateau),。停滯期細胞雖不增殖,,但仍有代謝活動,繼而培養(yǎng)液中營養(yǎng)漸趨耗盡,,代謝產物積累,、pH降低。此時需做分離培養(yǎng)即傳代,,否則細胞會中毒,,發(fā)生形態(tài)改變,重則從底物脫落死亡,,故傳代應越早越好,。傳代過晚(已有中毒跡象)能影響下一代細胞的機能狀態(tài)。在這種情況下,,雖進行了傳代,,因細胞已受損,需要恢復,,至少還要再傳1~2兩代,,通過換液淘汰掉死細胞和使受損輕微的細胞得以恢復后,才能再用,。結果反而耽誤了時間,,這是在實驗中應特別注意的。
四,、原代培養(yǎng):即*次培養(yǎng),,是指將培養(yǎng)物放置在體外生長環(huán)境中持續(xù)培養(yǎng),中途不分割培養(yǎng)物的培養(yǎng)過程,。有幾方面含義:
培養(yǎng)物一經接種到培養(yǎng)器皿(瓶)中就不在分割,,任其生長繁殖;
原代培養(yǎng)中的“代”并非細胞的“代”數,因為培養(yǎng)過程中細胞經多次分裂已經產生多代子細胞;
原代培養(yǎng)過程中不分割培養(yǎng)物不等于不更換培養(yǎng)液,,也不等于不更換培養(yǎng)器皿,。
正常細胞培養(yǎng)的世代數有限,,只有癌細胞和發(fā)生轉化的細胞才能無限生長下去。所謂轉化即是指正常細胞在某種因子的作用下發(fā)生突變而具有癌性的細胞,。目前世界上許多實驗室所廣泛傳用的HeLa細胞系就是1951年從一位名叫Henrietta Lacks的婦女身上取下的宮頸癌細胞培養(yǎng)而成,。此細胞系一直延用至今。
原代培養(yǎng)的細胞一般傳至10代左右就不易傳下去了,,細胞的生長就會出現停滯,,大部分細胞衰老死亡。但是有極少數的細胞能夠度過“危機”而繼續(xù)傳下去,,這些存活的細胞一般能夠傳到40~50代,,這種傳代細胞叫做細胞株。細胞株的遺傳物質沒有發(fā)生改變,在培養(yǎng)過程中其特征始終保持,。當細胞株傳至50代以后又會出現“危機”,,不能再傳下去。但是有部分細胞的遺傳物質發(fā)生了改變,,并且?guī)в邪┳兊奶攸c,,有可能在培養(yǎng)條件下無限制地傳代下去,這種傳代細胞稱為細胞系,。
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