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更新時(shí)間:2024/07/29 17:07:28瀏覽次數(shù):3931

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胎牛血清的購買選擇以及儲(chǔ)存方式詳細(xì)介紹

詳細(xì)介紹

  胎牛血清的購買選擇以及儲(chǔ)存方式詳細(xì)介紹:
  一般選擇胎牛血清的方式是:
  1.胎牛血清并不是價(jià)格越貴越好,,但是價(jià)格跟質(zhì)量肯定是成正比的,,你要選的是適合的,對(duì)你來說性價(jià)比較高的,!
  2.國產(chǎn)跟進(jìn)口的胎牛血清,,可以優(yōu)先考慮國產(chǎn),因?yàn)檫M(jìn)口的胎牛血清不太好買,,不過杭州仟諾生物科技有限公司代理澳洲,,南美等多種進(jìn)口胎牛血清!
  購買的胎牛血清在存儲(chǔ)跟解凍上不能馬虎,,不然前功盡棄:
  正確的步驟是:
  將血清從冷凍箱取出后,,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融,。但必須注意的是,,融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。
  長時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素,、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁,。因此,,推薦在-20℃以下儲(chǔ)存血清,并避免反復(fù)凍融,。
  我們建議胎牛血清應(yīng)保存在-2O℃,。若存放于4℃時(shí),請(qǐng)勿超過一個(gè)月,。若一次無法用完一瓶,,建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍,。
  怎么處理胎牛血清中包含的絮狀沉淀:
  沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白,。這是正常特性,不會(huì)影響產(chǎn)品性質(zhì),。要除去沉淀,,離心血清(400g,1-2分鐘)或者簡(jiǎn)單的讓其沉淀在瓶子底部,,將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個(gè)無菌瓶里(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀,,因?yàn)槌恋頃?huì)堵塞濾膜而無法過濾)。大多情況輕輕搖動(dòng)沉淀并加熱至37℃就會(huì)再溶解,。所以,,使用產(chǎn)品時(shí)要搖動(dòng)并加熱血清至37℃,沉淀會(huì)自然消失,。
  如何避免胎牛血清中產(chǎn)生沉淀
  按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:
  (1)解凍血清時(shí),,請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生,。
  (2) 血清分裝凍存時(shí),,須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,。
  (3) 勿直接由-20℃直接至37℃解凍,,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀,。
  (4) 勿將血清置于37℃太久,,否則血清會(huì)變得渾濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會(huì)因此受到破壞,,從而影響血清的品質(zhì),。
  (5) 胎牛血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,,可以無須做此步驟,。
  (6) 若必須做血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56℃,,30分鐘的原則,,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過高,,時(shí)間過久或搖晃不均勻,,都會(huì)造成沉淀物的增多。
  5,、 培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后,,可長期保存嗎?
  一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了胎牛血清和抗生素時(shí),,您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它,。因?yàn)橐恍┛股睾脱逯械幕境煞衷诮鈨龊缶烷_始降解。
  6,、 為什么要熱滅活胎牛血清?
  加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng),。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,,細(xì)胞和血小板釋放組胺,,激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究,,培養(yǎng)ES細(xì)胞,、平滑肌細(xì)胞時(shí),推薦使用熱滅活血清,。
  7,、 有必要做熱滅活嗎?
  實(shí)驗(yàn)顯示,,經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的,。經(jīng)此處理過的血清對(duì)細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn),,或*沒有任何作用,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,,而造成細(xì)胞生長速率的降低,。而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì)顯著的增多,,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,,像是“小黑點(diǎn)”,常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,,而把血清放在37℃環(huán)境中,,又會(huì)使此沉淀物更增多,使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增,。
  若非必須,,可以不需要做熱處理這一步。不但節(jié)省時(shí)間,,更確保血清的質(zhì)量!
  8,、細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點(diǎn)是污染嗎?如何處理?
  一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成,首先,,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,,然后,在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長的狀態(tài),,黑點(diǎn)是否游動(dòng),。如果細(xì)胞被污染,微生物則會(huì)大量繁殖,,培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃,、變混濁。污染包括細(xì)菌污染,、支原體污染等,。
  如果在鏡下觀察細(xì)胞,生長狀態(tài)良好,,與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比,,沒有任何變化,那么,,黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān):
  (1)細(xì)胞生長過老,,破碎的細(xì)胞殘骸;
  (2)血清質(zhì)量不好,反復(fù)凍融的結(jié)果;
  (3)配制培養(yǎng)基的pH值偏高,,不宜細(xì)胞生長;
  (4)配制培養(yǎng)基的水質(zhì),、容器不合格,。可應(yīng)用離心,、過濾的方法去除這些黑點(diǎn);
  (5)培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn),,可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除,。

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