細胞培養(yǎng)基是專門為正常人類微血管內(nèi)皮細胞體外培養(yǎng)設計的適于其生長的*培養(yǎng)基,。是經(jīng)滅菌的液體培養(yǎng)基,包含必需和非必需氨基酸、維生素、有機和無機化合物、激素,、生長因子、微量礦物質(zhì)和低濃度胎牛血清(5%),。該培養(yǎng)基緩沖體系為重碳酸鹽,,在含5%CO2的細胞培養(yǎng)箱中平衡后pH值為7.4。該培養(yǎng)基的配方能夠選擇性的促進正常人類微血管內(nèi)皮細胞體外培養(yǎng)中的增殖和生長,,并為其達到理想營養(yǎng)平衡狀態(tài),。
細胞培養(yǎng)的意義
⒈可以進行植物體外受精及植物胚胎發(fā)育過程研究,。
?、部梢赃M行植物生長發(fā)育有關的重要基因或影響因素的研究。
?、晨梢苑奖愕赝ㄟ^實驗手段培育植物新品種,。
細胞培養(yǎng)基優(yōu)點:
- 成份確定:無需飼養(yǎng)層的人多能干細胞培養(yǎng)基;
- 充分驗證:> 1100篇同行評審的文獻中被引用,;
- 效果穩(wěn)定:含有預篩選的成份(包括BSA),,使培養(yǎng)基效果穩(wěn)定,且能夠保護培養(yǎng)物免受內(nèi)毒素和培養(yǎng)環(huán)境壓力的影響;
- *的培養(yǎng)hPSC的金標準;
- 已經(jīng)用于60多種iPS細胞系,。
細胞培養(yǎng)基使用的注意事項:
?。?)細胞培養(yǎng)用水一般為三蒸水(經(jīng)石英蒸餾器蒸餾)或超純水,醫(yī)藥生產(chǎn)上一般為注射用水,。
?。?)建議盡量選擇與所用量相匹配的包裝一次使用,因為包裝一旦打開,,組分可能會變質(zhì)或因受潮而結(jié)團,。
(3)溶解干粉培養(yǎng)基時先加入終體積90%~95%的培養(yǎng)用水,,添加劑加完后再補足,。
?。?)如需添加的組分較多時,某一組分*溶解后,,再添加另一組分,。
(5)待培養(yǎng)基*溶解后再加入碳酸氫鈉,,以免產(chǎn)生沉淀,。
(6)所有成分*溶解后,,培養(yǎng)基應立即過濾或高壓除菌,,以免產(chǎn)生沉淀或有微生物污染。
?。?)由于除菌過濾后,pH值可能會升高0.1~0.2個單位,,因此在過濾前,,可將pH調(diào)至比所需值低0.1~0.2個單位。
?。?)在細胞培養(yǎng)過程中,,建議不加或加少量的抗生素,如血清的濃度較低則所加抗生素的量也要相應降低一些,。
?。?)建議用1NHCl或1NNaOH來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH,因為用碳酸氫鈉調(diào)pH值對培養(yǎng)液的滲透壓影響比較大,。
細胞培養(yǎng)基是人工模擬細胞在體內(nèi)的生長環(huán)境,,是提供細胞營養(yǎng)和促進細胞生長增殖的物質(zhì)基礎。當它是粉劑時,,傾向性地稱為培養(yǎng)基,,將粉劑配成液體后,多稱為培養(yǎng)液,。培養(yǎng)液中常補加血清,、抗生素等營養(yǎng)成分。