很多科研小伙伴在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中，總是出現(xiàn)各種各樣的情況和問題,，比如,，細(xì)胞漏液、不貼壁,、細(xì)胞有黑點(diǎn),、支原體污染、不增殖,、細(xì)胞老化變形,、復(fù)蘇存活率低等等，這些問題對于參與細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的小伙伴來說,，是急需解決的大問題,，好不容易買來的細(xì)胞，剛剛進(jìn)行培養(yǎng)傳代,，就出現(xiàn)了以上的各種問題,，這樣的情況通常都會令小伙伴們無比抓狂。
因?yàn)橄胍_展后續(xù)實(shí)驗(yàn),，培養(yǎng)細(xì)胞往往是關(guān)鍵要事,，細(xì)胞養(yǎng)不好，后續(xù)實(shí)驗(yàn)就無法進(jìn)行,。
如果排除了其他試劑選擇不當(dāng),、細(xì)胞株老化、復(fù)蘇存活率低等原因,，而仍有上述一種或幾種情況,，那么還有一種情況發(fā)生，那就是你的細(xì)胞可能被污染了,。所以不管發(fā)生哪種類型的污染情況都會造成相同的結(jié)果，就是實(shí)驗(yàn)需要重新做,，這樣不僅增加了實(shí)驗(yàn)成本,，而且又浪費(fèi)工作時間，還增加了實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性,。
而且以污染細(xì)胞和未污染細(xì)胞為基礎(chǔ)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時,，有可能得到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果*不同。更為嚴(yán)重的是，如果你所研究的細(xì)胞是另外一種細(xì)胞的話,，那所做的所有工作可能會一文不值,。
那么為什么一定要進(jìn)行支原體污染清除呢？
支原體污染清除要求
從2013年開始,，《Nature》期刊已正式要求投稿的文章,，如涉及細(xì)胞培養(yǎng)都要進(jìn)行支原體檢測。以細(xì)胞為載體的科學(xué)研究,，如果不能保證所用的細(xì)胞無支原體污染,，則實(shí)驗(yàn)結(jié)果很可能是不可靠甚至是*錯誤的！
支原體直徑約為0.1-0.3 μm,，具有變形能力,，可透過常見過濾膜（0.22-0.45 μm），因此常規(guī)的無菌過濾方法不能將其去除,，常用的抗生素也對支原體無效,。支原體污染是細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域的一個世界性問題，世界各國細(xì)胞系支原體污染的平均比例為30-60%,。
支原體可通過細(xì)胞之間交叉污染,，操作人員的口腔、皮膚造成污染,，或者血清等添加物而帶入污染,。
電鏡下的支原體
支原體在光學(xué)顯微鏡下不可見，一般不會引起培養(yǎng)物混濁,，因此細(xì)胞被支原體污染一般難以察覺,。支原體會消耗必須氨基酸，影響細(xì)胞生長速率,，促進(jìn)代謝物積累,，改變細(xì)胞形態(tài)，影響 DNA,、RNA 以及蛋白質(zhì)的合成,，抑制細(xì)胞因子表達(dá)，改變被污染細(xì)胞的基因表達(dá)譜,，誘導(dǎo)染色體畸變,。
支原體的危害
支原體清除服務(wù)包括以下幾個方面：
服務(wù)對象
1. 實(shí)驗(yàn)室的種子細(xì)胞，如從ATCC,、JCRB,、DMSZ等國外專業(yè)細(xì)胞庫采購的珍貴細(xì)胞系；
2. 組織珍貴的原代細(xì)胞,；
3. 需要進(jìn)行基因編輯的細(xì)胞,；
4. 各類干細(xì)胞（含iPS細(xì)胞）,；
5. 稀有細(xì)胞。
服務(wù)內(nèi)容
1.根據(jù)客戶提供的細(xì)胞名稱,、細(xì)胞代次,、細(xì)胞類型制定細(xì)胞的支原體清除方案；
2. 細(xì)胞STR鑒定（選做）,；
3. 支原體PCR法檢測支原體污染程度,；
4. 細(xì)胞的支原體清除，一般污染單一支原體的清除時間為2周左右,，感染多種支原體且非常嚴(yán)重的細(xì)胞,，清除時間需要延長，約3-4左右,；
5. 2-3周后,，再次進(jìn)行支原體檢測，如果細(xì)胞支原體清除干凈,，將換為支原體預(yù)防培養(yǎng)方案,，繼續(xù)維持一周左右時間。如未清除干凈,，則適當(dāng)延長1-2周繼續(xù)清除頑固支原體,，2周后再次進(jìn)行復(fù)檢。
服務(wù)周期與價格
送樣要求
1. 復(fù)蘇細(xì)胞（充液運(yùn)輸）：生長狀態(tài)良好的細(xì)胞,，待達(dá)70%-80%匯合時,，去掉舊培養(yǎng)液換入新培養(yǎng)液，量要達(dá)到培養(yǎng)瓶的頸部（過滿易污染）,，保留少許空間,，旋緊瓶蓋，避免空氣過多運(yùn)輸中氣泡運(yùn)動易使細(xì)胞脫落,。
2. 凍存細(xì)胞（干冰運(yùn)輸）：將干冰提前置于塑料泡沫盒中,，以較快的速度將細(xì)胞凍存管從液氮轉(zhuǎn)入干冰中，用膠帶封好泡沫盒,，在外面加套一層紙盒,，延緩干冰揮發(fā)。
注：根據(jù)距離選擇泡沫盒,，泡沫盒壁的厚度不小于 50mm,，內(nèi)部空間不小于200× 200× 200mm，放入足量干冰,。
支原體清除案例
如上圖1所示,，左側(cè)為支原體污染的MCF-7細(xì)胞，右側(cè)為支原體清除后的MCF-7細(xì)胞,，倒置顯微鏡下可明顯看出細(xì)胞間隙間黑點(diǎn)明顯減少，細(xì)胞邊緣清晰，狀態(tài)良好,。
如上圖2所示,，左側(cè)為支原體污染的Hep G2細(xì)胞，右側(cè)為支原體清除試劑處理的Hep G2細(xì)胞,。左側(cè)有支原體污染的細(xì)胞樣品可以觀察到細(xì)胞核周圍微粒狀或絲狀藍(lán)色熒光,。支原體污染嚴(yán)重的細(xì)胞可以觀察到大量微粒狀或絲狀藍(lán)色熒光。右側(cè)細(xì)胞支原體污染被清除干凈,，僅觀察到細(xì)胞核的藍(lán)色熒光,，證明支原體已被清除干凈。
注意事項(xiàng)
1. 由于各個實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)體系不同,，且更換體系細(xì)胞會需要一段時間的適應(yīng),，故本服務(wù)需客戶自行提供足量的培養(yǎng)體系；
2. 根據(jù)客戶需求,，STR鑒定服務(wù)為選做項(xiàng)目,，鏡像綺點(diǎn)生物承諾對于支原體清除服務(wù)細(xì)胞進(jìn)行單獨(dú)隔離培養(yǎng)，客戶為保證實(shí)驗(yàn)嚴(yán)謹(jǐn)性,，可選擇我司進(jìn)行STR鑒定服務(wù),；
3. 由于細(xì)胞隨時可能會存在交叉的風(fēng)險，只認(rèn)可我司接收細(xì)胞后第yi時間進(jìn)行的STR鑒定結(jié)果,；
提供結(jié)果
原始支原體PCR結(jié)果圖片和無支原體污染的細(xì)胞（根據(jù)客戶需要選擇充復(fù)蘇/凍存發(fā)貨形式）,。
保密承諾
我公司鄭重承諾：客戶提供產(chǎn)品的檢測信息與數(shù)據(jù)，履行保密義務(wù),，未經(jīng)客戶許可,，不得擅自公開發(fā)表或使用，不得泄露給第三方,。
支原體清除試劑
另外,，鏡像綺點(diǎn)還提供可有效抑制并清除多種支原體的支原體清除劑，包括 Mycoplasma orale, M. arginini, M. hyorhinis和Acholeplasma laidlawii,。經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證對細(xì)胞幾乎沒有毒性,，對細(xì)胞的各種檢測沒有干擾。通常在細(xì)胞培養(yǎng)液中加入本試劑約1至2周即可有效抑制和清除支原體,。
iCell支原體清除劑為透明淡黃色液體,。具體的工作濃度因支原體的種類不同而有所不同，在實(shí)際防止支原體污染或清除支原體污染時需摸索適當(dāng)?shù)墓ぷ鳚舛取?/p>
支原體清除試劑經(jīng)過了上百種細(xì)胞的測試和長期的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,，對細(xì)胞無害,，對清除支原體污染*，能夠很好的抑制和殺滅支原體,。
所以,，科研小伙伴們?nèi)绻銈兪掷镎滟F的細(xì)胞被支原體污染了,，沒有辦法做實(shí)驗(yàn)，沒有其他地方采購,，千萬不要扔掉,，交給我們，相信我們,，我們會還你一個狀態(tài)好又無污染的好細(xì)胞,，而且我們保證，不成功不收費(fèi)的哦~~~
(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)
7
立即詢價
您提交后,，專屬客服將第一時間為您服務(wù)