人原代食管上皮細胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：GC-1, 鼠精原細胞 Mouse A2780(人癌細胞) 小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A5 Hela-RFP-puro(慢病毒構建穩(wěn)定株)人細胞 Hela-RFP-puro (leiviral consuct stable sain) in human cervical cancer cells 小鼠原代骨骼肌細胞培養(yǎng)基

人原代食管上皮細胞專用培養(yǎng)基

人原代食管上皮細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持人原代食管上皮細胞優(yōu)良的生長狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含人原代食管上皮細胞生長所需的各種成分,，無需添加任何成分，可直接用于人原代食管上皮細胞的培養(yǎng),。

 

注意事項

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,，如有接觸，立即用自來水沖洗即可,。

復蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預熱到 37℃,；

2) 準備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預熱,；

3) 戴上護目鏡，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復蘇的細胞,，盡快轉入 37℃恒溫水浴鍋中

復溫晃動凍存管以提高復溫速率；

4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準備的離心管中，混勻后,，1000rpm 離心 5min,；

5) 準備一個 T-25 培養(yǎng)瓶，寫上細胞名稱,、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后,，轉入 T-25 細胞培養(yǎng)中，混勻后轉入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。

傳代 （細胞傳代建議一傳二）

1) 當細胞匯合度達到 85%以上時,，可進行傳代。

2) 在生物安全柜內(nèi),，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS,；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml,，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起,，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準備一個無菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min,；

7) 準備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶，各加入 4ml培養(yǎng)基,。

8) 離心完成后,，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞,，將重懸后的細胞轉入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶,，每個培養(yǎng)瓶各 1ml；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。 

凍存 （細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后,，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀，然后轉入 1.8ml 凍存管中,；

8）將凍存管轉入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉入-80℃冰箱中過夜降溫；

9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉入液氮罐中保存。

?無菌操作?：細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行,，使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱。實驗人員需更換工作服,、鞋套,，戴口罩、手套,。

?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品,。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清、緩沖液等試劑應無菌,、無污染,，使用前需進行無菌檢測。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異,，應按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量，細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。

?定期檢測?：定期對細胞進行支原體,、細菌,、真菌等污染檢測。

Bursin 囊素三肽/三肽囊素/雞法氏囊三肽 100mgBursin 囊素三肽/三肽囊素/雞法氏囊三肽

CTNNB1 Protein Human 重組人 beta-Catenin / CTNNB1 蛋白 (His & GST 標簽)

CD36重組小鼠 CD36 / SCARB3 蛋白 Protein

NTRK1 Protein Rat 重組大鼠 TrkA / NTRK1 蛋白 (Fc 標簽)

CCL15重組人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 46-113, His 標簽) Protein

大鼠血管生成素樣蛋白4(ANGPTL4)試劑盒 ,，英文名： ANGPTL4 ELISA Kit

Mouse prostaglandin E1 (PGE1) ELISA Kit 小鼠前列腺素E1(PGE1)試劑盒

Mouseangiopoietieceptoie2,ANG-R-Tie2ELISAkit 小鼠血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanCalreticulin,CELISAKit人鈣網(wǎng)蛋白

細胞CSK激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitTE大鼠端粒酶

小鼠抗利尿激素試劑盒   小鼠抗利尿激素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠抗利尿激素試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠抗利尿激素試劑盒,、小鼠抗利尿激素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體試劑盒   小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體試劑盒,、小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月,。

小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA試劑盒   小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：試劑盒（進口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA試劑盒、小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgAeisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月,。

小鼠抗紅細胞抗體試劑盒   小鼠抗紅細胞抗體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠抗紅細胞抗體試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠抗紅細胞抗體試劑盒,、小鼠抗紅細胞抗體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat basic fibroblast growth factor (bFGF) ELISA Kit 大鼠堿性成纖維生長因子(bFGF)試劑盒

HumaeplicationproteinA,RPA-70ELISAKit 人復制蛋白A(RPA-70)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Human5-Nucleotidase,5-試劑盒人5核苷酸酶(5-)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌天青曙紅(Azure-eosinate)染色試劑盒50次

Mouseai-oligodendrocyte-myelinglycoproteinaibody,OMgp-AbELISAKit小鼠少突膠質(zhì)細胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)試劑盒規(guī)格：96T/48T

去整合素樣金屬蛋白酶18抗體

轉運蛋白SEC61β亞基抗體

人原代食管上皮細胞專用培養(yǎng)基CD36重組小鼠 CD36 / SCARB3 蛋白 Protein

Bursin 囊素三肽/三肽囊素/雞法氏囊三肽 100mgBursin 囊素三肽/三肽囊素/雞法氏囊三肽

CCL15重組人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 46-113, His 標簽) Protein

CTNNB1 Protein Human 重組人 beta-Catenin / CTNNB1 蛋白 (His & GST 標簽)

NTRK1 Protein Rat 重組大鼠 TrkA / NTRK1 蛋白 (Fc 標簽)