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小鼠谷草轉(zhuǎn)(GPT)酶聯(lián)免疫分析實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠谷草轉(zhuǎn)(GPT),。用純化的小鼠谷草轉(zhuǎn)(GPT)抗體包被微孔板,，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加入谷草轉(zhuǎn)(GPT)，再與  HRP 標(biāo)記的谷草轉(zhuǎn)(GPT)抗體,，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,，經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在   HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)(GPT)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在 450nm波化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的谷草轉(zhuǎn)長下測定吸光度（OD值）,，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中小鼠谷草轉(zhuǎn)(GPT)濃度,。
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗,。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品,，因   NaN3抑制辣根過（HRP）活性。
操作步驟
1.  標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀
釋,。
2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）,、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50μl,，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,，然后再加待測樣品 10μl（樣品zui終稀釋度為 5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻。溫育：用封板膜封板后37℃溫育30分鐘,。30倍稀釋后備用
配液：將 30倍濃
洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜重復(fù) 5次，拍干,。30秒后棄去
加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,，空白孔除外。
操作程序總：
計算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),， OD值為縱坐標(biāo),，在坐標(biāo)紙上,，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù),；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與  OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,，將樣品的 OD值代入方程式，計算出樣品濃度,，再乘以稀釋倍數(shù),，即為樣品的實際濃度。
小鼠谷草轉(zhuǎn)(GPT)酶聯(lián)免疫分析注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,，酶標(biāo)包被板開封后如未用完,，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有析出,，稀釋時可在浴中加溫助溶,，洗滌時不影響。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器,，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5分鐘內(nèi),，如標(biāo)本數(shù)量多,，推薦使用排槍加樣。
4．請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,，做復(fù)孔,。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本  OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的 OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定,，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）,。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉
6．底物請避光保存

小鼠谷草轉(zhuǎn)(GPT)酶聯(lián)免疫保存條件及有效期

1．試劑盒保存：,；2-8℃,。

2．有效期：6個月