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操作步驟如下：

（1）將特異抗體與固相載體連接,，形成固相抗體。洗滌,。
（2）待測管中加受檢標(biāo)本和一定量酶標(biāo)抗原的混合溶液,，使之與固相抗體反應(yīng)。如受檢標(biāo)本中無抗原,，則酶標(biāo)抗原能順利地與固相抗體結(jié)合,。如受檢標(biāo)本中含有抗原，則與酶標(biāo)抗原以同樣的機(jī)會(huì)與固相抗體結(jié)合,，競爭性地占去了酶標(biāo)抗原與固相載體結(jié)合的機(jī)會(huì),，使酶標(biāo)抗原與固相載體的結(jié)合量減少。參考管中只加酶標(biāo)抗原,，保溫后,，酶標(biāo)抗原與固相抗體的結(jié)合可達(dá)zui充分的量。洗滌,。
（3）加底物顯色：參考管中由于結(jié)合的酶標(biāo)抗原zui多,，故顏色zui深。參考管顏色深度與待測管顏色深度之差,，代表受檢標(biāo)本抗原的量,。待測管顏色越淡,，表示標(biāo)本中抗原含量越多。