兔原代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：FAM3D Protein Human 重組人 FAM3D 蛋白 (His 標(biāo)簽) NCI-H661(人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;BALB/C 3T3 小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基 Li-7人肝癌細(xì)胞 Li-7 human 小鼠原代海綿體平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 人原代肝門靜脈成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基

兔原代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞專用培養(yǎng)基

兔原代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試,，本產(chǎn)品可保持兔原代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含兔原代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞生長所需的各種成分,，無需添加任何成分，可直接用于兔原代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng),。

 

注意事項

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,，如有接觸，立即用自來水沖洗即可,。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃,；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱,；

3) 戴上護(hù)目鏡,，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞,，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動凍存管以提高復(fù)溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中，混勻后,，1000rpm 離心 5min,；

5) 準(zhǔn)備一個 T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細(xì)胞名稱,、日期，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時，可進(jìn)行傳代,。

2) 在生物安全柜內(nèi),，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS,；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml,，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起,，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管,；

① 準(zhǔn)備一個無菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細(xì)胞脫,。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準(zhǔn)備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基,。

8) 離心完成后，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞,，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶，每個培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶,，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀,，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫,；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存,。

防御素β113(DEFβ113)重組蛋白 Recombinant Defensin Beta 113 (DEFb113)

CLIC4 Protein Human 重組人 CLIC4 蛋白

SEMA5A重組小鼠 Semaphorin 5A / SEMA5A 蛋白 Protein

FCGRT & B2M Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白

TSPAN8重組人 TSPAN8 / Tetraspanin 8 / TM4SF3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

大鼠胰島素樣蛋白3(INSL3)試劑盒 ，英文名： INSL3 ELISA Kit

Mouse urokinase type plasminogen activator (uPA) ELISA Kit 小鼠型纖溶酶原激活物(uPA)試劑盒

Mouseansforminggrowthfactorα,TGF-αELISAKit 小鼠轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanCoisolELISAKit人

細(xì)胞BMK激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitBMP-7大鼠骨成型蛋白7

小鼠神經(jīng)降壓肽（）試劑盒   96T/48T

小鼠神經(jīng)激肽B(NKB)試劑盒   96T/48T

小鼠神經(jīng)激肽A(NKA)試劑盒   96T/48T

小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)試劑盒   96T/48T

小鼠鼠痘病毒(MPV)試劑盒 96T/48T

Human gliadin IgA (Gliadin-IgA) ELISA Kit 人麥角蛋白IgA(Gliadin-IgA)試劑盒

HumangelsonELISAKit 人凝膠原蛋白(gelson)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Duckviruseeritis,DEV試劑盒鴨病毒性腸病毒(DEV)試劑盒規(guī)格：96T/48T

增強(qiáng)型DAB顯色溶液A液：10毫升B液：90毫升C液：1毫升

MousecyclophilinA,CyPAELISAKit小鼠嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CyPA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白XK抗體

脂滴包被蛋白A+B抗體

兔原代臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞專用培養(yǎng)基EGF重組小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

70kDa熱休克蛋白1樣蛋白(HSPA1L)重組蛋白 Recombinant Heat Shock 70kDa Protein 1 Like Protein (HSPA1L)

MKI67重組人 MKI67 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

CLIC4 Protein Human 重組人 CLIC4 蛋白

ACE2 Protein Rat 重組大鼠 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白

?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進(jìn)行,，使用前需對超凈工作臺進(jìn)行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱。實驗人員需更換工作服,、鞋套,，戴口罩、手套,。

?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清,、緩沖液等試劑應(yīng)無菌、無污染,，使用前需進(jìn)行無菌檢測,。不同細(xì)胞對培養(yǎng)液成分要求有差異，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應(yīng)控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。

?定期檢測?：定期對細(xì)胞進(jìn)行支原體,、細(xì)菌、真菌等污染檢測,。