詳細介紹
人原代腦皮層神經(jīng)元細胞專用培養(yǎng)基S
產(chǎn)品分類 | 原代細胞專用培養(yǎng)基 |
規(guī)格 | 100mL/500mL |
貨號 | GOY-XP3363 |
人原代腦皮層神經(jīng)元細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,,本產(chǎn)品可保持人原代腦皮層神經(jīng)元細胞優(yōu)良的生長狀態(tài),。
本產(chǎn)品中已包含人原代腦皮層神經(jīng)元細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,,可直接用于人原代腦皮層神經(jīng)元細胞的培養(yǎng),。
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代神經(jīng)元細胞基礎培養(yǎng)基 | 500ml | 1× | 4℃、避光 |
原代神經(jīng)元細胞培養(yǎng)添加劑 | 5ml | 100× | -20℃,、避光 |
胎牛血清(FBS) | 50ml | 終濃度10% | -20℃,、避光 |
注意事項
僅限科研用。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì),,請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,;這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,如有接觸,,立即用自來水沖洗即可,。
儀器 | 試劑 | 耗材 |
離心機 | 胎牛血清(FBS) | 離心管(15ml,、50ml) |
生物安全柜 | 無菌 1×PBS pH=7.2 | T-25 細胞培養(yǎng)瓶 |
電動移液器 | 0.25%+0.02%EDTA | 一次性無菌移液管(2ml、5ml,、10ml) |
CO2 培養(yǎng)箱 | 培養(yǎng)基(含血清) | 1.8mL 凍存管 |
倒置顯微鏡 | 凍存液:90%FBS+10%DMSO | 程序降溫盒 |
復蘇
1) 將恒溫水浴鍋中的水預熱到 37℃,;
2) 準備一支 15ml 離心管,加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,,放入 37℃水浴鍋中預熱,;
3) 戴上護目鏡,厚毛線手套后,,從液氮罐中取出要復蘇的細胞,,盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中
復溫晃動凍存管以提高復溫速率,;
4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準備的離心管中,,混勻后,1000rpm 離心 5min,;
5) 準備一個 T-25 培養(yǎng)瓶,,寫上細胞名稱、日期,,再加入 4ml 培養(yǎng)基,;
6) 離心完成后棄去上清,用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后,,轉(zhuǎn)入 T-25 細胞培養(yǎng)中,,混勻后轉(zhuǎn)入
CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。
傳代 (細胞傳代建議一傳二)
1) 當細胞匯合度達到 85%以上時,,可進行傳代,。
2) 在生物安全柜內(nèi),打開培養(yǎng)瓶瓶口,,收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基,;
3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,水平放置培養(yǎng)瓶,,使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,,吸棄 PBS;
4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml,,浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,;
5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起,若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,,將懸液吸入 15ml 離心管,;
① 準備一個無菌的 15ml 離心管,加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,;
② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內(nèi)中和(避免吹打③),;向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,,輕拍培養(yǎng)瓶,95%左右細胞脫,。
6) 1000rpm 離心 5min,;
7) 準備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶,各加入 4ml培養(yǎng)基,。
8) 離心完成后,,棄上清,用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞,,將重懸后的細胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶,,每個培養(yǎng)瓶各 1ml;
9) 水平放置培養(yǎng)瓶,,震蕩混勻后,,將培養(yǎng)瓶置于 37℃,5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。
凍存 (細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支)
1)~6)參照傳代步驟
7)離心完成后,,棄上清,用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀,,然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中,;
8)將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫,;
9)第二天,,取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存,。
?無菌操作?:細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行,,使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌,定期清潔培養(yǎng)箱,。實驗人員需更換工作服,、鞋套,戴口罩,、手套,。
?器材滅菌?:玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,,塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品,。
?試劑選擇?:所用培養(yǎng)液、血清,、緩沖液等試劑應無菌,、無污染,使用前需進行無菌檢測,。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異,,應按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。
?培養(yǎng)條件?:多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,偏差應控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應保持良好密封性,,定期檢查氣體濃度與流量,細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應保持在95%左右,。
?日常觀察?:每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。
?定期檢測?:定期對細胞進行支原體,、細菌、真菌等污染檢測,。
IDE 胰島素降解酶(抗原 0.5mgIDE 胰島素降解酶(抗原)
GIF Protein Human 重組人 Gastric intrinsic factor / GIF 蛋白
SELP重組食蟹猴 / 恒河猴 SELP / selectin P / P-selectin 蛋白 Protein
KLRB1F Protein Mouse 重組小鼠 KLRB1F / NKR-P1F 蛋白 (Fc 標簽)
BTK重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 Protein
大鼠胰島素樣生長因子1(IGF1)試劑盒 ,,英文名: IGF1 ELISA Kit
Mouse brain derived neuroophic factor (BDNF) ELISA Kit 小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)試劑盒
Mouseierleukin8,IL-8ELISAKit 小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanCoisolELISAKit人唾液
細胞BLK激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitBMPR-1A大鼠骨成型蛋白受體1A
兔子膠原酶II(CollagenaseII)試劑盒 96T/48T
兔子膠原酶I(CollagenaseI)試劑盒 96T/48T
兔子堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)試劑盒 96T/48T
兔子甲狀腺素(T4)試劑盒 96T/48T
小鼠白介素1受體拮抗劑(IL-1Ra)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human sialic acid (SA) ELISA Kit 人唾液酸(SA)試劑盒
HumaniactParathormone,i-PTHELISAKit 人全段甲狀旁腺素(i-PTH)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humancardiacankyriepeatdomain1,ANKRD1試劑盒人心肌錨蛋白重復域1(ANKRD1)試劑盒規(guī)格:96T/48T
重組腺病毒載體轉(zhuǎn)染試劑盒10次
HumanSolubleClusterofdiffereiation38,sCD38ELISAKit人可溶性CD38(sCD38)試劑盒規(guī)格:96T/48T
膜突蛋白抗體
整合素β1(CD29)抗體
人原代腦皮層神經(jīng)元細胞專用培養(yǎng)基SELP重組食蟹猴 / 恒河猴 SELP / selectin P / P-selectin 蛋白 Protein
IDE 胰島素降解酶(抗原 0.5mgIDE 胰島素降解酶(抗原)
BTK重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 Protein
GIF Protein Human 重組人 Gastric intrinsic factor / GIF 蛋白
KLRB1F Protein Mouse 重組小鼠 KLRB1F / NKR-P1F 蛋白 (Fc 標簽)