化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100mL/500mL |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-XP3354 | 應用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 僅用于科研 |
詳細介紹
人原代角膜基質(zhì)細胞專用培養(yǎng)基
產(chǎn)品分類 | 原代細胞專用培養(yǎng)基 |
規(guī)格 | 100mL/500mL |
貨號 | GOY-XP3354 |
人原代角膜基質(zhì)細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持人原代角膜基質(zhì)細胞優(yōu)良的生長狀態(tài),。
本產(chǎn)品中已包含人原代角膜基質(zhì)細胞生長所需的各種成分,，無需添加任何成分，可直接用于人原代角膜基質(zhì)細胞的培養(yǎng),。
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代基質(zhì)細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500ml | 1× | 4℃,、避光 |
原代基質(zhì)細胞培養(yǎng)添加劑 | 5ml | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清（FBS） | 50ml | 終濃度10% | -20℃,、避光 |
注意事項
僅限科研用,。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,，如有接觸，立即用自來水沖洗即可,。
| 儀器 | 試劑 | 耗材 |
| 離心機 | 胎牛血清（FBS） | 離心管（15ml,、50ml） |
| 生物安全柜 | 無菌 1×PBS pH=7.2 | T-25 細胞培養(yǎng)瓶 |
| 電動移液器 | 0.25%+0.02%EDTA | 一次性無菌移液管（2ml、5ml,、10ml） |
| CO2 培養(yǎng)箱 | 培養(yǎng)基（含血清） | 1.8mL 凍存管 |
| 倒置顯微鏡 | 凍存液：90%FBS+10%DMSO | 程序降溫盒 |
復蘇
1) 將恒溫水浴鍋中的水預熱到 37℃,；
2) 準備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預熱,；
3) 戴上護目鏡,，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復蘇的細胞，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中
復溫晃動凍存管以提高復溫速率,；
4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準備的離心管中,，混勻后,，1000rpm 離心 5min；
5) 準備一個 T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細胞名稱,、日期，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；
6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后，轉(zhuǎn)入 T-25 細胞培養(yǎng)中,，混勻后轉(zhuǎn)入
CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。
傳代 （細胞傳代建議一傳二）
1) 當細胞匯合度達到 85%以上時，可進行傳代,。
2) 在生物安全柜內(nèi),，打開培養(yǎng)瓶瓶口，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基,；
3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS,；
4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；
5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起,，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中，將懸液吸入 15ml 離心管,；
① 準備一個無菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基；
② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶，95%左右細胞脫,。
6) 1000rpm 離心 5min,；
7) 準備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶，各加入 4ml培養(yǎng)基,。
8) 離心完成后,，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞,，將重懸后的細胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶,，每個培養(yǎng)瓶各 1ml；
9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
凍存 （細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）
1）~6）參照傳代步驟
7）離心完成后,，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中,；
8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫；
9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。
?無菌操作?：細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行,，使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱。實驗人員需更換工作服,、鞋套,，戴口罩、手套,。
?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品,。
?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清、緩沖液等試劑應無菌,、無污染,，使用前需進行無菌檢測。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異,，應按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。
?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量，細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應保持在95%左右,。
?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。
?定期檢測?：定期對細胞進行支原體,、細菌,、真菌等污染檢測。
Flag-Tag (CT 1mgFlag-Tag (CT) Flag Tag標簽多肽
FGFBP3 Protein Human 重組人 FGFBP3 蛋白
EFNB3重組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白 Protein
FETUB Protein Mouse 重組小鼠 Fetuin-B / FETUB 蛋白
CST1重組人 Cystatin SN / CST1 蛋白 Protein
大鼠胰高血糖素樣肽1(GLP1)試劑盒 ,，英文名： GLP1 ELISA Kit
Mouse endothelin 1 (ET-1) ELISA Kit 小鼠內(nèi)皮素1(ET-1)試劑盒
MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅡ,TNFsR-ⅡELISAKIT 小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumancytoplasmicimmunoglobulin,CIgELISAKit人胞漿免疫球蛋白
細胞ATP酶活性染色試劑盒50次
ELISAKitCasp-9大鼠胱天蛋白酶9
微量DNA凝膠回收試劑盒 50T
MiniELGelExactionKit 100T
微量樣品 50T
MiniEleDNAKit 100T
小鼠膽囊收縮素/腸促肽(CCK)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human placeal ribonuclease inhibitor (HPRI) ELISA Kit 人胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)試劑盒
Humanlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISAKit 人脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanAttacin,Att試劑盒人抗菌肽(Att)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物源性食品榛果(hazeln)試劑盒20次
Humahrombomodulin,，TMELISAKit人血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)試劑盒規(guī)格：96T/48T
磷酸化真核啟動因子2α抗體
抑制素βC抗體
人原代角膜基質(zhì)細胞專用培養(yǎng)基EFNB3重組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白 Protein
Flag-Tag (CT 1mgFlag-Tag (CT) Flag Tag標簽多肽
CST1重組人 Cystatin SN / CST1 蛋白 Protein
FGFBP3 Protein Human 重組人 FGFBP3 蛋白
FETUB Protein Mouse 重組小鼠 Fetuin-B / FETUB 蛋白
化工儀器網(wǎng)