小鼠原代毛囊干細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：EL4IL-2細(xì)胞,，淋巴瘤細(xì)胞 人急性早幼粒白血病細(xì)胞,NB4細(xì)胞 人晶體上皮細(xì)胞永生系;SRA01/04(HLE) NCI-H345細(xì)胞,，人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞,Neuro-2a細(xì)胞 CM-H119人腦膜細(xì)胞培養(yǎng)基人腦血管平滑肌細(xì)胞 小鼠原代角膜基質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基 人原代尾椎腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)基

小鼠原代毛囊干細(xì)胞專用培養(yǎng)基

小鼠原代毛囊干細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試,，本產(chǎn)品可保持小鼠原代毛囊干細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含小鼠原代毛囊干細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分,，可直接用于小鼠原代毛囊干細(xì)胞的培養(yǎng),。

 

注意事項(xiàng)

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì),，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可,。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱；

3) 戴上護(hù)目鏡,，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動(dòng)凍存管以提高復(fù)溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中,，混勻后，1000rpm 離心 5min,；

5) 準(zhǔn)備一個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細(xì)胞名稱、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；

6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后,，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中,，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時(shí),，可進(jìn)行傳代,。

2) 在生物安全柜內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基,；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml,，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中，將懸液吸入 15ml 離心管,；

① 準(zhǔn)備一個(gè)無菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶，95%左右細(xì)胞脫,。

6) 1000rpm 離心 5min,；

7) 準(zhǔn)備兩個(gè)新的 T-25 培養(yǎng)瓶，各加入 4ml培養(yǎng)基,。

8) 離心完成后,，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞,，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，每個(gè)培養(yǎng)瓶各 1ml；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶,，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后,，棄上清，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀,，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中,；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫,；

9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存,。

酸脫氫酶α(PDHα)重組蛋白 Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Alpha (PDHa)

F7 Protein Human 重組人 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白

VNN1重組小鼠 VNN1 / Vanin-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

PROCR Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Epcr / PROCR 蛋白

CBFB重組人 CBFB / CBF-beta 蛋白 Protein

大鼠抑制素B(INHB)試劑盒 ,，英文名： INHB ELISA Kit

Mouse immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit 小鼠免疫球蛋白M(IgM)試劑盒

MouseP-SelectinELISAkit 小鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanDiphtheriaaibodyELISAKit人白喉抗體

細(xì)胞Akt/PKB激酶總活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitsmActinin-α大鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α

小鼠β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠骨退化特異標(biāo)志物(CTX-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠核因子κB抑制蛋白α(IKB-α)試劑盒 96T/48T

Rat ovarian cancer marker-CA125 CA125 ELISA Kit 大鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125 試劑盒

humanProstaglandinD2-methoxime,PGD2-MOXELISAKIT 人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-Nogo-Aaibody,NOGO-AAb試劑盒人NOGO-A抗體(Nogo-AAb)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物酸性0酸酶總活性比色法定量試劑盒20次

HumanUlaSensitivegrowthhormone,US-GHELISAKit人超敏生長激素(US-GH)試劑盒規(guī)格：96T/48T

磷酸化磷脂酰肌醇激酶調(diào)節(jié)亞單位gamma抗體

氧化蛋白質(zhì)水解酶

小鼠原代毛囊干細(xì)胞專用培養(yǎng)基VNN1重組小鼠 VNN1 / Vanin-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

酸脫氫酶α(PDHα)重組蛋白 Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Alpha (PDHa)

CBFB重組人 CBFB / CBF-beta 蛋白 Protein

F7 Protein Human 重組人 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白

PROCR Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Epcr / PROCR 蛋白

?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進(jìn)行，使用前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱,。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服、鞋套,，戴口罩,、手套。

?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清,、緩沖液等試劑應(yīng)無菌,、無污染，使用前需進(jìn)行無菌檢測,。不同細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)液成分要求有差異，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應(yīng)控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量,，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測?：定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行支原體,、細(xì)菌,、真菌等污染檢測。