兔原代腸道干細胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產品：EFNB2A Protein Danio rerio (zebrafish) 重組斑馬魚 EFNB2A / Ephrin B2a 蛋白 (His 標簽) U-87 MG(人神經膠質瘤細胞) 人胰腺導管癌細胞;CFPAC-1 倉鼠卵巢細胞;Lec1 高轉移卵巢癌細胞,，HO-8910PM細胞 小鼠原代結腸平滑肌細胞培養(yǎng)基 人原代胰腺星狀細胞培養(yǎng)

兔原代腸道干細胞專用培養(yǎng)基

兔原代腸道干細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經過長期測試,，本產品可保持兔原代腸道干細胞優(yōu)良的生長狀態(tài),。

本產品中已包含兔原代腸道干細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分,，可直接用于兔原代腸道干細胞的培養(yǎng),。

 

注意事項

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質,，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內部,；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可,。

復蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預熱到 37℃；

2) 準備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預熱；

3) 戴上護目鏡,，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復蘇的細胞，盡快轉入 37℃恒溫水浴鍋中

復溫晃動凍存管以提高復溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準備的離心管中,，混勻后，1000rpm 離心 5min,；

5) 準備一個 T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細胞名稱、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；

6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后，轉入 T-25 細胞培養(yǎng)中,，混勻后轉入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。

傳代 （細胞傳代建議一傳二）

1) 當細胞匯合度達到 85%以上時，可進行傳代,。

2) 在生物安全柜內,，打開培養(yǎng)瓶瓶口，收集瓶內的培養(yǎng)基,；

3) 向培養(yǎng)瓶內加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS,；

4) 向瓶內加入消化液 1ml，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起,，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中，將懸液吸入 15ml 離心管,；

① 準備一個無菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基；

② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶，95%左右細胞脫,。

6) 1000rpm 離心 5min,；

7) 準備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶，各加入 4ml培養(yǎng)基,。

8) 離心完成后,，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞,，將重懸后的細胞轉入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶,，每個培養(yǎng)瓶各 1ml；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶,，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。 

凍存 （細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀,，然后轉入 1.8ml 凍存管中,；

8）將凍存管轉入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉入-80℃冰箱中過夜降溫,；

9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉入液氮罐中保存,。

?無菌操作?：細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行,，使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱,。實驗人員需更換工作服,、鞋套，戴口罩,、手套,。

?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產品,。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清,、緩沖液等試劑應無菌,、無污染，使用前需進行無菌檢測,。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異,，應按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應保持良好密封性，定期檢查氣體濃度與流量,，細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內濕度應保持在95%左右。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài),、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。

?定期檢測?：定期對細胞進行支原體、細菌,、真菌等污染檢測,。

Adenylate Kinase 1 (AK-1 0.5mgAdenylate Kinase 1 (AK-1) 腺苷酸激酶-1

FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His & AVI 標簽), Biotinylated

FCGR4重組小鼠 CD16-2 / FCGR4 蛋白 (His & AVI 標簽) Protein

CLEC1A Protein Rat 重組大鼠 CLEC1A / CLEC-1 蛋白

FAM19A2重組人 FAM19A2 蛋白  Protein

大鼠誘導型合酶(NOS2)試劑盒 ，英文名： NOS2 ELISA Kit

Mouse follistatin (FS) ELISA Kit 小鼠卵泡抑素(FS)試劑盒

Mousemaixmetalloproteinase3,MMP-3ELISAkit 小鼠基質金屬蛋白酶3(MMP-3)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforHumanEamoebahistolyticaAigenELISAKit人痢疾內阿米巴抗原

細胞3-0酸甘油脫氫酶(GAPDH)活性酶動力比色法定量試劑盒20次

ELISAKitACV-RAb大鼠活化素A受體抗體

(Fibrinogen)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

人 Foxp3(Foxp3)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

半乳糖凝集素 7 （ Galectin-7 ）   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

胃泌素 (Gasin)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠二0酸腺苷(ADP)ELISA 試劑盒

Rat endostatin (ES) ELISA Kit 大鼠內皮抑素(ES)試劑盒

HumanactivatedcoagulationfactorⅫ,FⅫaELISAKit 人活化Ⅻ(FⅫa)試劑盒 進口分裝

Humanapoptosissignalregulatingkinase1,ASK-1試劑盒人凋亡信號調節(jié)激酶I(ASK-1)試劑盒

植物乙醇酸氧化酶(glycolateoxidase)活性比色法定量試劑盒20次

Humaissueinhibitorsofmetalloproteinase2,，TIMP-2ELISAKit人基質金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)試劑盒

磷酸化調節(jié)元件結合蛋白2抗體

血管動蛋白抗體

兔原代腸道干細胞專用培養(yǎng)基FCGR4重組小鼠 CD16-2 / FCGR4 蛋白 (His & AVI 標簽) Protein

Adenylate Kinase 1 (AK-1 0.5mgAdenylate Kinase 1 (AK-1) 腺苷酸激酶-1

FAM19A2重組人 FAM19A2 蛋白  Protein

FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His & AVI 標簽), Biotinylated

CLEC1A Protein Rat 重組大鼠 CLEC1A / CLEC-1 蛋白