兔原代皮膚成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：EFNA3 Others Human 人 EphrinA3 / EFNA3 人細(xì)胞裂解液 CRT(人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞) FCGR1 Others Mouse 小鼠 CD64 / FCGR1 人細(xì)胞裂解液 人低侵襲性脈絡(luò)膜黑色素素瘤細(xì)胞;OCM-1A 小鼠原代口腔黏膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 大鼠原代脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基

兔原代皮膚成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基

兔原代皮膚成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試,，本產(chǎn)品可保持兔原代皮膚成纖維細(xì)胞胞優(yōu)良的生長狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含兔原代皮膚成纖維細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分,，可直接用于兔原代皮膚成纖維細(xì)胞的培養(yǎng),。

 

注意事項

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì),，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可,。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱；

3) 戴上護(hù)目鏡,，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動凍存管以提高復(fù)溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中,，混勻后，1000rpm 離心 5min,；

5) 準(zhǔn)備一個 T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細(xì)胞名稱、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；

6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中,，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時，可進(jìn)行傳代,。

2) 在生物安全柜內(nèi),，打開培養(yǎng)瓶瓶口，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基,；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS,；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起,，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中，將懸液吸入 15ml 離心管,；

① 準(zhǔn)備一個無菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶，95%左右細(xì)胞脫,。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準(zhǔn)備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基,。

8) 離心完成后，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞,，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶，每個培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶,，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀,，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫,；

9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存,。

?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進(jìn)行,，使用前需對超凈工作臺進(jìn)行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱,。實驗人員需更換工作服,、鞋套，戴口罩,、手套,。

?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品,。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清,、緩沖液等試劑應(yīng)無菌,、無污染，使用前需進(jìn)行無菌檢測,。不同細(xì)胞對培養(yǎng)液成分要求有差異,，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應(yīng)控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性，定期檢查氣體濃度與流量,，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。

?定期檢測?：定期對細(xì)胞進(jìn)行支原體、細(xì)菌,、真菌等污染檢測,。

甲狀旁腺激素(PTH)重組蛋白 Recombinant Parathyroid Hormone (PTH)

EGFL7 Protein Human 重組人 EGFL7 / VE-statin 蛋白

EPHA3重組小鼠 EphA3 蛋白 (aa 569-984) Protein

IL1B Protein Canine 重組狗 IL-1 beta / IL1B 蛋白

CPLX3重組人 CPLX3 / Complexin 3 蛋白 Protein

大鼠載脂蛋白H(APOH)試劑盒 ，英文名： APOH ELISA Kit

Mouse lymphocyte factor ELISA Kit 小鼠淋巴細(xì)胞因子試劑盒

MouseIerleukin5,IL-5ELISAKIT 小鼠白介素-5(IL-5)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforhumanfrizzledhomolog8,FZD8ELISAKit人卷曲蛋白8

細(xì)胞/組織白蛋白載玻片制備試劑盒20次

ELISAKitTIMP-2大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2

小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)試劑盒   96T/48T

小鼠單胺氧化酶A（MAOA）試劑盒   96T/48T

小鼠大內(nèi)皮素(BigET)試劑盒   96T/48T

小鼠催乳素(PRL)試劑盒   96T/48T

小鼠膠原酶I(Collagenase I)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human cailage glycoprotein 39 (HC gp-39) ELISA Kit 人軟骨糖蛋白39(HC gp-39)試劑盒

Humankillercelllectin-likereceptor,KLRELISAKit 人殺傷細(xì)胞凝集素樣受體(KLR)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-cytomegalovirusIgGaibody,ai-CMVIgG試劑盒人抗巨細(xì)胞病毒抗體IgG(ai-CMVIgG)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物基因組DNA化試劑盒(低多糖/酚)50次

Humanα1-Aiypsin,α1-ATELISAKit人α1抗(α1-AT)試劑盒規(guī)格：96T/48T

跨膜蛋白酶絲1抗體

鋅指蛋白293抗體

兔原代皮膚成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基EPHA3重組小鼠 EphA3 蛋白 (aa 569-984) Protein

甲狀旁腺激素(PTH)重組蛋白 Recombinant Parathyroid Hormone (PTH)

CPLX3重組人 CPLX3 / Complexin 3 蛋白 Protein

EGFL7 Protein Human 重組人 EGFL7 / VE-statin 蛋白

IL1B Protein Canine 重組狗 IL-1 beta / IL1B 蛋白