人原代扁桃體動脈內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：DDR2 Others Mouse 小鼠 DDR2 Kinase / CD167b 人細(xì)胞裂解液 人角膜成纖維細(xì)胞 (HcorF) SERPINF1 Others Human 人 SerpinF1 / SERPINF1 / PEDF 人細(xì)胞裂解液 NCI-H596(人肺腺鱗癌細(xì)胞) 小鼠原代腦微血管周細(xì)胞培養(yǎng)基 人原代下腔靜脈外膜成纖維

人原代扁桃體動脈內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基

人原代扁桃體動脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊精心優(yōu)化,，經(jīng)過長期測試,，本產(chǎn)品可保持人原代扁桃體動脈內(nèi)皮細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含人原代扁桃體動脈內(nèi)皮細(xì)胞生長所需的各種成分,，無需添加任何成分，可直接用于人原代扁桃體動脈內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)。

 

注意事項

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì),，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃,；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱,；

3) 戴上護(hù)目鏡,，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞,，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動凍存管以提高復(fù)溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中，混勻后,，1000rpm 離心 5min,；

5) 準(zhǔn)備一個 T-25 培養(yǎng)瓶，寫上細(xì)胞名稱,、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后,，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時,，可進(jìn)行傳代。

2) 在生物安全柜內(nèi),，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS,；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml,，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管,；

① 準(zhǔn)備一個無菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細(xì)胞脫,。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準(zhǔn)備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基,。

8) 離心完成后，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞,，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶，每個培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后,，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中,；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫；

9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。

CD8a分子(CD8a)重組蛋白 Recombinant Cluster Of Differentiation 8a (CD8a)

CSNK1A1 Protein Human 重組人 CSNK1A1 / CKI-alpha / CK1 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

CD80重組小鼠 CD80 / B7-1 / CD28LG 蛋白 Protein

MMP9 Protein Rat 重組大鼠 MMP-9 / CLG4B 蛋白

ORM2重組人 ORM2 蛋白 Protein

大鼠中性鞘0脂酶(NSMASE)試劑盒 ,，英文名： NSMASE ELISA Kit

Mouse soluble cell differeiation aigen 30 ligand (sCD30L) ELISA Kit 小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原30配體(sCD30L)試劑盒

MouseFactor-relatedApoptosis,FASELISAKit 小鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanhypotheticalproteinLOC677340ELISAKit人假定蛋白LOC677340

微型分子直接細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒10次

ELISAKitCF大鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子

小鼠可溶性壞死因子 - 受體 2(mouse sTNF- a R2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 R&D

小鼠血管細(xì)胞粘附分子 -1 (mouse VCAM-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 R&D

小鼠血管內(nèi)皮生長因子 ( mouse VEGF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 Biosource

小鼠血管內(nèi)皮生長因子 A( mouse VEGF-A)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   奧地利 Bender

小鼠Ⅱ(FⅡ)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human coagulation factor XIII (F x) ELISA Kit 人Ⅹ(FⅩ)試劑盒

HumanProteinuria,UPELISAKit 人尿蛋白(UP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Human17-ketosteroids,17-KS試劑盒人17-同類固醇(17-KS)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細(xì)胞線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑盒100次

Mouseapoptosisinducingfactor,AIFELISAKit小鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)試劑盒規(guī)格：96T/48T

基質(zhì)細(xì)胞衍生因子2樣蛋白1抗體

細(xì)胞核因子NFKBp65抗體

人原代扁桃體動脈內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基CD80重組小鼠 CD80 / B7-1 / CD28LG 蛋白 Protein

CD8a分子(CD8a)重組蛋白 Recombinant Cluster Of Differentiation 8a (CD8a)

ORM2重組人 ORM2 蛋白 Protein

CSNK1A1 Protein Human 重組人 CSNK1A1 / CKI-alpha / CK1 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

MMP9 Protein Rat 重組大鼠 MMP-9 / CLG4B 蛋白

?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進(jìn)行,，使用前需對超凈工作臺進(jìn)行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱,。實驗人員需更換工作服,、鞋套，戴口罩,、手套,。

?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品,。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清、緩沖液等試劑應(yīng)無菌,、無污染,，使用前需進(jìn)行無菌檢測。不同細(xì)胞對培養(yǎng)液成分要求有差異,，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應(yīng)控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。

?定期檢測?：定期對細(xì)胞進(jìn)行支原體,、細(xì)菌、真菌等污染檢測,。