大鼠原代鼓膜上皮干細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：DDR2 Others Cynomolgus 食蟹猴 DDR2 Kinase 人細(xì)胞裂解液 A549(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 原代平滑肌細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml 中國(guó)倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1 猴腎細(xì)胞 小鼠原代腦血管成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 大鼠原代頸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基

大鼠原代鼓膜上皮干細(xì)胞專用培養(yǎng)基

鼠原代鼓膜上皮干細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,，經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持大鼠原代鼓膜上皮干細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含大鼠原代鼓膜上皮干細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,，無需添加任何成分，可直接用于大鼠原代鼓膜上皮干細(xì)胞的培養(yǎng),。

 

注意事項(xiàng)

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,，如有接觸，立即用自來水沖洗即可,。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃,；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱,；

3) 戴上護(hù)目鏡，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞,，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動(dòng)凍存管以提高復(fù)溫速率；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中,，混勻后,，1000rpm 離心 5min；

5) 準(zhǔn)備一個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細(xì)胞名稱,、日期，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；

6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中,，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時(shí)，可進(jìn)行傳代,。

2) 在生物安全柜內(nèi),，打開培養(yǎng)瓶瓶口，收集瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基,；

3) 向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤(rùn)到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS,；

4) 向瓶?jī)?nèi)加入消化液 1ml,，浸潤(rùn)底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起,，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準(zhǔn)備一個(gè)無菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細(xì)胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min,；

7) 準(zhǔn)備兩個(gè)新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后,，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，每個(gè)培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后,，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀,，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中,；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫,；

9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存,。

?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進(jìn)行,，使用前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱,。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服,、鞋套,，戴口罩、手套,。

?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購(gòu)買已滅菌產(chǎn)品,。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清、緩沖液等試劑應(yīng)無菌,、無污染,，使用前需進(jìn)行無菌檢測(cè)。不同細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)液成分要求有差異,，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應(yīng)控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)、生長(zhǎng)狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。

?定期檢測(cè)?：定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行支原體,、細(xì)菌、真菌等污染檢測(cè),。

內(nèi)分泌腺來源血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)重組蛋白 Recombinant Endocrine Gland Derived Vascular Endothelial Growth Factor (EG-VEGF)

CSNK1G1 Protein Human 重組人 CSNK1G1 / CKI-gamma 1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

CPA2重組人 Carboxypeptidase A2 / CPA2 蛋白 Protein

NA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (N295S mutation) (高活性)

ERBB4重組人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 蛋白 Protein

大鼠腫瘤蛋白p53(TP53)試劑盒 ,，英文名： TP53 ELISA Kit

Mouse soluble cell differeiation aigen 30 (sCD30) ELISA Kit 小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原30(sCD30)試劑盒

MouseE-SelectinELISAkit 小鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanIg-likeanscriptsReceptor,ILTsRELISAKit樣轉(zhuǎn)錄體受體

微型RNA文庫數(shù)據(jù)庫(在建)會(huì)員制

ELISAKitADAM8大鼠解整合素樣金屬蛋白酶8

小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原86(B7-2/sCD86)試劑盒   96T/48T

小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(sCD40L)試劑盒   96T/48T

小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原30配體(sCD30L)試劑盒   96T/48T

小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原30(sCD30)試劑盒   96T/48T

小鼠受體()ELISA 試劑盒 96T/48T

Human coagulation factor XIII (F XIII) ELISA Kit 人ⅩⅢ(FⅩⅢ)試劑盒

Humananspoerassociatedwithaigenprocessing,TAPELISAKit 人抗原處理相關(guān)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(TAP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Human2,3-dinohromboxaneB2,2,3-dinor-TXB2試劑盒人2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細(xì)胞樣品氧化酶活性測(cè)定試劑盒20次

Mouseapoprotein,apo-A1ELISAKit小鼠載脂蛋白A1(apo-A1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

基底膜相關(guān)軟骨素蛋白多糖抗體

細(xì)胞分裂周期蛋白25C抗體

大鼠原代鼓膜上皮干細(xì)胞專用培養(yǎng)基CPA2重組人 Carboxypeptidase A2 / CPA2 蛋白 Protein

內(nèi)分泌腺來源血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(EG-VEGF)重組蛋白 Recombinant Endocrine Gland Derived Vascular Endothelial Growth Factor (EG-VEGF)

ERBB4重組人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 蛋白 Protein

CSNK1G1 Protein Human 重組人 CSNK1G1 / CKI-gamma 1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

NA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (N295S mutation) (高活性)