人原代肝Kupffer細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：CM-H115人腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基KYSR450細(xì)胞,，人食管癌細(xì)胞 人XG惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞,SF-295細(xì)胞 豬靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞;ZYM-SVEC01 LS 174T細(xì)胞，結(jié)腸腺癌細(xì)胞 鼠黑色素瘤細(xì)胞系,B16-F1細(xì)胞 人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞 小鼠原代食管成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 人原代T淋巴細(xì)胞培養(yǎng)基

商品屬性：

人原代肝Kupffer細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,，本產(chǎn)品可保持人原代肝Kupffer細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含人原代肝Kupffer細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,，無(wú)需添加任何成分,，可直接用于人原代肝Kupffer細(xì)胞的培養(yǎng)。

 

注意事項(xiàng)：

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì),，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸,，立即用自來(lái)水沖洗即可,。

細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管,、移液槍,、1ml槍頭、50ml離心管,、T25培養(yǎng)瓶,、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái),，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min,；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái),；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái),；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中,；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min,；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái),；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻,，并做好標(biāo)記,；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。

公司正在出售的產(chǎn)品：

肌紅蛋白(MYO)天然蛋白 Native Myoglobin (MYO)

IL17F Protein Human 重組人 IL-17F / Interleukin-17F 蛋白

ENPP7重組小鼠 ENPP7 / NPP-7 蛋白 Protein

IL2 Protein Rat 重組大鼠 Interleukin-2 / IL-2 蛋白

CD27重組人 CD27 / TNFRSF7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

人游離蛋白S(FP-S)ELISA 試劑盒

Major histocompatibility complex class II (MHC II /HLA- II) ELISA Kit 人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)試劑盒

Humanfetalsulfoslycoproteinaigen,FSAELISAKit 人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanIerferonα,IFN-α試劑盒人α干擾素(IFN-α)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織結(jié)構(gòu)型神經(jīng)元合成酶(cNOS/NOS1/nNOS)活性比色法定量試劑盒20次

HumanKallikrein11,KLK11ELISAKit人11(KLK11)試劑盒規(guī)格：96T/48T

山羊促生長(zhǎng)激素釋放激素(GHRH)試劑盒   96T/48T

山羊雌三醇(E3)試劑盒   96T/48T

山羊雌二醇(E2)試劑盒   96T/48T

山羊檢測(cè)(e)試劑盒   96T/48T

豚鼠內(nèi)皮素1(ET-1)試劑盒 ,，英文名： ET-1 ELISA Kit

Human low density lipoprotein immune complexes (LDL-IC) ELISA Kit 人低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)試劑盒

MonkeyIerleukin-2receptor,IL-2RELISAkit白介素2受體(IL-2R)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBigET(HumanBigEndothelin)ELISAKit人大內(nèi)皮素

細(xì)菌尿素酶(UREASE)活性定性染色試劑盒20次

rabbitLeukoieneB4,LT-B4ELISAKit兔子白三烯B4(LTB4)試劑盒規(guī)格：96T/48T

等電壓依賴性陰離子通道（內(nèi)參）重組兔單克隆抗體

驅(qū)動(dòng)蛋白家族Member14蛋白抗體

人原代肝Kupffer細(xì)胞專用培養(yǎng)基ENPP7重組小鼠 ENPP7 / NPP-7 蛋白 Protein

肌紅蛋白(MYO)天然蛋白 Native Myoglobin (MYO)

CD27重組人 CD27 / TNFRSF7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

IL17F Protein Human 重組人 IL-17F / Interleukin-17F 蛋白

IL2 Protein Rat 重組大鼠 Interleukin-2 / IL-2 蛋白

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍,。

解凍后,，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布,。

放入37℃,、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液,。

加入PBS緩沖液,，輕輕漂洗細(xì)胞,，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次,。

加入新的培養(yǎng)基,。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代,。

吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗,。

加入消化液,，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘,，觀察細(xì)胞變化,。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化,。

吹打細(xì)胞使其成為懸液,，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清,，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基,。

做好標(biāo)記,，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行凍存,。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清,。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO）,，輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中,，標(biāo)記后放入程序降溫盒,，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過(guò)夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存,。