兔原代肝卵圓細胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：CM-H051人胎盤滋養(yǎng)層細胞培養(yǎng)基人膠質細胞(少突細胞)(HO) (1×106 ) SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人胰腺癌細胞 癌細胞,MDA-MB-157細胞 Ana-1(鼠巨噬細胞) MDBK (NBL-1) 牛腎細胞 CL-0295MV3(人黑色素瘤細胞) 小鼠原代食管上皮細胞培養(yǎng)基 小鼠原代胸腺上皮細胞培養(yǎng)基

兔原代肝卵圓細胞專用培養(yǎng)基

兔原代肝卵圓細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試,，本產(chǎn)品可保持兔原代肝卵圓細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含兔原代肝卵圓細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于兔原代肝卵圓細胞的培養(yǎng),。

 

注意事項

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質,，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內部,；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可,。

復蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預熱到 37℃；

2) 準備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預熱,；

3) 戴上護目鏡，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復蘇的細胞,，盡快轉入 37℃恒溫水浴鍋中

復溫晃動凍存管以提高復溫速率；

4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準備的離心管中,，混勻后,，1000rpm 離心 5min；

5) 準備一個 T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細胞名稱,、日期，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；

6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后,，轉入 T-25 細胞培養(yǎng)中,，混勻后轉入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 （細胞傳代建議一傳二）

1) 當細胞匯合度達到 85%以上時,，可進行傳代,。

2) 在生物安全柜內，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶內的培養(yǎng)基,；

3) 向培養(yǎng)瓶內加入 3ml 無菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS；

4) 向瓶內加入消化液 1ml,，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管,；

① 準備一個無菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細胞脫,。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶，各加入 4ml培養(yǎng)基,。

8) 離心完成后,，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞,，將重懸后的細胞轉入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶,，每個培養(yǎng)瓶各 1ml；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶,，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。 

凍存 （細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后,，棄上清，用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀,，然后轉入 1.8ml 凍存管中,；

8）將凍存管轉入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉入-80℃冰箱中過夜降溫,；

9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉入液氮罐中保存,。

?無菌操作?：細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行,，使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱,。實驗人員需更換工作服,、鞋套，戴口罩,、手套,。

?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品,。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清,、緩沖液等試劑應無菌,、無污染，使用前需進行無菌檢測,。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異,，應按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量，細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內濕度應保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。

?定期檢測?：定期對細胞進行支原體,、細菌、真菌等污染檢測,。

PR (Progestogerone receptor 0.5mgPR (Progestogerone receptor) 孕激素受體(抗原)

INS Protein Human 重組人 Insulin / INS 蛋白

HA重組甲型流感 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

DLL4 Protein Human 重組人 DLL4 蛋白 (Fc 標簽)

ABL1重組人 ABL1 / JTK7 / p150 蛋白 (GST 標簽) Protein

人載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA 試劑盒

Human tumor associated aigen (TAA) ELISA Kit 人腫瘤相關抗原(TAA)試劑盒

HumanCaspase3,Casp-3ELISAKit 人胱天蛋白酶3(Casp-3)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humaninsulin-likegrowthfactors1,IGF-1試劑盒人胰島素樣生長因子1(IGF-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織基質金屬蛋白酶(MMP-9)明膠法比色定量試劑盒20次

HumanLebtospiraIgMELISAKit人鉤端IgM(Lebtospira)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人整合素連接激酶1(ILK-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人細胞色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人細胞色素P450c21A/21-羥化酶(CYP21A)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人末端脫氧核苷酸轉移酶(TdT)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

豚鼠白介素6(IL-6)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat angiotensinogen (aGT) ELISA Kit 大鼠血管緊張素原(aGT)試劑盒

HumanAi-proteinase3aibodyIgG,PR3Ab-IgGELISAKit 人抗蛋白酶3抗體IgG(PR3Ab-IgG)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumancyclophilinA,CyPA試劑盒人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CyPA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織GSK3激酶總活性定量試劑盒(A/B/C)20次

HumanPolyADPribosepolymerase,PARPELISAKit人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

蛋白磷酸酶2C亞型α抗體

嵌合蛋白2/β2-chimaerin抗體

兔原代肝卵圓細胞專用培養(yǎng)基HA重組甲型流感 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

PR (Progestogerone receptor 0.5mgPR (Progestogerone receptor) 孕激素受體(抗原)

ABL1重組人 ABL1 / JTK7 / p150 蛋白 (GST 標簽) Protein

INS Protein Human 重組人 Insulin / INS 蛋白

DLL4 Protein Human 重組人 DLL4 蛋白 (Fc 標簽)