詳細介紹
細胞實驗步驟:
一,、細胞復蘇
1.將10ml移液管、移液槍,、1ml槍頭,、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶,、酒精燈,、廢液缸等物品放入超凈工作臺,紫外燈照射30min后再通風30min,;
2.預熱培養(yǎng)基,;
3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺;
4.將凍存細胞從液氮罐中取出,;
5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化,;
6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺;
7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中,;
8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中,;
9.1000r/min,離心5min,;
10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺,;
11.吸棄上清液;
12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞,,將細胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi),,補加適量培養(yǎng)基,輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻,,并做好標記,;
13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài);
14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 小鼠原代甲狀腺成纖維細胞專用培養(yǎng)基 | 規(guī)格 | 100mL/500mL |
產(chǎn)品分類 | 原代細胞專用培養(yǎng)基 | 貨號 | GOY-XP3215 |
小鼠原代甲狀腺成纖維細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,,本產(chǎn)品可保持小鼠原代甲狀腺成纖維細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含小鼠原代甲狀腺成纖維細胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,,可直接用于小鼠原代甲狀腺成纖維細胞的培養(yǎng)。
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代成纖維細胞基礎培養(yǎng)基 | 500ml | 1× | 4℃,、避光 |
原代成纖維細胞培養(yǎng)添加劑 | 5ml | 100× | -20℃,、避光 |
胎牛血清(FBS) | 50ml | 終濃度10% | -20℃、避光 |
注意事項:
僅限科研用,。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì),,請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部;這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,,如有接觸,,立即用自來水沖洗即可。
細胞培養(yǎng)步驟:
?細胞復蘇?:
從液氮罐中取出凍存細胞,,迅速放入37℃水浴中解凍,。
解凍后,將細胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中,,輕輕搖動使細胞均勻分布,。
放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。
?細胞換液?:
吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液,。
加入PBS緩沖液,輕輕漂洗細胞,,以去除懸浮在細胞表面的碎片,,重復幾次。
加入新的培養(yǎng)基,。
?細胞傳代?:
當細胞長到80%~90%時,,進行傳代。
吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,,加入PBS緩沖液漂洗,。
加入消化液,輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面,。
將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘,,觀察細胞變化。當細胞間隙增大后,,加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化,。
吹打細胞使其成為懸液,轉(zhuǎn)移到離心管中離心。
棄上清,,加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞,。
按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中,補加新鮮培養(yǎng)基,。
做好標記,,放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。
?細胞凍存?:
選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存,。
將細胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心,棄上清,。
加入適量的凍存液(如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO),,輕輕吹打重懸細胞。
將細胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中,,標記后放入程序降溫盒,,再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
凋亡相關因子配體(FASL)重組蛋白 Recombinant Factor Related Apoptosis Ligand (FASL)
AK4 Protein Human 重組人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白 (His & GST 標簽)
CD24重組小鼠 CD24 / Ly-52 / CD24A 蛋白 Protein
IGFBP3 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP3 蛋白 (His 標簽)
NAPG重組人 NAPG / Gamma SNAP 蛋白 (His 標簽) Protein
兔子血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA 試劑盒
Rat angiopoietin receptor Tie2 (ANG-R-Tie2) ELISA Kit 大鼠血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)試劑盒
Humanai-ribosomalPproteinaibody,ARPA/Rib-PELISAKit 人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)試劑盒 進口分裝
HumanD-Dimer,D2D試劑盒人D二聚體(D2D)試劑盒
組織IRAK1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
Humanplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit人纖溶酶抗纖溶酶復合物(PAP)試劑盒
中文名稱 方法 規(guī)格
大鼠粒細胞明膠酶相關脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)ELISAKit ELISA.
大鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISAKit ELISA.
大鼠雌激素受體(ER)ELISAKit ELISA.
豬白介素1α(IL-1α)ELISA 試劑盒
Human ai Q thermal aibody (ai-Q-Ab) ELISA Kit 人抗Q熱抗體(ai-Q-Ab)試劑盒
PorcineIerleukin1,IL-1ELISAKit 豬白介素1(IL-1)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAKA(HumanAi-keratinaibody)ELISAKit人抗角蛋白抗體
血液尿酸含量酶偶聯(lián)比色法定量試劑盒20次
MouseUlasensitivityi-iodothyronine,u-T3ELISAKit小鼠高敏三甲狀腺原(u-T3)試劑盒
PE-Cy7標記人CD33單克隆抗體
快速蛋白A抗體
小鼠原代甲狀腺成纖維細胞專用培養(yǎng)基CD24重組小鼠 CD24 / Ly-52 / CD24A 蛋白 Protein
凋亡相關因子配體(FASL)重組蛋白 Recombinant Factor Related Apoptosis Ligand (FASL)
NAPG重組人 NAPG / Gamma SNAP 蛋白 (His 標簽) Protein
AK4 Protein Human 重組人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白 (His & GST 標簽)
IGFBP3 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP3 蛋白 (His 標簽)