詳細介紹
兔原代睪丸間質細胞專用培養(yǎng)基
產品分類 | 原代細胞專用培養(yǎng)基 |
規(guī)格 | 100mL/500mL |
貨號 | GOY-XP3210 |
兔原代睪丸間質細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,,經過長期測試,本產品可保持兔原代睪丸間質細胞優(yōu)良的生長狀態(tài),。
本產品中已包含兔原代睪丸間質細胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,可直接用于兔原代睪丸間質細胞的培養(yǎng),。
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代間質細胞基礎培養(yǎng)基 | 500ml | 1× | 4℃,、避光 |
原代間質細胞培養(yǎng)添加劑 | 5ml | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 50ml | 終濃度10% | -20℃,、避光 |
注意事項
僅限科研用,。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質,請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內部,;這部分有害物質的濃度和危害性都較低,,如有接觸,立即用自來水沖洗即可,。
儀器 | 試劑 | 耗材 |
離心機 | 胎牛血清(FBS) | 離心管(15ml,、50ml) |
生物安全柜 | 無菌 1×PBS pH=7.2 | T-25 細胞培養(yǎng)瓶 |
電動移液器 | 0.25%+0.02%EDTA | 一次性無菌移液管(2ml、5ml,、10ml) |
CO2 培養(yǎng)箱 | 培養(yǎng)基(含血清) | 1.8mL 凍存管 |
倒置顯微鏡 | 凍存液:90%FBS+10%DMSO | 程序降溫盒 |
復蘇
1) 將恒溫水浴鍋中的水預熱到 37℃,;
2) 準備一支 15ml 離心管,加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,,放入 37℃水浴鍋中預熱,;
3) 戴上護目鏡,,厚毛線手套后,從液氮罐中取出要復蘇的細胞,,盡快轉入 37℃恒溫水浴鍋中
復溫晃動凍存管以提高復溫速率,;
4) 將融化了的凍存管中的細胞吸入事先準備的離心管中,混勻后,,1000rpm 離心 5min,;
5) 準備一個 T-25 培養(yǎng)瓶,寫上細胞名稱,、日期,,再加入 4ml 培養(yǎng)基;
6) 離心完成后棄去上清,,用 1ml 培養(yǎng)基重懸細胞后,,轉入 T-25 細胞培養(yǎng)中,混勻后轉入
CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。
傳代 (細胞傳代建議一傳二)
1) 當細胞匯合度達到 85%以上時,,可進行傳代。
2) 在生物安全柜內,,打開培養(yǎng)瓶瓶口,收集瓶內的培養(yǎng)基,;
3) 向培養(yǎng)瓶內加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,,水平放置培養(yǎng)瓶,使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,,吸棄 PBS,;
4) 向瓶內加入消化液 1ml,浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,;
5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細胞是否變圓飄起,,若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,將懸液吸入 15ml 離心管,;
① 準備一個無菌的 15ml 離心管,,加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基;
② 將消化下來的細胞吸入①中的離心管內中和(避免吹打③),;向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,,輕拍培養(yǎng)瓶,95%左右細胞脫,。
6) 1000rpm 離心 5min,;
7) 準備兩個新的 T-25 培養(yǎng)瓶,各加入 4ml培養(yǎng)基,。
8) 離心完成后,,棄上清,,用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細胞,將重懸后的細胞轉入 2 個 T-25 培養(yǎng)瓶,,每個培養(yǎng)瓶各 1ml,;
9) 水平放置培養(yǎng)瓶,震蕩混勻后,,將培養(yǎng)瓶置于 37℃,,5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
凍存 (細胞凍存建議每瓶 T25 凍一支)
1)~6)參照傳代步驟
7)離心完成后,,棄上清,,用 1mL 凍存液重懸細胞沉淀,然后轉入 1.8ml 凍存管中,;
8)將凍存管轉入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,,之后轉入-80℃冰箱中過夜降溫;
9)第二天,,取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,,盡快轉入液氮罐中保存。
PS-1(NT 0.5mgPS-1(NT),,Presennillin-1(S182) 早老素蛋白-1(抗原)
AKR1C4 Protein Human 重組人 AKR1C4 蛋白 (His 標簽)
NA重組甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 神經酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) (His 標簽) Protein
EPCAM Protein Human 重組人 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白
IL18RAP重組人 IL18RAP / IL1R7 蛋白 (His 標簽) Protein
兔子脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA 試劑盒
Rat angiogenin (ANG) ELISA Kit 大鼠血管生長素(ANG)試劑盒
Humanadrenalcoexaibody,ACAELISAKit 人腎上腺皮質抗體(ACA)試劑盒 進口分裝
HumancytokeratinHighMolecularWeight,CK-HMW試劑盒人高分子量細胞角蛋白(CK-HMW)試劑盒
組織HSV1(HERPESSIMPLX1)病毒定性試劑盒20次
Humanplateletbasicprotein,PBPELISAKit人血小板堿性蛋白(PBP/CXCL7)試劑盒
中文名稱 方法 規(guī)格
人可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISAKit ELISA.
人基質金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISAKit ELISA.
人D(VD)ELISAKit ELISA.
豬白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒
Human ai IgA aibody (ai-IgA-Ab) ELISA Kit 人抗IgA抗體(ai-IgA-Ab)試劑盒
Porcineplasminogenactivatorinhibitor1,PAI-1ELISAKit 豬纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforALCAM(HumanActivatedLeukocyteCellAdhesionMolecule)ELISAKit人白細胞活化黏附因子
血液逆轉錄酶(REVERSEANSCREPTASE)活性熒光定量試劑盒20次
MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor,VEGFR-3/Flt-4ELISAKit小鼠血管內皮細胞生長因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)試劑盒
NT5C3蛋白抗體
卷曲螺旋結構域蛋白23抗體
兔原代睪丸間質細胞專用培養(yǎng)基NA重組甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 神經酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) (His 標簽) Protein
PS-1(NT 0.5mgPS-1(NT),,Presennillin-1(S182) 早老素蛋白-1(抗原)
IL18RAP重組人 IL18RAP / IL1R7 蛋白 (His 標簽) Protein
AKR1C4 Protein Human 重組人 AKR1C4 蛋白 (His 標簽)
EPCAM Protein Human 重組人 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白
?無菌操作?:細胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進行,使用前需對超凈工作臺進行紫外線照射滅菌,,定期清潔培養(yǎng)箱,。實驗人員需更換工作服、鞋套,,戴口罩,、手套。
?器材滅菌?:玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,,塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產品。
?試劑選擇?:所用培養(yǎng)液,、血清,、緩沖液等試劑應無菌、無污染,,使用前需進行無菌檢測,。不同細胞對培養(yǎng)液成分要求有差異,應按細胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。
?培養(yǎng)條件?:多數哺乳動物細胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,,偏差應控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應保持良好密封性,,定期檢查氣體濃度與流量,,細胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內濕度應保持在95%左右。
?日常觀察?:每天在顯微鏡下觀察細胞形態(tài),、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。
?定期檢測?:定期對細胞進行支原體、細菌,、真菌等污染檢測,。