詳細介紹
細胞實驗步驟:
一,、細胞復蘇
1.將10ml移液管,、移液槍,、1ml槍頭、50ml離心管,、T25培養(yǎng)瓶,、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺,,紫外燈照射30min后再通風30min,;
2.預熱培養(yǎng)基;
3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺,;
4.將凍存細胞從液氮罐中取出,;
5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化,;
6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺;
7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中,;
8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中,;
9.1000r/min,離心5min;
10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺,;
11.吸棄上清液,;
12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞,將細胞懸液轉移到培養(yǎng)瓶內,,補加適量培養(yǎng)基,,輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻,并做好標記,;
13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài),;
14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
商品屬性:
產品名稱 | 人原代踝或膝滑成纖維細胞專用培養(yǎng)基 | 規(guī)格 | 100mL/500mL |
產品分類 | 原代細胞專用培養(yǎng)基 | 貨號 | GOY-XP3203 |
人原代踝或膝滑成纖維細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,,經過長期測試,,本產品可保持人原代踝或膝滑成纖維細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。
本產品中已包含人原代踝或膝滑成纖維細胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,,可直接用人原代踝或膝滑成纖維細胞的培養(yǎng)。
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代成纖維細胞基礎培養(yǎng)基 | 500ml | 1× | 4℃,、避光 |
原代成纖維細胞培養(yǎng)添加劑 | 5ml | 100× | -20℃,、避光 |
胎牛血清(FBS) | 50ml | 終濃度10% | -20℃、避光 |
注意事項:
僅限科研用,。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質,請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內部,;這部分有害物質的濃度和危害性都較低,,如有接觸,立即用自來水沖洗即可,。
細胞培養(yǎng)步驟:
?細胞復蘇?:
從液氮罐中取出凍存細胞,,迅速放入37℃水浴中解凍。
解凍后,,將細胞轉移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中,,輕輕搖動使細胞均勻分布。
放入37℃,、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。
?細胞換液?:
吸除或倒掉培養(yǎng)皿內的舊培養(yǎng)液。
加入PBS緩沖液,,輕輕漂洗細胞,,以去除懸浮在細胞表面的碎片,,重復幾次。
加入新的培養(yǎng)基,。
?細胞傳代?:
當細胞長到80%~90%時,,進行傳代。
吸除或倒掉瓶內舊培養(yǎng)液,,加入PBS緩沖液漂洗,。
加入消化液,輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面,。
將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘,,觀察細胞變化。當細胞間隙增大后,,加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化,。
吹打細胞使其成為懸液,轉移到離心管中離心,。
棄上清,,加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。
按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中,,補加新鮮培養(yǎng)基,。
做好標記,放入37℃,、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。
?細胞凍存?:
選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。
將細胞轉移到離心管中離心,,棄上清,。
加入適量的凍存液(如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO),輕輕吹打重懸細胞,。
將細胞轉移到冷凍保存管中,,標記后放入程序降溫盒,再放入-80℃冰箱凍存,。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存,。
公司正在出售的產品:
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