大鼠原代子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：CCL14 Protein Human 重組人 CCL14 / HCC-1 / HCC-3 蛋白 (aa 28-93, His 標(biāo)簽) 雙位點(diǎn)HC-kit受體細(xì)胞株;DMF7 SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T HeLa 229人細(xì)胞 HeLa 229 human cervical cancer cells RPMI-1640(GIBC

大鼠原代子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基

大鼠原代子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,，經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,，本產(chǎn)品可保持大鼠原代子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞 優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含大鼠原代 子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,，無需添加任何成分,，可直接用于 大鼠原代子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞的培養(yǎng),。

注意事項(xiàng)

僅限科研用,。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì),，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,，如有接觸,，立即用自來水沖洗即可。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃,；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱,；

3) 戴上護(hù)目鏡,，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞,，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動(dòng)凍存管以提高復(fù)溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中,，混勻后，1000rpm 離心 5min,；

5) 準(zhǔn)備一個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細(xì)胞名稱、日期,，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；

6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后,，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中,，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時(shí),，可進(jìn)行傳代,。

2) 在生物安全柜內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶口,，收集瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基,；

3) 向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶,，使PBS 能夠浸潤(rùn)到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS,；

4) 向瓶?jī)?nèi)加入消化液 1ml,，浸潤(rùn)底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起,，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準(zhǔn)備一個(gè)無菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶,，95%左右細(xì)胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min,；

7) 準(zhǔn)備兩個(gè)新的 T-25 培養(yǎng)瓶,，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后,，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，每個(gè)培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶,，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃,，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清,，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀,，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫,；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存,。

?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進(jìn)行，使用前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱,。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服、鞋套,，戴口罩,、手套。

?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購(gòu)買已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清,、緩沖液等試劑應(yīng)無菌、無污染,，使用前需進(jìn)行無菌檢測(cè),。不同細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)液成分要求有差異，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液,。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應(yīng)控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,，定期檢查氣體濃度與流量,，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右,。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),、生長(zhǎng)狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測(cè)?：定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行支原體,、細(xì)菌,、真菌等污染檢測(cè),。

D受體(VDR)重組蛋白 Recombinant Vitamin D Receptor (VDR)

ACVR1B Protein Human 重組人 ALK4 / ACVR1B 蛋白 (His 標(biāo)簽)

PDCD1重組人 PD1 / PDCD1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/chicken/Egypt/2253-1/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

NRG3重組人 NRG-3 / Neuregulin-3 蛋白  Protein

小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA 試劑盒

Rat aquaporin 4 (AQP-4) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白4(AQP-4)試劑盒

Humanplacealprotein,PPELISAKit 人胎盤蛋白(PP)試劑盒 進(jìn)口分裝

HumancicaicialPemphigoid,CP試劑盒人瘢痕性天皰瘡抗體(CP)試劑盒

組(leucine)含量比色法定量試劑盒20次

humanS100calciumbindingproteinA9/calgranulinB,S100A9ELISAKit人S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)試劑盒

脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白   英文名稱：   fatty acid-binding protein   規(guī)格：      英文縮寫：   FABP4

凋亡相關(guān)因子Fas/Apo-1   英文名稱：   apoptosis-inducing factor Fas/Apo-1   規(guī)格：      英文縮寫：   Fas/Apo-1

凋亡相關(guān)因子配體   英文名稱：   apoptosis-inducing factor ligand   規(guī)格：      英文縮寫：   Fas-L

凋亡相關(guān)因子配體   英文名稱：   apoptosis-inducing factor ligand   規(guī)格：      英文縮寫：   Fas-L

植物A(VA)ELISA 試劑盒

Human ai nuclear aibody (ANA) ELISA Kit 人抗核抗體(ANA)試劑盒

Porcineplateletactivatingfactor,PAFELISAKit 豬血小板活化因子(PAF)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforaFGF-1(Humanacidicfibroblastgrowthfactor1)ELISAKit人酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子1

血液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶1(ACE1)活性熒光共振能量轉(zhuǎn)移法(FRET)定量試劑盒20次

MouseterminalcomplemecomplexC5b-9,TCCC5b-9ELISAKit小鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCCC5b-9)試劑盒

FITC標(biāo)記人CD64單克隆抗體

黑色素聚集激素/黑色素富集激素MCH抗體

大鼠原代子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基PDCD1重組人 PD1 / PDCD1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

D受體(VDR)重組蛋白 Recombinant Vitamin D Receptor (VDR)

NRG3重組人 NRG-3 / Neuregulin-3 蛋白  Protein

ACVR1B Protein Human 重組人 ALK4 / ACVR1B 蛋白 (His 標(biāo)簽)

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/chicken/Egypt/2253-1/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)