詳細介紹
正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 |
| 規(guī)格 | 100管/96樣 |
檢測方法 | 微量法 | 貨號 | GOY-SH104 |
產(chǎn)品分類 | 輔酶Ⅱ系列 | 用途 | 僅供科研實驗 |
測定意義:
磷酸戊糖途徑途徑中 6-磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH)和 6PGDH 依次催化 NADPH 合成,與 能量的平衡、生長速率和細胞活力等密切相關(guān)。此外,6PGDH 逆境生理中具有重要作用。
測定原理:
6PGDH 催化 6-磷酸葡萄糖酸和 NADP +生成 NADPH,,NADPH 在 340 nm 有特征吸收峰,而 NADP +沒有,;通過測定 340nm 吸光度增加速率,,計算 6PGDH 活性。
自備儀器和用品:
低溫離心機,、水浴鍋,、可調(diào)式移液槍、酶標(biāo)儀,、96 孔板和蒸餾水,。
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存,。
試劑一:液體 19mL×1 瓶,,4℃保存。
試劑二:粉劑×1 瓶,,-20℃避光保存,。
試劑三:粉劑×1 瓶,-20℃保存,。
組織樣本的前處理:
1,、細菌、細胞或組織樣品的制備: 細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),,離心后棄上清,;按照細菌或細胞數(shù)量 (10 4個):提取液體積(mL)為 1000~5000:1 的比例(建議 2000 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,,功率 20%或 200W,,超聲 3s,間隔 10s,,重復(fù) 30 次),;8000g 4℃離心 10min,取上清,,置冰上待測,。 組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織, 加入 1mL 提取液),,進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,,取上清,,置冰上待測,。
2、血清(漿)樣品:直接檢測,。
測定步驟:
1. 酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min,,調(diào)節(jié)波長到 340 nm。
2 將試劑二和試劑三轉(zhuǎn)移至試劑一中充分溶解,;在 37℃(哺乳動物)或 25℃(其它物種)水浴 10min 以上,;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融,。
3. 取 96 孔板,,依次加入 10μL 樣本 190μL 試劑一,于 340nm 處測定 3min 內(nèi)吸光值變化,,
第 10 s 吸光值記為 A1,,第 190s 吸光值記為 A2?!?/span>A=A2-A1
注意:空白管只需要做一次,。 計算公式:
使用 96 孔板測定的計算公式如下
1、血清(漿)6PGDH 活力的計算:
單位的定義:每 mL 血清(漿)每分鐘生成 1 nmol 的 NADPH 定義為一個酶活力單位,。
6PGDH(nmol/min/mL)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷V 樣÷T=2143.6×ΔA
2,、組織、細菌或細胞中 6PGDH 活力的計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算:
單位的定義:每 mg 組織蛋白每分鐘生成 1 nmol NADPH 定義為一個酶活力單位,。
6PGDH(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T=2143.6×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算:
單位的定義:每 g 組織每分鐘生成 1 nmol NADPH 定義為一個酶活力單位,。
6PGDH(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W× V 樣÷V 樣總) ÷T=2143.6×ΔA÷W
(3)按細菌或細胞密度計算:
單位的定義:每 1 萬個細菌或細胞每分鐘生成 1 nmol NADPH 定義為一個酶活力單位。
6PGDH(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V 樣÷V 樣總) ÷T=1.072×ΔAV 反總:反應(yīng)體系總體積,,1×10
-3 L,;ε:NADPH 摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm,;d:
96 孔板光徑,,0.5cm;V 樣:加入樣本體積,,0.05 mL,;V 樣總:加入提取液體積,1 mL,;T:反應(yīng)時間,,3 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,,mg/mL,;W:樣本質(zhì)量,g,;2000:細菌或細胞總數(shù),,2000 萬,。
生化檢測試劑盒實驗操作說明:
一、抗氧化系列生化檢測試劑盒
包括氧化酶(XO)活性分析,、超氧陰離子清除能力分析,、葡萄糖氧化酶活性(GOD)檢測、總抗氧化能力(TAC)檢測,、植物原花青素(OPC)含量檢測,、植物類黃酮含量檢測、植物總酚(TP)含量檢測試劑盒,。
氧化酶(XO)活性分析試劑盒為例,,提供了一種簡單易用的比色分析法,用于測定各種樣品中的XO活性,,特點是測定血清,,血漿,組織/細胞裂解物和其他生物體液中的氧化酶活性,,以及廣泛的檢測范圍:15.6 -500 mU/mL,。
二、氧化系列生化檢測試劑盒
包括過氧化氫酶 (CAT) 活性分析,、過氧化氫(H2O2)檢測,、脂質(zhì)過氧化(丙二醛) 分析、蛋白質(zhì)羰基含量檢測,、超氧陰離子含量檢測等試劑盒,。
蛋白質(zhì)羰基含量檢測試劑盒(比色法)為例,提供了一種簡單易用的比色法,,用于分析不同生物樣品(細胞/組織裂解液,,生物液體)中蛋白質(zhì)羰基含量。在370 nm處有特征吸收峰,。
特點是:1.測定組織樣本,、細胞、細菌,、血清等中的蛋白質(zhì)羰基含量,。2.樣本處理、實驗步驟以及結(jié)果計算更加詳盡準(zhǔn)確精煉,。3.保質(zhì)期長,。
三、抗逆系列生化檢測試劑盒
包括超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測,、羥自由基清除能力分析,、多酚氧化酶(PPO)活性檢測、過氧化物酶(POD)活性檢測等試劑盒。
超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測試劑盒為例,,提供一種簡單易用的比色測定法,,用于定量測定血清,,血漿,,組織/細胞裂解液和其它生物體液中的SOD酶活性。
特點是:1.測定血清,,血漿,,組織/細胞裂解物和其他生物體液中的SOD酶活性。2.通過WST-8法測定SOD活性,,zui大抑制率可接近100%,,不受一些常見干擾因素的干擾。3.廣泛的檢測范圍:3.13- 200U/mL,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
乙醛脫氫酶(ALDH)測試盒 | 半纖維素含量測試盒 |
β葡萄糖苷酶(βGC)/纖維二糖酶測試盒 | 胞漿異檸檬酸脫氫酶(ICDHc)測試盒 |
半胱氨酰亞砜裂解酶(CSL)測試盒 | 苯胺4羥化酶(AH)測試盒 |
半乳糖醛酸含量測試盒 | 吡咯啉5羧酸合成酶(P5CS)測試盒 |
β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)測試盒 | 丙二醛(MDA)測試盒 |
γ氨基丁酸(GABA)測試盒 | 抗鏈激檢測試劑盒 SK ELISA Kit |
γ谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γGT)測定測試盒 | 人apelin 12ELISA試劑盒 |
γ谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γGT)測試盒 | 人apelin 13ELISA試劑盒 |
β葡萄糖苷酶(βGC)/纖維二糖酶測試盒 | 人apelin 36ELISA試劑盒 |
β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)測試盒 | 人ATPELISA試劑盒 |
γ氨基丁酸(GABA)測試盒 | 人Bcl-2相關(guān)X蛋白ELISA試劑盒 |
γ谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γGT)測定測試盒 | 人BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白ELISA試劑盒 |
γ谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γGT)測試盒 | 6磷酸葡萄糖酸脫氫酶(6PGDH)測試盒微量法人B類清道夫受體1ELISA試劑盒 |
氨基酸(AA)含量測試盒 | 人B-淋巴細胞趨化因子1ELISA試劑盒 |
白蛋白含量測試盒 | 人B細胞活化因子ELISA試劑盒 |