SK-MEL-5 細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：L929細(xì)胞，小鼠肺成纖維細(xì)胞 SGC7901(胃腺癌細(xì)胞) 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞;C6 hFOB 1.19(SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞) SMMC-7721細(xì)胞,，肝癌細(xì)胞 人羊膜細(xì)胞系,Wish細(xì)胞 倉(cāng)鼠/小鼠雜交瘤細(xì)胞;145-2C11 人胚胎肺成纖維細(xì)胞 兔原代心房心肌細(xì)胞培養(yǎng)基 大鼠原代口腔黏膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基

?無(wú)菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行,，使用前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行紫外線照射滅菌,，定期清潔培養(yǎng)箱,。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服,、鞋套,，戴口罩,、手套。

?器材滅菌?：玻璃器皿,、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購(gòu)買已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液,、血清,、緩沖液等試劑應(yīng)無(wú)菌、無(wú)污染,，使用前需進(jìn)行無(wú)菌檢測(cè),。不同細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)液成分要求有差異，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,，偏差應(yīng)控制在±0.5℃,。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性，定期檢查氣體濃度與流量,，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定,。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),、生長(zhǎng)狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化,。

?定期檢測(cè)?：定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行支原體、細(xì)菌,、真菌等污染檢測(cè),。

SK-MEL-5 細(xì)胞專用培養(yǎng)基

產(chǎn)品介紹

SK-MEL-5細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,，本產(chǎn)品可保持SK-MEL-5細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài),。

本產(chǎn)品中已包含SK-MEL-5細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分,，可直接用于SK-MEL-5細(xì)胞的培養(yǎng),。

產(chǎn)品主要成分

MEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基                                   445 mL

特級(jí)胎牛血清                                    50 mL

 運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃，避光,，保存2個(gè)月,；?

注意僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì),，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部,；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸,，立即用自來(lái)水沖洗即可,。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管,，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱；

3) 戴上護(hù)目鏡,，厚毛線手套后,，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動(dòng)凍存管以提高復(fù)溫速率,；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中,，混勻后,，1000rpm 離心 5min；

5) 準(zhǔn)備一個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,，寫上細(xì)胞名稱,、日期，再加入 4ml 培養(yǎng)基,；

6) 離心完成后棄去上清,，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中,，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置,。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時(shí)，可進(jìn)行傳代,。

2) 在生物安全柜內(nèi),，打開培養(yǎng)瓶瓶口，收集瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基,；

3) 向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入 3ml 無(wú)菌的 1×PBS 后,，水平放置培養(yǎng)瓶，使PBS 能夠浸潤(rùn)到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,，吸棄 PBS,；

4) 向瓶?jī)?nèi)加入消化液 1ml，浸潤(rùn)底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min,；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起,，若全部消化下來(lái)則直接向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中，將懸液吸入 15ml 離心管,；

① 準(zhǔn)備一個(gè)無(wú)菌的 15ml 離心管,，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基；

② 將消化下來(lái)的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）,；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,，輕拍培養(yǎng)瓶，95%左右細(xì)胞脫,。

6) 1000rpm 離心 5min,；

7) 準(zhǔn)備兩個(gè)新的 T-25 培養(yǎng)瓶，各加入 4ml培養(yǎng)基,。

8) 離心完成后，棄上清,，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞,，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶，每個(gè)培養(yǎng)瓶各 1ml,；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶,，震蕩混勻后,，將培養(yǎng)瓶置于 37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng),。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后,，棄上清，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀,，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中,；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過(guò)夜降溫,；

9）第二天,，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存,。

豚鼠白三烯B4(LTB4)試劑盒 ,，英文名： LTB4 ELISA Kit

Two lymphoid tissue chemokine (SLC/CCL21) ELISA Kit 人二級(jí)淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)試劑盒

rabbitSolubleprotein-100,S-100ELISAKit 兔子S100蛋白(S-100)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBeta-EPR(MouseBeta-Endorphieceptor)ELISAKit小鼠β內(nèi)啡肽受體

細(xì)菌鹽肉湯500毫升

RabbitHeatShockProtein40,HSP-40ELISAKit兔熱休克蛋白40(HSP-40)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人脂蛋白相關(guān)0脂酶A2(Lp-PL-A2)試劑盒

Human tumor markers (CA724) ELISA Kit 人腫瘤標(biāo)志物(CA724)試劑盒

HumanCaspase3,Casp-3ELISAKit 人胱天蛋白酶3(Casp-3)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanImmuneRNA,Irna試劑盒人免疫核糖核酸(Irna)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-1)活性比色法定量試劑盒20次

HumanLeukoieneB4，LT-B4ELISAKit人白三烯B4(LTB4)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人脂蛋白a試劑盒   人脂蛋白a試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人脂蛋白a試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人脂蛋白a試劑盒,、人脂蛋白a 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

人脂阿拉伯甘露聚糖試劑盒   人脂阿拉伯甘露聚糖試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人脂阿拉伯甘露聚糖試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：人脂阿拉伯甘露聚糖試劑盒、人脂阿拉伯甘露聚糖試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

人正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子試劑盒   人正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：人正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子試劑盒,、人正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

人整合素連接激酶1試劑盒   人整合素連接激酶1試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人整合素連接激酶1試劑盒,，規(guī)格型號(hào)：96T/48T,，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人整合素連接激酶1試劑盒,、人整合素連接激酶1 試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月,。

蛋白激酶A錨定蛋白95抗體

嵌合蛋白2/β2-chimaerin抗體

ENPP7重組小鼠 ENPP7 / NPP-7 蛋白 Protein

肌紅蛋白(MYO)天然蛋白 Native Myoglobin (MYO)

CD27重組人 CD27 / TNFRSF7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

IL17F Protein Human 重組人 IL-17F / Interleukin-17F 蛋白

IL2 Protein Rat 重組大鼠 Interleukin-2 / IL-2 蛋白

SK-MEL-5 細(xì)胞專用培養(yǎng)基CK17(Cytokeratin 17 0.5mgCK17(Cytokeratin 17) 細(xì)胞角蛋白17抗原

CDKN2D Protein Human 重組人 CDKN2D / p19ink4d 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

IgG1重組小鼠 IgG1-Fc 蛋白 (102 Cys/Ser) Protein

FGF1 Protein Mouse 重組小鼠 / 大鼠 aFGF / FGF1 蛋白

SERPINB4重組人 SerpinB4 蛋白 Protein