NADP磷酸酶(NADPase)測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品：自養(yǎng)無枝菌PCR檢測(cè)試劑盒中央無漿體PCR檢測(cè)試劑盒邊緣無漿體PCR檢測(cè)試劑盒嗜吞噬細(xì)胞無漿體PCR檢測(cè)試劑盒無漿體通用PCR檢測(cè)試劑盒十二指腸鉤口線蟲PCR檢測(cè)試劑盒異尖線蟲屬PCR檢測(cè)試劑盒變形絲囊霉菌PCR檢測(cè)試劑盒侵入性絲囊霉菌PCR檢測(cè)試劑盒丙蛛網(wǎng)菌PCR檢測(cè)試劑盒馬隱秘桿菌PCR檢測(cè)試劑盒溶血隱秘桿菌PCR檢測(cè)試劑盒

NADP磷酸酶(NADPase)測(cè)試盒微量法

本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn),，不做其他科學(xué)實(shí)驗(yàn)外的使用,！
商品屬性：

測(cè)定意義：

測(cè)定原理：

NADPase 能夠催化 NADP+水解為 NAD+和無機(jī)磷的反應(yīng),，通過測(cè)定無機(jī)磷的量來測(cè)定 NADPase 活性。

所需的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀,、恒溫水浴鍋,、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器,、微量石英比色皿/96 孔板,、研缽、冰和蒸餾水

試劑的組成和配制：

提取液：100mL×1 瓶,，4℃保存,。

試劑一：液體 15 mL×1 瓶， 4℃保存,。

試劑二：粉劑×4 支,，-20℃保存；用時(shí)加入 1 mL 試劑一充分溶解備用,，現(xiàn)配現(xiàn)用,。

試劑三：粉劑×1 瓶, 4℃保存。用時(shí)加入 25mL 蒸餾水,，溶解后 4℃可保存一周,。

試劑四：粉劑×1 瓶, 4℃保存。用時(shí)加入 25mL 蒸餾水,，溶解后 4℃可保存一周,。

試劑五：液體 25mL×1 瓶，室溫保存,。

試劑六：10mmol/L 標(biāo)準(zhǔn)磷貯備液 10mL×1 瓶,，4℃保存。

0.5μmol/mL 標(biāo)準(zhǔn)磷應(yīng)用液配制：將試劑六 20 倍稀釋,，即取 0.5mL 試劑六加 9.5 蒸餾水,，充分混勻。

定磷試劑的配制：按 H2O: 試劑三:試劑四:試劑五=2:1:1:1 的比例配制,，配好的定磷試劑應(yīng)為淺黃色,，若無色則試劑失效，若污染,，定磷劑現(xiàn)用現(xiàn)配,。

注意：配試劑最好用新的燒杯、玻棒和玻璃移液器,，也可以用一次性塑料器皿,，避免磷污染。

樣本的前處理：

按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織,，加入 1mL 提取液）,，進(jìn)行冰浴勻漿。810min,，取上清,，置冰上待測(cè)。

訂購(gòu)流程:

1,、訂購(gòu)前,請(qǐng)與銷售員核對(duì)產(chǎn)品中文名稱/CAS號(hào)/英文名稱等,。

2、我司大部分產(chǎn)品都是現(xiàn)貨,產(chǎn)品核實(shí)好下單后即可當(dāng)天發(fā)貨,。(庫(kù)存信息以當(dāng)日為準(zhǔn))如有特殊要求請(qǐng)?jiān)诎l(fā)貨前與銷售員聯(lián)系,。

3、我司產(chǎn)品支持款到發(fā)貨,、快遞代收尾款,、網(wǎng)上現(xiàn)拍等付款方式。

4,、質(zhì)量保證,嚴(yán)格把關(guān),如有產(chǎn)品異議經(jīng)公司鑒定確認(rèn)后可包換包退,免除客戶后顧之憂,。

5、我司提供完善的售后服務(wù),使用過程中如有任何疑問,可提供技術(shù)指導(dǎo),。

測(cè)定步驟:

1,、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 660nm,，蒸餾水調(diào)零,。

2、酶促反應(yīng)（在 EP 管中加入下列試劑）

37℃（哺乳動(dòng)物）或 25℃（其它物種）準(zhǔn)確反應(yīng) 30min 后,，95℃水浴 5min（蓋緊,，以防止水分散失），冷卻后,，10000g5min,，取上清

3、定磷（在 EP 管或 96 孔板中加入下列試劑）

注意事項(xiàng)：

1,、此法具有微量,、靈敏、快速的特點(diǎn),。所以對(duì)測(cè)定所用試管要求嚴(yán)格,，要沒有一點(diǎn)磷，若試管放過磷酸或磷酸鹽緩沖液,，干凈,，要先用洗潔精加水煮，再用自來水沖,，最后用蒸餾水沖干凈,。最好用一次性塑料管或新玻璃管,，避免磷污染是檢測(cè)成

2、標(biāo)準(zhǔn)管,、空白管和對(duì)照管只要做一次即可,。

NADPase 酶活性計(jì)算：

1、按組織蛋白濃度計(jì)算：

定義：每小時(shí)每毫克組織蛋白 NADPase 分解 NADP 產(chǎn)生 1μmol 無機(jī)磷的量為一個(gè) NADPase 活力單位,。

NADPase (μmol/h/mg prot)=(C 標(biāo)準(zhǔn)管×V 總)×(A 測(cè)定管-A 對(duì)照管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管)÷(V 樣×Cpr)÷T=5×(A 測(cè)定管-A 對(duì)A 空白管)÷Cpr

2,、按樣本鮮重計(jì)算：

定義：每小時(shí)每 g 組織 NADPase 分解 NADP 產(chǎn)生 1μmol 無機(jī)磷的量為一個(gè) NADPase 活力單位。

NADPase (μmol/h /g 鮮重)=(C 標(biāo)準(zhǔn)管×V 總)×(A 測(cè)定管-A 對(duì)照管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管）×V 總÷(W× V 樣÷V 樣總)÷T=5×(A

管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管)÷WC 標(biāo)準(zhǔn)管：標(biāo)準(zhǔn)管濃度,，0.5μmol/mL,；V 總：酶促反應(yīng)總體積，0.2mL,；V 樣：加入樣本體積

V 樣總：加入提取液體積,，1mL；T：反應(yīng)時(shí)間,，0.5 小時(shí),；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度mg/mL；W：樣本鮮重,，g,。

生化試劑盒的使用注意事項(xiàng)：

選擇合適的試劑盒：根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蜋z測(cè)對(duì)象選擇合適的試劑盒，確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性,。

嚴(yán)格遵循說明書：按照試劑盒的說明書進(jìn)行操作,，避免誤用或浪費(fèi)。

注意保存條件：按照試劑盒的保存條件進(jìn)行妥善保存,，避免陽光直射,、高溫或潮濕等不利因素。

控制實(shí)驗(yàn)條件：在實(shí)驗(yàn)過程中嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件,，如溫度,、時(shí)間、pH值等,，以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性,。

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