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β1,3葡聚糖酶(β1,3GA)測試盒微量法

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    上海市

規(guī)格
100管/48樣630元15 盒 可售
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更新時(shí)間:2025-01-03 13:49:54瀏覽次數(shù):478

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100管/48樣
貨號(hào) GOY-SH132 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) 檢測方法 微量法
產(chǎn)品類別 糖代謝系列 品牌 谷研
貨期 現(xiàn)貨    
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詳細(xì)介紹

正式測定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

商品屬性:

產(chǎn)品名稱

β1,3葡聚糖酶(β1,3GA)測試盒微量法

規(guī)格

100管/48樣

檢測方法

微量法

貨號(hào)

GOY-SH132

產(chǎn)品分類

糖代謝系列

用途

僅供科研實(shí)驗(yàn)


β1,3葡聚糖酶(β1,3GA)測試盒微量法

測定意義:

β-1,3-GA( EC 3.2.1.73)主要存在植物中,,催化β-1,3-葡萄糖苷鍵水解。在植物染病或處于其他逆境條件下,,可誘導(dǎo)細(xì)胞大量合成β-1,3-GA,,因此β-1,3-GA活性測定廣泛應(yīng)用于植物病理和逆境生理研究。
測定原理:
β-1,3-GA水解昆布多糖,,內(nèi)切β-1,3-葡萄糖苷鍵,,產(chǎn)生還原末端,通過測定還原糖生成速率來計(jì)算其酶活性,。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀,、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋,、移液器,、微量石英比色皿/96孔板、研缽,、冰和蒸餾水,。

試劑的組成和配制:

提取液一:液體 25mL×1 瓶,4℃保存,。

提取液二:液體 25mL×1 瓶,,4℃保存,。

試劑一:粉劑×1 瓶,-20℃保存,;

試劑二:液體 25mL×1 瓶,,4℃保存;

試劑三:液體 14μL×1 支,,4℃保存,;

組織樣本的前處理:

①總 GAPDH 酶提取:建議稱取約 0.1g 樣本,,加入 1mL 提取液一,,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,,破碎 3s,,間歇 7s,總時(shí)間 1min),,然后 4℃,,8000g 離心 10min,取上清測定,。

②胞漿和葉綠體 GAPDH 酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10的比例(建議稱取約 0.1g 樣本,,加入 1mL 提取液一),冰浴勻漿后于 4℃,,200g 離心 5min,,棄沉淀,取上清在4℃,,8000g 離心 10min,,取上清用于測定胞漿 GAPDH 酶活性,取沉淀加 1mL 提取液二,,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,,200W,破碎 3s,,間歇 7s,,總時(shí)間 1min),然后 4℃,,8000g 離心 10min,,取上清測定葉綠體中 GAPDH 酶活性。

建議測定總 GAPDH 酶活性,,按照步驟①提取粗酶液,,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的GAPDH,則按照步驟②提取粗酶液,。細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞的前處理先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),,離心后棄上清,;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液一體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,,功率 20%或 200W,,超聲 3s,間隔 10s,,重復(fù) 30 次),;8000g 4℃離心10min,取上清,,置冰上待測,。

測定步驟:

1、 分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上,,調(diào)節(jié)波長至 340nm,蒸餾水調(diào)零,。

2,、 樣本測定

(1)工作液的配制:將試劑二全部倒入試劑一瓶中,充分溶解,,37℃(哺乳動(dòng)物)或 25℃(其它物種)預(yù)熱 10 分鐘,;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融,。

(2)在試劑三中加入 500μL 蒸餾水,,充分混勻待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,,禁止反復(fù)凍融,。

(3)在 1mL 石英比色皿中加入 30μL 樣本、20μL 試劑三和 950μL 工作液,,混勻,,加入最后一個(gè)試劑的同時(shí)開始計(jì)時(shí),記錄 340nm 處 20s 時(shí)的吸光值 A1 和 5min20s 后的吸光值

A2,,計(jì)算 ΔA=A1-A2,。

GAPDH 活性計(jì)算

(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算

單位的定義:每 mg 組織蛋白每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個(gè)酶活力單位。GAPDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T=1072×ΔA÷Cpr

(2)按樣本鮮重計(jì)算

單位的定義:每 g 組織每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個(gè)酶活力單位,。GAPDH(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V 樣÷V 樣總) ÷T=1072×ΔA÷W

(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算

單位的定義:每一萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個(gè)酶活力單位,。GAPDH(nmol/min/104cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(500 ×V 樣÷V 樣總) ÷T=2.144×ΔAV 反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3L,;ε:NADH 摩爾消光系數(shù),,6.22×103L / mol /cm;d:比色皿光徑,,1cm,;V 樣:加入樣本體積,,0.03 mL;V 樣總:加入提取液體積,,1 mL,;T:反應(yīng)時(shí)間,5 min,;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,,g,;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),500 萬,。

生化檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)操作說明:

一,、抗氧化系列生化檢測試劑盒

包括氧化酶(XO)活性分析、超氧陰離子清除能力分析,、葡萄糖氧化酶活性(GOD)檢測,、總抗氧化能力(TAC)檢測、植物原花青素(OPC)含量檢測,、植物類黃酮含量檢測,、植物總酚(TP)含量檢測試劑盒。

氧化酶(XO)活性分析試劑盒為例,,提供了一種簡單易用的比色分析法,,用于測定各種樣品中的XO活性,特點(diǎn)是測定血清,,血漿,,組織/細(xì)胞裂解物和其他生物體液中的氧化酶活性,以及廣泛的檢測范圍:15.6 -500 mU/mL,。

二,、氧化系列生化檢測試劑盒

包括過氧化氫酶 (CAT) 活性分析、過氧化氫(H2O2)檢測,、脂質(zhì)過氧化(丙二醛) 分析,、蛋白質(zhì)羰基含量檢測、超氧陰離子含量檢測等試劑盒,。

蛋白質(zhì)羰基含量檢測試劑盒(比色法)為例,,提供了一種簡單易用的比色法,用于分析不同生物樣品(細(xì)胞/組織裂解液,,生物液體)中蛋白質(zhì)羰基含量,。在370 nm處有特征吸收峰。

特點(diǎn)是:1.測定組織樣本,、細(xì)胞,、細(xì)菌,、血清等中的蛋白質(zhì)羰基含量。2.樣本處理,、實(shí)驗(yàn)步驟以及結(jié)果計(jì)算更加詳盡準(zhǔn)確精煉,。3.保質(zhì)期長。


β1,3葡聚糖酶(β1,3GA)測試盒微量法


三,、抗逆系列生化檢測試劑盒

包括超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測,、羥自由基清除能力分析、多酚氧化酶(PPO)活性檢測,、過氧化物酶(POD)活性檢測等試劑盒,。

超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測試劑盒為例,提供一種簡單易用的比色測定法,,用于定量測定血清,,血漿,組織/細(xì)胞裂解液和其它生物體液中的SOD酶活性,。

特點(diǎn)是:1.測定血清,,血漿,組織/細(xì)胞裂解物和其他生物體液中的SOD酶活性,。2.通過WST-8法測定SOD活性,zui大抑制率可接近100%,,不受一些常見干擾因素的干擾,。3.廣泛的檢測范圍:3.13- 200U/mL。

公司正在出售的產(chǎn)品:

中性轉(zhuǎn)化酶(NI)測試盒

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