詳細(xì)介紹
正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 100管/96樣 | |
檢測(cè)方法 | 微量法 | 貨號(hào) | GOY-SH346 |
產(chǎn)品分類 | 土壤系列 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
測(cè)定意義:
硝態(tài)氮是指硝酸鹽中所含有的氮元素,,土壤中的有機(jī)物分解生成銨鹽,被氧化后變?yōu)橄鯌B(tài)氮,。土壤中硝態(tài)氮是高等植物吸收氮的主要形式之一,,其含量直接關(guān)系到作物的產(chǎn)量與品質(zhì)。測(cè)定原理
在濃酸條件下,,NO3-與水楊酸反應(yīng),,生成硝基水楊酸,硝基水楊酸在堿性條件下(PH>12)呈黃色,,在一定范圍內(nèi),,其顏色深淺與含量成正比,,可比色測(cè)定計(jì)算得硝態(tài)氮含量,。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
蒸餾水,、天平、常溫離心機(jī),、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀,、微量石英比色皿/96孔板、振蕩儀,。
試劑的組成和配制:
提取液一:液體 25mL×1 瓶,,4℃保存。
提取液二:液體 25mL×1 瓶,,4℃保存,。
試劑一:粉劑×1 瓶,-20℃保存,;
試劑二:液體 25mL×1 瓶,,4℃保存,;
試劑三:液體 14μL×1 支,4℃保存,;
組織樣本的前處理:
①總 GAPDH 酶提?。航ㄗh稱取約 0.1g 樣本,加入 1mL 提取液一,,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,,200W,破碎 3s,,間歇 7s,,總時(shí)間 1min),然后 4℃,,8000g 離心 10min,,取上清測(cè)定。
②胞漿和葉綠體 GAPDH 酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10的比例(建議稱取約 0.1g 樣本,,加入 1mL 提取液一),,冰浴勻漿后于 4℃,200g 離心 5min,,棄沉淀,,取上清在4℃,8000g 離心 10min,,取上清用于測(cè)定胞漿 GAPDH 酶活性,,取沉淀加 1mL 提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,,200W,,破碎 3s,間歇 7s,,總時(shí)間 1min),,然后 4℃,8000g 離心 10min,,取上清測(cè)定葉綠體中 GAPDH 酶活性,。
建議測(cè)定總 GAPDH 酶活性,按照步驟①提取粗酶液,,若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的GAPDH,,則按照步驟②提取粗酶液。細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞的前處理先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),,離心后棄上清,;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液一體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,,功率 20%或 200W,,超聲 3s,,間隔 10s,重復(fù) 30 次),;8000g 4℃離心10min,,取上清,置冰上待測(cè),。
生化檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)操作說明:
一,、抗氧化系列生化檢測(cè)試劑盒
包括氧化酶(XO)活性分析、超氧陰離子清除能力分析,、葡萄糖氧化酶活性(GOD)檢測(cè)、總抗氧化能力(TAC)檢測(cè),、植物原花青素(OPC)含量檢測(cè),、植物類黃酮含量檢測(cè)、植物總酚(TP)含量檢測(cè)試劑盒,。
氧化酶(XO)活性分析試劑盒為例,,提供了一種簡(jiǎn)單易用的比色分析法,用于測(cè)定各種樣品中的XO活性,,特點(diǎn)是測(cè)定血清,,血漿,組織/細(xì)胞裂解物和其他生物體液中的氧化酶活性,,以及廣泛的檢測(cè)范圍:15.6 -500 mU/mL,。
二、氧化系列生化檢測(cè)試劑盒
包括過氧化氫酶 (CAT) 活性分析,、過氧化氫(H2O2)檢測(cè),、脂質(zhì)過氧化(丙二醛) 分析、蛋白質(zhì)羰基含量檢測(cè),、超氧陰離子含量檢測(cè)等試劑盒,。
蛋白質(zhì)羰基含量檢測(cè)試劑盒(比色法)為例,提供了一種簡(jiǎn)單易用的比色法,,用于分析不同生物樣品(細(xì)胞/組織裂解液,,生物液體)中蛋白質(zhì)羰基含量。在370 nm處有特征吸收峰,。
特點(diǎn)是:1.測(cè)定組織樣本,、細(xì)胞、細(xì)菌,、血清等中的蛋白質(zhì)羰基含量,。2.樣本處理、實(shí)驗(yàn)步驟以及結(jié)果計(jì)算更加詳盡準(zhǔn)確精煉,。3.保質(zhì)期長(zhǎng),。
三,、抗逆系列生化檢測(cè)試劑盒
包括超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測(cè)、羥自由基清除能力分析,、多酚氧化酶(PPO)活性檢測(cè),、過氧化物酶(POD)活性檢測(cè)等試劑盒。
超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測(cè)試劑盒為例,,提供一種簡(jiǎn)單易用的比色測(cè)定法,,用于定量測(cè)定血清,血漿,,組織/細(xì)胞裂解液和其它生物體液中的SOD酶活性,。
特點(diǎn)是:1.測(cè)定血清,血漿,,組織/細(xì)胞裂解物和其他生物體液中的SOD酶活性,。2.通過WST-8法測(cè)定SOD活性,zui大抑制率可接近100%,,不受一些常見干擾因素的干擾,。3.廣泛的檢測(cè)范圍:3.13- 200U/mL。
測(cè)定步驟:
1,、 分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上,,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 340nm,蒸餾水調(diào)零,。
2,、 樣本測(cè)定
(1)工作液的配制:將試劑二全部倒入試劑一瓶中,充分溶解,,37℃(哺乳動(dòng)物)或 25℃(其它物種)預(yù)熱 10 分鐘,;用不完的試劑分裝后-20℃保存,,禁止反復(fù)凍融,。
(2)在試劑三中加入 500μL 蒸餾水,充分混勻待用,;用不完的試劑分裝后-20℃保存,,禁止反復(fù)凍融,。
(3)在 1mL 石英比色皿中加入 30μL 樣本、20μL 試劑三和 950μL 工作液,,混勻,,加入最后一個(gè)試劑的同時(shí)開始計(jì)時(shí),記錄 340nm 處 20s 時(shí)的吸光值 A1 和 5min20s 后的吸光值
A2,,計(jì)算 ΔA=A1-A2,。
GAPDH 活性計(jì)算
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義:每 mg 組織蛋白每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個(gè)酶活力單位。GAPDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T=1072×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義:每 g 組織每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個(gè)酶活力單位,。GAPDH(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V 樣÷V 樣總) ÷T=1072×ΔA÷W
(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算
單位的定義:每一萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個(gè)酶活力單位,。GAPDH(nmol/min/104cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(500 ×V 樣÷V 樣總) ÷T=2.144×ΔAV 反總:反應(yīng)體系總體積,,1×10-3L;ε:NADH 摩爾消光系數(shù),,6.22×103L / mol /cm,;d:比色皿光徑,1cm,;V 樣:加入樣本體積,,0.03 mL;V 樣總:加入提取液體積,,1 mL,;T:反應(yīng)時(shí)間,5 min,;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,,g;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),,500 萬,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
土壤銨態(tài)氮測(cè)試盒微量法 | 硝酸還原酶(NR)測(cè)試盒(NADH速率法) |
纖維素酶(CL)/羧甲基纖維素酶測(cè)試盒 | 血磷濃度測(cè)試盒 |
線粒體異檸檬酸脫氫酶(ICDHm)測(cè)試盒 | 血鎂濃度測(cè)試盒 |
硝酸還原酶(NR)測(cè)試盒 | 血清高密度脂蛋白(HDLC)測(cè)試盒 |
酰基轉(zhuǎn)移酶(AAT)測(cè)試盒 | 血清鐵濃度測(cè)試盒 |
線粒體分離和線粒體酶提取測(cè)試盒 | 大腸菌素檢測(cè)試劑盒 colicin ELISA Kit |
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅱ/琥珀酸輔酶Q還原酶測(cè)試盒 | 抗信號(hào)識(shí)別顆??贵w檢測(cè)試劑盒 SRP ELISA Kit |
線粒體活性氧產(chǎn)生速率(ROS)測(cè)試盒 | 抗信號(hào)識(shí)別顆粒54kDa蛋白檢測(cè)試劑盒 SRP54 ELISA Kit |
纖維素酶(CL)/羧甲基纖維素酶測(cè)試盒 | 抗心肌β1受體檢測(cè)試劑盒 MB1R ELISA Kit |
?;D(zhuǎn)移酶(AAT)測(cè)試盒 | 抗小鼠抗體檢測(cè)試劑盒 HAMA ELISA Kit |
線粒體分離和線粒體酶提取測(cè)試盒 | 抗小腦檢測(cè)試劑盒 CE ELISA Kit |
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅱ/琥珀酸輔酶Q還原酶測(cè)試盒 | 抗線粒體抗體M2亞型檢測(cè)試劑盒 AMA-M2 ELISA Kit |
線粒體活性氧產(chǎn)生速率(ROS)測(cè)試盒 | 土壤硝態(tài)氮測(cè)試盒微量法抗細(xì)胞膜DNA抗體檢測(cè)試劑盒 cmDNA ELISA Kit |
線粒體檸檬酸(MCA)含量測(cè)試盒 | 抗紋狀體檢測(cè)試劑盒 ST ELISA Kit |
線粒體蘋果酸脫氫酶(MDHm)測(cè)試盒 | 抗胃壁細(xì)胞抗體檢測(cè)試劑盒 AGPA/PCA ELISA Kit |