詳細(xì)介紹
正式測定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 100管/96樣 | |
檢測方法 | 微量法 | 貨號(hào) | GOY-SH443 |
產(chǎn)品分類 | 土壤系列 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
測定意義:
速效磷是土壤中可被植物吸收的磷組分,包括全部水溶性磷,、部分吸附態(tài)磷及有機(jī)態(tài)磷,,土壤中速效磷是限制植物生長主要因子之一。
測定原理
用弱堿性提取堿溶性磷和吸附態(tài)磷,,用鉬銻抗比色法測定,。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、常溫離心機(jī),、可見分光光度計(jì),、1 mL玻璃比色皿、震蕩儀,。
試劑的組成和配制:
提取液一:液體 25mL×1 瓶,4℃保存,。
提取液二:液體 25mL×1 瓶,,4℃保存。
試劑一:粉劑×1 瓶,,-20℃保存,;
試劑二:液體 25mL×1 瓶,4℃保存,;
試劑三:液體 14μL×1 支,,4℃保存;
組織樣本的前處理:
①總 GAPDH 酶提?。航ㄗh稱取約 0.1g 樣本,,加入 1mL 提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,,200W,,破碎 3s,間歇 7s,,總時(shí)間 1min),,然后 4℃,8000g 離心 10min,,取上清測定,。
②胞漿和葉綠體 GAPDH 酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10的比例(建議稱取約 0.1g 樣本,加入 1mL 提取液一),,冰浴勻漿后于 4℃,,200g 離心 5min,棄沉淀,,取上清在4℃,,8000g 離心 10min,取上清用于測定胞漿 GAPDH 酶活性,,取沉淀加 1mL 提取液二,,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,,200W,破碎 3s,,間歇 7s,,總時(shí)間 1min),然后 4℃,,8000g 離心 10min,,取上清測定葉綠體中 GAPDH 酶活性。
建議測定總 GAPDH 酶活性,,按照步驟①提取粗酶液,,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的GAPDH,則按照步驟②提取粗酶液,。細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞的前處理先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),,離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液一體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液一),,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,,功率 20%或 200W,超聲 3s,,間隔 10s,,重復(fù) 30 次);8000g 4℃離心10min,,取上清,,置冰上待測。
測定步驟:
1,、 分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上,,調(diào)節(jié)波長至 340nm,蒸餾水調(diào)零,。
2,、 樣本測定
(1)工作液的配制:將試劑二全部倒入試劑一瓶中,充分溶解,,37℃(哺乳動(dòng)物)或 25℃(其它物種)預(yù)熱 10 分鐘,;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融,。
(2)在試劑三中加入 500μL 蒸餾水,,充分混勻待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,,禁止反復(fù)凍融,。
(3)在 1mL 石英比色皿中加入 30μL 樣本、20μL 試劑三和 950μL 工作液,混勻,,加入最后一個(gè)試劑的同時(shí)開始計(jì)時(shí),,記錄 340nm 處 20s 時(shí)的吸光值 A1 和 5min20s 后的吸光值
A2,計(jì)算 ΔA=A1-A2,。
GAPDH 活性計(jì)算
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義:每 mg 組織蛋白每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個(gè)酶活力單位,。GAPDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T=1072×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義:每 g 組織每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個(gè)酶活力單位。GAPDH(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V 樣÷V 樣總) ÷T=1072×ΔA÷W
(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算
單位的定義:每一萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個(gè)酶活力單位,。GAPDH(nmol/min/104cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(500 ×V 樣÷V 樣總) ÷T=2.144×ΔAV 反總:反應(yīng)體系總體積,,1×10-3L;ε:NADH 摩爾消光系數(shù),,6.22×103L / mol /cm,;d:比色皿光徑,1cm,;V 樣:加入樣本體積,,0.03 mL;V 樣總:加入提取液體積,,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,,5 min,;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL,;W:樣本質(zhì)量,,g;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),,500 萬,。
生化檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)操作說明:
一、抗氧化系列生化檢測試劑盒
包括氧化酶(XO)活性分析,、超氧陰離子清除能力分析,、葡萄糖氧化酶活性(GOD)檢測、總抗氧化能力(TAC)檢測,、植物原花青素(OPC)含量檢測,、植物類黃酮含量檢測、植物總酚(TP)含量檢測試劑盒,。
氧化酶(XO)活性分析試劑盒為例,,提供了一種簡單易用的比色分析法,用于測定各種樣品中的XO活性,,特點(diǎn)是測定血清,,血漿,組織/細(xì)胞裂解物和其他生物體液中的氧化酶活性,以及廣泛的檢測范圍:15.6 -500 mU/mL,。
二,、氧化系列生化檢測試劑盒
包括過氧化氫酶 (CAT) 活性分析、過氧化氫(H2O2)檢測,、脂質(zhì)過氧化(丙二醛) 分析,、蛋白質(zhì)羰基含量檢測、超氧陰離子含量檢測等試劑盒,。
蛋白質(zhì)羰基含量檢測試劑盒(比色法)為例,,提供了一種簡單易用的比色法,用于分析不同生物樣品(細(xì)胞/組織裂解液,,生物液體)中蛋白質(zhì)羰基含量,。在370 nm處有特征吸收峰。
特點(diǎn)是:1.測定組織樣本,、細(xì)胞,、細(xì)菌、血清等中的蛋白質(zhì)羰基含量,。2.樣本處理,、實(shí)驗(yàn)步驟以及結(jié)果計(jì)算更加詳盡準(zhǔn)確精煉。3.保質(zhì)期長,。
三、抗逆系列生化檢測試劑盒
包括超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測,、羥自由基清除能力分析,、多酚氧化酶(PPO)活性檢測、過氧化物酶(POD)活性檢測等試劑盒,。
超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測試劑盒為例,,提供一種簡單易用的比色測定法,用于定量測定血清,,血漿,,組織/細(xì)胞裂解液和其它生物體液中的SOD酶活性。
特點(diǎn)是:1.測定血清,,血漿,,組織/細(xì)胞裂解物和其他生物體液中的SOD酶活性。2.通過WST-8法測定SOD活性,,zui大抑制率可接近100%,,不受一些常見干擾因素的干擾。3.廣泛的檢測范圍:3.13- 200U/mL,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
蔗糖合成酶(分解方向 SSⅠ)測試盒微量法 | 轉(zhuǎn)氫酶1測試盒 |
植物全碳(QC)含量測試盒 | 轉(zhuǎn)氫酶2測試盒 |
中性木聚糖酶測試盒/中性半纖維素酶測試盒 | 總多糖含量測試盒 |
中性轉(zhuǎn)化酶(NI)測試盒 | 總抗氧化能力(ABTS法)測試盒 |
植物硝態(tài)氮測試盒 | 總抗氧化能力(FRAP法)測試盒 |
植物葉綠素(chlorophyll)含量測試盒 | β2糖蛋白1抗體IgG檢測試劑盒 β2-GP1 Ab IgG ELISA Kit |
植物原花青素(OPC)測試盒 | 親核素α7檢測試劑盒 KPNα7 ELISA Kit |
植物中鈉濃度測試盒 | 親核素α6檢測試劑盒 KPNα6 ELISA Kit |
植物全碳(QC)含量測試盒 | 親核素α5檢測試劑盒 KPNα5 ELISA Kit |
植物硝態(tài)氮測試盒 | 親核素α4檢測試劑盒 KPNα4 ELISA Kit |
植物葉綠素(chlorophyll)含量測試盒 | 親核素α3檢測試劑盒 KPNα3 ELISA Kit |
植物原花青素(OPC)測試盒 | 親核素α2檢測試劑盒 KPNα2 ELISA Kit |
植物中鈉濃度測試盒 | 中性,、堿性土壤速效磷測試盒微量法親核素α1檢測試劑盒 KPNα1 ELISA Kit |
植物總酚(Tp)測試盒 | 鞘磷脂脂質(zhì)蛋白1檢測試劑盒 PLP1 ELISA Kit |
中性,、堿性土壤速效磷測試盒 | 鞘磷脂磷SUAN二酯4檢測試劑盒 SMPD4 ELISA Kit |