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幾丁質(zhì)酶測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50管/24樣
貨號(hào) GOY-SH224-B 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) 檢測(cè)方法 糖代謝系列
產(chǎn)品類別 可見(jiàn)分光光度法 品牌 谷研
貨期 現(xiàn)貨    
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詳細(xì)介紹

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

商品屬性:

產(chǎn)品名稱

幾丁質(zhì)酶測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法

規(guī)格

50管/24樣

檢測(cè)方法

可見(jiàn)分光光度法

貨號(hào)

GOY-SH224-B

產(chǎn)品分類

糖代謝系列

用途

僅供科研實(shí)驗(yàn)


幾丁質(zhì)酶測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法

測(cè)定意義:

幾丁質(zhì)主要存在于蝦、蟹,、昆蟲(chóng)等甲殼類動(dòng)物的外殼與軟體動(dòng)物的器官(例如烏賊的軟骨),,以及真菌類的細(xì)胞壁中。而幾丁質(zhì)酶(EC 3.2.1.14)可催化幾丁質(zhì)水解,,具有抵御真菌侵染的作用,,成為抗真菌病害的研究熱點(diǎn)。

測(cè)定原理

幾丁質(zhì)酶水解幾丁質(zhì)產(chǎn)生N-乙酰氨基葡萄糖,進(jìn)一步與DNS試劑反應(yīng)產(chǎn)生棕紅色化合物,,在540nm處有特征吸收峰,,吸光值增加速率反映了幾丁質(zhì)酶的活性。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平,、水浴鍋,、離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì),、1 mL玻璃比色皿,,甲苯(土壤樣品專用)和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液一:液體 25mL×1 瓶,,4℃保存,。

提取液二:液體 25mL×1 瓶,4℃保存,。

試劑一:粉劑×1 瓶,,-20℃保存;

試劑二:液體 25mL×1 瓶,,4℃保存,;

試劑三:液體 14μL×1 支,4℃保存,;

組織樣本的前處理:

①總 GAPDH 酶提?。航ㄗh稱取約 0.1g 樣本,加入 1mL 提取液一,,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,,200W,破碎 3s,,間歇 7s,,總時(shí)間 1min),然后 4℃,,8000g 離心 10min,,取上清測(cè)定。

②胞漿和葉綠體 GAPDH 酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10的比例(建議稱取約 0.1g 樣本,,加入 1mL 提取液一),,冰浴勻漿后于 4℃,200g 離心 5min,,棄沉淀,,取上清在4℃,8000g 離心 10min,,取上清用于測(cè)定胞漿 GAPDH 酶活性,,取沉淀加 1mL 提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,,破碎 3s,間歇 7s,,總時(shí)間 1min),,然后 4℃,8000g 離心 10min,,取上清測(cè)定葉綠體中 GAPDH 酶活性,。

建議測(cè)定總 GAPDH 酶活性,按照步驟①提取粗酶液,,若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的GAPDH,,則按照步驟②提取粗酶液。細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞的前處理先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),,離心后棄上清,;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液一體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,,功率 20%或 200W,,超聲 3s,間隔 10s,,重復(fù) 30 次),;8000g 4℃離心10min,取上清,,置冰上待測(cè),。

測(cè)定步驟:

1、 分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上,,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 340nm,,蒸餾水調(diào)零。

2,、 樣本測(cè)定

(1)工作液的配制:將試劑二全部倒入試劑一瓶中,,充分溶解,37℃(哺乳動(dòng)物)或 25℃(其它物種)預(yù)熱 10 分鐘,;用不完的試劑分裝后-20℃保存,,禁止反復(fù)凍融。

(2)在試劑三中加入 500μL 蒸餾水,,充分混勻待用,;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融,。

(3)在 1mL 石英比色皿中加入 30μL 樣本,、20μL 試劑三和 950μL 工作液,混勻,加入最后一個(gè)試劑的同時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí),,記錄 340nm 處 20s 時(shí)的吸光值 A1 和 5min20s 后的吸光值

A2,,計(jì)算 ΔA=A1-A2。

GAPDH 活性計(jì)算

(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算

單位的定義:每 mg 組織蛋白每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個(gè)酶活力單位,。GAPDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T=1072×ΔA÷Cpr

(2)按樣本鮮重計(jì)算

單位的定義:每 g 組織每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個(gè)酶活力單位,。GAPDH(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V 樣÷V 樣總) ÷T=1072×ΔA÷W

(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算

單位的定義:每一萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個(gè)酶活力單位。GAPDH(nmol/min/104cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(500 ×V 樣÷V 樣總) ÷T=2.144×ΔAV 反總:反應(yīng)體系總體積,,1×10-3L,;ε:NADH 摩爾消光系數(shù),6.22×103L / mol /cm,;d:比色皿光徑,,1cm,;V 樣:加入樣本體積,,0.03 mL,;V 樣總:加入提取液體積,,1 mL,;T:反應(yīng)時(shí)間,,5 min,;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,,mg/mL,;W:樣本質(zhì)量,,g;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),,500 萬(wàn),。

生化檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)操作說(shuō)明:

一、抗氧化系列生化檢測(cè)試劑盒

包括氧化酶(XO)活性分析,、超氧陰離子清除能力分析,、葡萄糖氧化酶活性(GOD)檢測(cè)、總抗氧化能力(TAC)檢測(cè),、植物原花青素(OPC)含量檢測(cè),、植物類黃酮含量檢測(cè)、植物總酚(TP)含量檢測(cè)試劑盒,。

氧化酶(XO)活性分析試劑盒為例,,提供了一種簡(jiǎn)單易用的比色分析法,用于測(cè)定各種樣品中的XO活性,,特點(diǎn)是測(cè)定血清,,血漿,組織/細(xì)胞裂解物和其他生物體液中的氧化酶活性,,以及廣泛的檢測(cè)范圍:15.6 -500 mU/mL,。

二,、氧化系列生化檢測(cè)試劑盒

包括過(guò)氧化氫酶 (CAT) 活性分析、過(guò)氧化氫(H2O2)檢測(cè),、脂質(zhì)過(guò)氧化(丙二醛) 分析,、蛋白質(zhì)羰基含量檢測(cè)、超氧陰離子含量檢測(cè)等試劑盒,。

蛋白質(zhì)羰基含量檢測(cè)試劑盒(比色法)為例,,提供了一種簡(jiǎn)單易用的比色法,用于分析不同生物樣品(細(xì)胞/組織裂解液,,生物液體)中蛋白質(zhì)羰基含量,。在370 nm處有特征吸收峰,。

特點(diǎn)是:1.測(cè)定組織樣本,、細(xì)胞、細(xì)菌,、血清等中的蛋白質(zhì)羰基含量,。2.樣本處理、實(shí)驗(yàn)步驟以及結(jié)果計(jì)算更加詳盡準(zhǔn)確精煉,。3.保質(zhì)期長(zhǎng),。


幾丁質(zhì)酶測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法


三、抗逆系列生化檢測(cè)試劑盒

包括超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測(cè),、羥自由基清除能力分析,、多酚氧化酶(PPO)活性檢測(cè)、過(guò)氧化物酶(POD)活性檢測(cè)等試劑盒,。

超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測(cè)試劑盒為例,,提供一種簡(jiǎn)單易用的比色測(cè)定法,用于定量測(cè)定血清,,血漿,,組織/細(xì)胞裂解液和其它生物體液中的SOD酶活性。

特點(diǎn)是:1.測(cè)定血清,,血漿,,組織/細(xì)胞裂解物和其他生物體液中的SOD酶活性。2.通過(guò)WST-8法測(cè)定SOD活性,,zui大抑制率可接近100%,,不受一些常見(jiàn)干擾因素的干擾。3.廣泛的檢測(cè)范圍:3.13- 200U/mL,。

公司正在出售的產(chǎn)品:

非蛋白質(zhì)巰基測(cè)試盒微量法

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乙醇含量測(cè)試盒微量法

大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2ELISA試劑盒

乙醇含量測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法

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乙醇酸氧化酶測(cè)試盒微量法

大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1ELISA試劑盒

乙醇酸氧化酶測(cè)試盒紫外分光光度法

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