詳細(xì)介紹
正式測定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 50管/48樣 | |
檢測方法 | 光度法 | 貨號 | GOY-SH349 |
產(chǎn)品分類 | 土壤系列 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
測定意義:
土壤有機(jī)碳(Soil organic carbon, SOC)概念是指通過微生物作用所形成的腐殖質(zhì),、動(dòng)植物殘?bào)w和微生物體中的碳元素含量,即為土壤有機(jī)碳(SOC),。
土壤有機(jī)碳根據(jù)微生物可利用程度分為易分解有機(jī)碳,,難分解有機(jī)碳和惰性有機(jī)碳。易分解者有較高的生物利用率與損失率,,難分解者則有較高的殘留率,,一般占土壤有機(jī)質(zhì)的60%~80%。且有相當(dāng)多的部分參加到腐殖質(zhì)的形成作用中去,。
測定原理
有機(jī)碳光度法是以硫酸亞為標(biāo)準(zhǔn)溶液,,將容量法的滴定手段改為光度測定手段,進(jìn)行土壤有機(jī)質(zhì)585 nm 處比色的測定,,光度法測定土壤中的有機(jī)碳具有設(shè)備簡單,、 操作簡便 、 測定結(jié)果準(zhǔn)確等特點(diǎn) ,,特別適合大批樣品的快速測定,。
需自備的儀器和用品
天平、研缽,、離心機(jī),、消解儀,、濃硫酸
試劑的組成和配制:
提取液一:液體 25mL×1 瓶,4℃保存,。
提取液二:液體 25mL×1 瓶,,4℃保存。
試劑一:粉劑×1 瓶,,-20℃保存,;
試劑二:液體 25mL×1 瓶,4℃保存,;
試劑三:液體 14μL×1 支,,4℃保存;
組織樣本的前處理:
①總 GAPDH 酶提?。航ㄗh稱取約 0.1g 樣本,,加入 1mL 提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,,200W,,破碎 3s,間歇 7s,,總時(shí)間 1min),,然后 4℃,8000g 離心 10min,,取上清測定,。
②胞漿和葉綠體 GAPDH 酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10的比例(建議稱取約 0.1g 樣本,加入 1mL 提取液一),,冰浴勻漿后于 4℃,,200g 離心 5min,棄沉淀,,取上清在4℃,,8000g 離心 10min,取上清用于測定胞漿 GAPDH 酶活性,,取沉淀加 1mL 提取液二,,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,,破碎 3s,,間歇 7s,總時(shí)間 1min),,然后 4℃,,8000g 離心 10min,取上清測定葉綠體中 GAPDH 酶活性。
建議測定總 GAPDH 酶活性,,按照步驟①提取粗酶液,,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的GAPDH,則按照步驟②提取粗酶液,。細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞的前處理先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),,離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液一體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液一),,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,,功率 20%或 200W,超聲 3s,,間隔 10s,重復(fù) 30 次),;8000g 4℃離心10min,,取上清,置冰上待測,。
測定步驟:
1,、 分光光度計(jì)預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長至 340nm,,蒸餾水調(diào)零,。
2、 樣本測定
(1)工作液的配制:將試劑二全部倒入試劑一瓶中,,充分溶解,,37℃(哺乳動(dòng)物)或 25℃(其它物種)預(yù)熱 10 分鐘;用不完的試劑分裝后-20℃保存,,禁止反復(fù)凍融,。
(2)在試劑三中加入 500μL 蒸餾水,充分混勻待用,;用不完的試劑分裝后-20℃保存,,禁止反復(fù)凍融。
(3)在 1mL 石英比色皿中加入 30μL 樣本,、20μL 試劑三和 950μL 工作液,,混勻,加入最后一個(gè)試劑的同時(shí)開始計(jì)時(shí),,記錄 340nm 處 20s 時(shí)的吸光值 A1 和 5min20s 后的吸光值
A2,,計(jì)算 ΔA=A1-A2。
GAPDH 活性計(jì)算
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義:每 mg 組織蛋白每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個(gè)酶活力單位,。GAPDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T=1072×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義:每 g 組織每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個(gè)酶活力單位,。GAPDH(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V 樣÷V 樣總) ÷T=1072×ΔA÷W
(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算
單位的定義:每一萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個(gè)酶活力單位。GAPDH(nmol/min/104cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(500 ×V 樣÷V 樣總) ÷T=2.144×ΔAV 反總:反應(yīng)體系總體積,,1×10-3L,;ε:NADH 摩爾消光系數(shù),,6.22×103L / mol /cm;d:比色皿光徑,,1cm,;V 樣:加入樣本體積,0.03 mL,;V 樣總:加入提取液體積,,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,,5 min,;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL,;W:樣本質(zhì)量,,g;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),,500 萬,。
生化檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)操作說明:
一、抗氧化系列生化檢測試劑盒
包括氧化酶(XO)活性分析,、超氧陰離子清除能力分析,、葡萄糖氧化酶活性(GOD)檢測、總抗氧化能力(TAC)檢測,、植物原花青素(OPC)含量檢測,、植物類黃酮含量檢測、植物總酚(TP)含量檢測試劑盒,。
氧化酶(XO)活性分析試劑盒為例,,提供了一種簡單易用的比色分析法,用于測定各種樣品中的XO活性,,特點(diǎn)是測定血清,,血漿,組織/細(xì)胞裂解物和其他生物體液中的氧化酶活性,,以及廣泛的檢測范圍:15.6 -500 mU/mL,。
二、氧化系列生化檢測試劑盒
包括過氧化氫酶 (CAT) 活性分析,、過氧化氫(H2O2)檢測,、脂質(zhì)過氧化(丙二醛) 分析、蛋白質(zhì)羰基含量檢測,、超氧陰離子含量檢測等試劑盒,。
蛋白質(zhì)羰基含量檢測試劑盒(比色法)為例,提供了一種簡單易用的比色法,用于分析不同生物樣品(細(xì)胞/組織裂解液,,生物液體)中蛋白質(zhì)羰基含量,。在370 nm處有特征吸收峰。
特點(diǎn)是:1.測定組織樣本,、細(xì)胞,、細(xì)菌、血清等中的蛋白質(zhì)羰基含量,。2.樣本處理,、實(shí)驗(yàn)步驟以及結(jié)果計(jì)算更加詳盡準(zhǔn)確精煉。3.保質(zhì)期長,。
三,、抗逆系列生化檢測試劑盒
包括超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測、羥自由基清除能力分析,、多酚氧化酶(PPO)活性檢測,、過氧化物酶(POD)活性檢測等試劑盒。
超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測試劑盒為例,,提供一種簡單易用的比色測定法,用于定量測定血清,,血漿,,組織/細(xì)胞裂解液和其它生物體液中的SOD酶活性。
特點(diǎn)是:1.測定血清,,血漿,,組織/細(xì)胞裂解物和其他生物體液中的SOD酶活性。2.通過WST-8法測定SOD活性,,zui大抑制率可接近100%,,不受一些常見干擾因素的干擾。3.廣泛的檢測范圍:3.13- 200U/mL,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
土壤芳基硫酸酯酶(SASF)測試盒可見分光光度法 | ADPG焦磷酸化酶(AGP)測試盒微量法 |
總抗氧化能力(ABTS法)測試盒 | ADPG焦磷酸化酶(AGP)測試盒紫外分光光度法 |
3磷酸甘油酸激酶(PGK)測試盒紫外分光光度法 | ADP含量測試盒HPLC法 |
6磷酸葡萄糖酸脫氫酶(6PGDH)測試盒微量法 | AMP含量測試盒HPLC法 |
總抗氧化能力(FRAP法)測試盒 | ATP含量測試盒微量法 |
總巰基測試盒 | 脆性組氨SUAN三聯(lián)體檢測試劑盒 FHIT ELISA Kit |
總糖含量測試盒 | 抗磷壁SUAN抗體檢測試劑盒 TA ELISA Kit |
總皂苷含量測試盒 | 抗淋巴細(xì)胞球蛋白檢測試劑盒 ALG ELISA Kit |
總抗氧化能力(ABTS法)測試盒 | 抗淋巴細(xì)胞毒抗體檢測試劑盒 ALA/LCA ELISA Kit |
總抗氧化能力(FRAP法)測試盒 | 抗鏈球菌溶血素O/抗O檢測試劑盒 ASO ELISA Kit |
總巰基測試盒 | 抗鏈激檢測試劑盒 SK ELISA Kit |
總糖含量測試盒 | 抗利尿V2受體/精氨SUAN加壓素受體2檢測試劑盒 AVPR2 ELISA Kit |
總皂苷含量測試盒 | 土壤有機(jī)碳(SOC)含量測試盒光度法抗類固醇生成細(xì)胞抗體檢測試劑盒 SCA ELISA Kit |
組織無機(jī)磷含量測試盒 | 抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎核抗原抗體檢測試劑盒 RANA ELISA Kit |
3磷酸甘油酸激酶(PGK)測試盒微量法 | 抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎核抗原檢測試劑盒 RANA ELISA Kit |